Downs綜合征產(chǎn)前篩查及診斷方法的發(fā)展趨勢(shì)

王瓊瑤，童曉文，紀(jì)亞忠

(上海市同濟(jì)醫(yī)院生殖醫(yī)學(xué)科，上海 200065)

Downs綜合征(Downs syndrome，DS)，又稱 21三體綜合征，是發(fā)現(xiàn)最早、最常見的染色體病，在新生兒中的發(fā)病率為1/600～1/800［1］，占新生兒染色體病的70%～80%。母親生育年齡是影響其發(fā)病率的重要因素(大于35歲時(shí)發(fā)病率明顯增高)。DS患兒出生時(shí)體質(zhì)量偏低，肌張力低下，頭顱小而圓，臉圓而扁平，臉裂細(xì)且上外傾斜，眼距過寬，常有斜視，嘴小唇厚，舌大外伸(伸舌樣癡呆之名由此而來)，形成特有的面容。約1/2以上的患者有先天性心臟病，主要是室間隔缺損、動(dòng)脈導(dǎo)管未閉等。男性患者常有隱睪，睪丸有生精過程，但精子常減少，性欲下降，尚未見有生育者。女性患者通常無(wú)月經(jīng)，但少數(shù)能妊娠和生育。精神發(fā)育遲滯或智能低下是本病最突出最嚴(yán)重的表現(xiàn)。患者平均壽命為16.2歲［2］，其生活往往不能自理，其社會(huì)適應(yīng)和勞動(dòng)能力較差，給家庭和社會(huì)造成了沉重的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。2003年，我國(guó)每一新發(fā)病例造成39萬(wàn)元的家庭經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)，給社會(huì)造成約45萬(wàn)元負(fù)擔(dān)，而所有新發(fā)病例造成的社會(huì)負(fù)擔(dān)達(dá)81億元［3］。產(chǎn)前篩查和診斷能在孕早期識(shí)別胎兒嚴(yán)重的缺陷，及時(shí)干預(yù)，從而減少缺陷兒的出生。我國(guó)目前對(duì)年齡35歲以上的孕婦進(jìn)行產(chǎn)前篩查，對(duì)篩查高危的孕婦常規(guī)行進(jìn)一步的診斷，這對(duì)產(chǎn)前檢出DS胎兒、防止這類胎兒的出生起到了一定作用。本文就近年來該綜合征的產(chǎn)前篩查和產(chǎn)前診斷研究進(jìn)展綜述如下。

1 產(chǎn)前篩查

Downs綜合征的產(chǎn)前篩查根據(jù)孕期，即在孕早期及孕中期均有不同的標(biāo)志物。孕早期(11～13周)篩查常用的指標(biāo)有:胎兒頸后透明層(nuchal translcene，NT)厚度、孕婦血清游離 β-hCG、妊娠相關(guān)血漿蛋白A(pregnancy associated plasma protein A，PAPP-A)及孕婦年齡。NT是覆蓋胎兒頸部脊柱軟組織和皮膚之間的皮下透明層，在早孕期NT的增厚與2l三體的高風(fēng)險(xiǎn)有關(guān)。hCG為胎盤分泌的一種糖蛋白激素，在孕10周前隨著孕齡的增加而增加，隨后隨著孕齡逐漸減少，在早、中孕期，孕21三體胎兒孕婦的血hCG高于孕正常胎兒的孕婦。PAPP-A是一種胎盤合成的高分子量的糖蛋白，在早孕期隨著妊娠周數(shù)增加，母體血清PAPP-A水平也增加。將這三種篩查標(biāo)志物聯(lián)合起來共同評(píng)估胎兒患Downs綜合征的風(fēng)險(xiǎn)，可提高檢出率［4］。

孕中期(15～20周)母血篩查是最經(jīng)典的方法，臨床上常用的有二聯(lián)篩查和三聯(lián)篩查。二聯(lián)篩查即以血清甲胎蛋白(AFP)和游離β-hCG為指標(biāo)，結(jié)合孕婦年齡等參數(shù)計(jì)算胎兒患Downs綜合征風(fēng)險(xiǎn)的方法。將AFP、hCG和雌三醇(μE3)三項(xiàng)指標(biāo)合起來進(jìn)行所謂三聯(lián)篩查。研究［5］顯示在AFP下降的同時(shí)，母血中hCG明顯增高，通?？蛇_(dá)正常孕婦2倍以上，游離μE3的水平則比正常低25%左右，且各指標(biāo)間相互獨(dú)立。

目前，妊娠中期的血清三聯(lián)檢測(cè)因其檢測(cè)通量高、價(jià)廉，是使用最廣泛的組合。一般情況下DS檢出率為 65% ～75%［6］，假陽(yáng)性率 5%［7］。另外，將AFP值、hCG值以及孕婦的年齡、體質(zhì)量、懷孕周數(shù)利用產(chǎn)前篩查軟件可計(jì)算出胎兒患Downs綜合征的風(fēng)險(xiǎn)。如果結(jié)果顯示低于1/270，就表示胎兒患病風(fēng)險(xiǎn)較低，不到1%。但如果高于1/270，就表示胎兒患病的危險(xiǎn)性較高，應(yīng)做羊膜腔穿刺進(jìn)一步檢查。

產(chǎn)前篩查對(duì)孕婦及胎兒的創(chuàng)傷小，且費(fèi)用低，普遍應(yīng)用可以減少Downs綜合征兒的出生率，減輕國(guó)家及家庭的負(fù)擔(dān)。但是，我國(guó)目前產(chǎn)前篩查的工作尚不規(guī)范，各實(shí)驗(yàn)室間變異系數(shù)較大［8］。另外由于不能準(zhǔn)確確定孕齡，不在空腹?fàn)顟B(tài)下采血，篩查出高風(fēng)險(xiǎn)后確診率低，活產(chǎn)兒隨訪時(shí)間短或缺乏隨訪等，使得篩查的結(jié)果不理想［5］。

2 產(chǎn)前診斷

產(chǎn)前診斷的適應(yīng)證有［9］:①年齡＞35歲;②有染色體病或家族中有遺傳病;③有先天畸形兒或染色體病兒孕史，或有習(xí)慣性流產(chǎn)史;④Downs篩查高危;⑤超聲檢查胎兒NT＞3 mm;⑥孕期超聲檢查有胎畸形或?qū)m內(nèi)發(fā)育不良。

2.1 侵入性產(chǎn)前診斷 傳統(tǒng)的產(chǎn)前診斷為侵入性方法，通過羊膜腔穿刺、絨毛取樣或臍靜脈穿刺取材，獲得胎兒細(xì)胞進(jìn)行診斷。

2.1.1 羊膜腔穿刺術(shù) 是產(chǎn)前診斷最常用的取材方法。由于胎齡大的羊水細(xì)胞活力較差，細(xì)胞培養(yǎng)難以成功，且胎兒宮內(nèi)活動(dòng)較頻繁，取羊水時(shí)易損傷胎兒，所以通常認(rèn)為羊膜腔穿刺的最佳時(shí)期為16～20周［10］。羊膜腔穿刺術(shù)有多種并發(fā)癥，近來文獻(xiàn)［11］報(bào)道孕中期羊膜腔穿刺的胎兒丟失率在0.5% ～1.0%之間。有2% ～3%孕婦可出現(xiàn)子宮收縮、腹部腫脹、壓痛、陰道出血、感染、漏水或胎兒損傷等并發(fā)癥［12］。

2.1.2 臍靜脈穿刺術(shù) 1983年Daffos等［13］報(bào)道了在超聲引導(dǎo)下經(jīng)母腹行臍靜脈穿刺術(shù)，使染色體疾病的產(chǎn)前診斷有了新的途徑。但是臍靜脈穿刺術(shù)技術(shù)要求較高，不同的孕周在技術(shù)上存在著差異。孕周過小時(shí)，臍血管直徑太小不易刺入，刺中后也易脫落;孕周過大，則胎兒軀體遮蓋臍帶，使臍帶暴露差，且臍帶角質(zhì)較厚不易刺通，故一般以孕18～26周為宜［14］。該穿刺術(shù)的并發(fā)癥比羊膜腔穿刺多，如出血、流產(chǎn)、早產(chǎn)、胎兒心動(dòng)過緩、穿刺后畸形羊水過多等。臍帶穿刺術(shù)的胎兒丟失率為1.2% ～4.9%［15］。

2.1.3 絨毛取樣法 有經(jīng)腹絨毛取樣、經(jīng)陰道絨毛取樣兩種途徑，多在早孕期B型超聲引導(dǎo)下進(jìn)行。因有流產(chǎn)、宮內(nèi)感染、羊水滲漏、血腫及母體免疫反應(yīng)等并發(fā)癥，故術(shù)前要對(duì)孕婦進(jìn)行詳細(xì)全面的病史了解、全身檢查、婦科檢查及必要的化驗(yàn)檢查。

2.2 非侵入性產(chǎn)前診斷 由于傳統(tǒng)的產(chǎn)前診斷為侵入性操作取得標(biāo)本，不僅對(duì)胎兒及孕婦造成一定的創(chuàng)傷，并且會(huì)帶來一些臨床并發(fā)癥，因此尋找和建立一種行之有效的非創(chuàng)性產(chǎn)前診斷方法，降低產(chǎn)前診斷風(fēng)險(xiǎn)、減少成本、縮短診斷時(shí)間，是目前產(chǎn)前診斷研究的方向。國(guó)內(nèi)外已有多種無(wú)創(chuàng)性產(chǎn)前診斷的研究，多是通過母血中胎兒的遺傳物質(zhì)進(jìn)行診斷。母血中胎兒的遺傳物質(zhì)主要有:胎兒有核細(xì)胞、胎兒游離DNA、胎兒游離RNA，目前用于產(chǎn)前診斷研究較多的是胎兒有核細(xì)胞和胎兒游離DNA。

2.2.1 母血中胎兒有核細(xì)胞 1969年，Walknowsks等［16］首次報(bào)道在母血循環(huán)中可能存在胎兒細(xì)胞，隨后一些學(xué)者相繼證實(shí)了這一發(fā)現(xiàn)。進(jìn)入20世紀(jì)90年代以來，隨著分子生物學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)等技術(shù)的發(fā)展與完善，形成了從母血循環(huán)中識(shí)別、分離和檢測(cè)胎兒細(xì)胞等一系列遺傳學(xué)診斷技術(shù)，并應(yīng)用于產(chǎn)前診斷。孕婦血中胎兒細(xì)胞的主要類型包括滋養(yǎng)層細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、粒細(xì)胞、單核細(xì)胞、有核紅細(xì)胞(NRBC)等。①滋養(yǎng)層細(xì)胞是最早被發(fā)現(xiàn)存在于母體外周血循環(huán)中的胎兒細(xì)胞，存在時(shí)間從4～5周至分娩后，數(shù)量多且形態(tài)特別，但是由于細(xì)胞常具有多核及嵌合核型特征，從而影響遺傳學(xué)結(jié)果分析。因此滋養(yǎng)層細(xì)胞在非侵入性產(chǎn)前診斷中的應(yīng)用尚有許多問題需要解決。②胎兒淋巴細(xì)胞因在母血循環(huán)中出現(xiàn)的時(shí)間晚，存在時(shí)間長(zhǎng)(長(zhǎng)達(dá)1～5年)，且量極少(僅為胎兒NRBC的0.1%)，難以用于產(chǎn)前診斷。③胎兒有核紅細(xì)胞是母血中分離量最多也是最容易分離得到的細(xì)胞，在妊娠6周時(shí)即可出現(xiàn)，妊娠13周時(shí)達(dá)高峰，后隨著孕齡的增加而減少，產(chǎn)后3個(gè)月即從母體循環(huán)中消失。且NRBC攜帶胎兒全部基因組信息，可提供遺傳學(xué)和分子生物學(xué)分析。母血循環(huán)中的胎兒有核紅細(xì)胞，可以通過熒光激活細(xì)胞分離技術(shù)(fluorescence-activated cell sorting，F(xiàn)ACS)和磁性細(xì)胞分離技術(shù)(magnetic cell sorting，MACS)分離純化［17-18］，然后通過PCR或FISH技術(shù)對(duì)胎兒?jiǎn)位虿』蛉旧w異常進(jìn)行診斷。目前已經(jīng)可以成功地進(jìn)行13-三體、18-三體、21-三體等非整倍體胎兒的產(chǎn)前診斷。

2.2.2 母血胎兒游離 DNA 1997 年，Lo等［19］在母體外循環(huán)中發(fā)現(xiàn)了胎兒來源的游離DNA，從而為無(wú)創(chuàng)性產(chǎn)前診斷又提供了一個(gè)獲取胎兒遺傳物質(zhì)的新選擇。研究發(fā)現(xiàn)，胎兒游離DNA在孕5周時(shí)即可在孕婦外周血中檢測(cè)到，并隨孕周數(shù)增加而升高。血漿中胎兒DNA的清除半衰期約為16.3 min，分娩后2 h孕婦血漿已經(jīng)檢測(cè)不到胎兒DNA。胎兒DNA的提取方法有多種，Chiu等［20］將孕婦外周血經(jīng)EDTA抗凝之后，以1 600 g離心10 min，取上清液重復(fù)離心1次，然后按照血樣DNA提取試劑盒說明書中血液或體液DNA的提取方案提取DNA，該方法是目前最為常用的提取方法。

2.3 產(chǎn)前診斷方法 用于產(chǎn)前診斷的方法有多種，較常見的有細(xì)胞遺傳學(xué)方法和分子生物學(xué)技術(shù)。

2.3.1 細(xì)胞遺傳學(xué)方法 細(xì)胞遺傳學(xué)方法是傳統(tǒng)的、臨床上最常用的染色體數(shù)目異常的診斷方法，也是18-三體、21-三體等染色體疾病診斷的金標(biāo)準(zhǔn)。其主要從染色體的數(shù)目形態(tài)和結(jié)構(gòu)來研究人類的遺傳現(xiàn)象。在產(chǎn)前診斷中，常將取得的絨毛、羊水、臍帶血進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，將培養(yǎng)后的細(xì)胞進(jìn)行核型鑒定，以發(fā)現(xiàn)染色體數(shù)目及結(jié)構(gòu)的改變。利用絨毛進(jìn)行染色體核型分析，由于結(jié)果易出現(xiàn)假陽(yáng)性或假陰性，所以核型異常者需要進(jìn)行羊水細(xì)胞培養(yǎng)以明確診斷。為了正確診斷，羊水細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)至少有15個(gè)以上可供分析的核型，顯帶應(yīng)達(dá)到400條左右。故該方法需要較長(zhǎng)時(shí)間的細(xì)胞培養(yǎng)及大量的人工操作，對(duì)染色體核型分析人員技術(shù)要求高，失敗風(fēng)險(xiǎn)較大。在羊水細(xì)胞培養(yǎng)失敗、DNA分析無(wú)法診斷或錯(cuò)過絨毛和羊水取樣時(shí)機(jī)等情況下，可利用臍帶血進(jìn)行細(xì)胞遺傳學(xué)分析。

2.3.2 分子生物學(xué)技術(shù) 分子生物學(xué)技術(shù)是近幾年發(fā)展起來的診斷方法。常用于染色體疾病產(chǎn)前診斷的技術(shù)有:熒光原位雜交技術(shù)(fluorescence in situ hybridization，F(xiàn)ISH)、實(shí)時(shí)熒光定量 PCR(realtime fluorescence quantitative PCR，RTFQ PCR)、引物延伸預(yù)擴(kuò)增法(primer extension prea-mplification，PEP)、套式PCR。

2.3.2.1 FISH FISH 是在 20 世紀(jì) 80 年代末在的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種非放射性分子細(xì)胞遺傳技術(shù)，以熒光標(biāo)記取代同位素標(biāo)記而形成的一種新的原位雜交方法。FISH的基本原理是將DNA或RNA探針用特殊的核苷酸分子標(biāo)記，然后將探針直接雜交到染色體或DNA纖維切片上，再用熒光素分子偶聯(lián)的單克隆抗體與分子特異性結(jié)合來檢測(cè)DNA序列在染色體或DNA纖維切片上的定性、定位、相對(duì)定量分析。常用的探針有以下三類:①染色體重復(fù)序列探針，主要是指著絲粒α-衛(wèi)星 DNA重復(fù)序列探針和端粒重復(fù)序列探針，用以檢測(cè)染色體數(shù)目異常，同時(shí)由于G顯帶時(shí)，端粒區(qū)是蒼白的，因此涉及此區(qū)的易位常難以檢測(cè)，而應(yīng)用端粒探針則彌補(bǔ)了G顯帶的不足;②染色體涂染探針，包括通過流式分選或顯微切割獲得的全染色體或染色體臂以及特異性區(qū)帶的涂染探針，用以檢測(cè)染色體數(shù)目或結(jié)構(gòu)異常;③染色體單一序列探針，包括各類人工染色體探針，如酵母人工染色體(yeast artificial chromosome，YAC)、細(xì)菌人工染色體(bacterial artificial chromosome，BAC)、P1 人工染色體(P1 artificial chromosome，PAC)探針，主要用以識(shí)別染色體的易位、缺失和擴(kuò)增。目前國(guó)產(chǎn)的已用于臨床的染色體診斷的FISH 探針有:21、18、13/21、13/18 號(hào)和 X、Y 等探針［21-22］。FISH比傳統(tǒng)的核型分析操作簡(jiǎn)便迅速、直觀性強(qiáng)，可用于外周血細(xì)胞、臍血、未經(jīng)培養(yǎng)的分裂期和間期細(xì)胞。間期細(xì)胞容易獲得，且其數(shù)量多使分析的細(xì)胞數(shù)目也相應(yīng)的增多，這是FISH技術(shù)最大的優(yōu)勢(shì)。但FISH探針試劑價(jià)格昂貴，極大限制了它在臨床上的應(yīng)用。

2.3.2.2 RTFQ PCR 雖然孕婦血中胎兒游離DNA較胎兒完整細(xì)胞含量豐富，但其絕對(duì)量仍然微乎其微，PCR技術(shù)的發(fā)展使得極少量的胎兒DNA不再成為限制產(chǎn)前基因診斷的因素。熒光定量PCR在1993年首次被應(yīng)用于Downs綜合征的產(chǎn)前診斷［23］。其原理是在PCR反應(yīng)體系中加入熒光標(biāo)記探針，通過光電傳導(dǎo)系統(tǒng)直接探測(cè)PCR擴(kuò)增過程中熒光信號(hào)的變化來獲得定量結(jié)果，所以還具有DNA雜交的高特異性和光譜技術(shù)的高精確性。應(yīng)用于染色體異常的產(chǎn)前診斷時(shí)，常選用目標(biāo)染色體上的幾個(gè)微衛(wèi)星重復(fù)序列STR作為標(biāo)記，利用PCR擴(kuò)增，將其產(chǎn)物熒光染色后，根據(jù)熒光強(qiáng)度的變化，確定是否存在染色體數(shù)目的異常。該方法在每次實(shí)驗(yàn)中均有管家基因?yàn)閮?nèi)參照基因，通過穩(wěn)定的內(nèi)參照基因校正，可以較準(zhǔn)確地反映目的及數(shù)量。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的整個(gè)反應(yīng)過程以及結(jié)果的測(cè)定都在密閉儀器中自動(dòng)完成，避免了由于污染造成的假陽(yáng)性。與常規(guī)PCR相比，實(shí)時(shí)熒光定量PCR具有特異性更強(qiáng)、數(shù)據(jù)穩(wěn)定、有效解決PCR污染和自動(dòng)化程度高等優(yōu)點(diǎn)。該方法對(duì)普通染色體非整倍體檢測(cè)的靈敏度非常高，平均為99.2%，并且在很多研究中心敏感度達(dá)到了100%［24-25］?，F(xiàn)已在國(guó)外多個(gè)產(chǎn)前診斷中心被廣泛應(yīng)用［25-27］，將QF-PCR的陽(yáng)性結(jié)果作為終止妊娠的指征［28］。

2.3.2.3 基因組測(cè)序 基因組測(cè)序技術(shù)可應(yīng)用于母血中胎兒有核紅細(xì)胞的檢測(cè)，也可應(yīng)用于分析母血中胎兒游離DNA。用于Downs綜合征產(chǎn)前診斷的技術(shù)主要是大規(guī)模并行基因組測(cè)序技術(shù)，其基本原理是對(duì)孕婦血漿中的所有DNA片段進(jìn)行高通量測(cè)序，然后對(duì)測(cè)序結(jié)果進(jìn)行生物信息分析，由于孕21三體胎兒的孕婦外周血中21號(hào)染色體的游離DNA比例高于孕正常胎兒的孕婦，因此可計(jì)算出胎兒患Downs綜合征的風(fēng)險(xiǎn)。2008年，Chiu等［29］利用此技術(shù)檢測(cè)了28例孕婦外周血標(biāo)本，其中14例Downs綜合征胎兒和14例正常胎兒均被準(zhǔn)確檢測(cè)。2010年，Lo等［30］的研究也證明了該技術(shù)應(yīng)用于利用母血胎兒游離DNA進(jìn)行非侵入性產(chǎn)前診斷是可行的。2011年，Chiu等［31］的研究中，該項(xiàng)技術(shù)應(yīng)用于產(chǎn)前診斷，Downs綜合征胎兒的檢出率達(dá)100%。該技術(shù)有所需樣本量少、檢出率高等優(yōu)點(diǎn)，但因容易出現(xiàn)假陰性結(jié)果、檢測(cè)準(zhǔn)確率不高而在臨床上廣泛應(yīng)用有一定的局限性。

2.3.2.4 套式PCR 原理是針對(duì)某一個(gè)待檢基因，設(shè)計(jì)兩對(duì)特異性引物，其中一對(duì)引物巢居于另一對(duì)引物擴(kuò)增產(chǎn)物的內(nèi)部。首先利用外側(cè)引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增，獲得一定量的產(chǎn)物后，再用第二對(duì)引物進(jìn)行擴(kuò)增，PCR反應(yīng)的敏感性和特異性都得到明顯提高。其缺點(diǎn)就是第二對(duì)引物擴(kuò)增時(shí)引起交叉污染的概率較大。

2.3.2.5 PEP-PCR 引物延伸預(yù)擴(kuò)增法(primer extension prea-mplification，PEP)是一種通過隨機(jī)引物將細(xì)胞克隆或單個(gè)細(xì)胞進(jìn)行全基因組擴(kuò)增，有效地使模板DNA的含量達(dá)到足以被檢測(cè)水平的方法。在此基礎(chǔ)上再進(jìn)行特異序列的擴(kuò)增，即聚合酶鏈反應(yīng)即可完成對(duì)微量靶基因的分析。它對(duì)于用孕婦外周血中極少量的胎兒遺傳物質(zhì)進(jìn)行產(chǎn)前基因診斷十分重要，使一個(gè)樣本完成多個(gè)位點(diǎn)的基因分析成為可能。目前已有研究，將母血中單個(gè)NRBC應(yīng)用PEP-PCR擴(kuò)增技術(shù)進(jìn)行產(chǎn)前診斷的報(bào)道［32］。

2.3.3 兩種方法的比較 分子生物學(xué)技術(shù)與傳統(tǒng)的G顯帶核型分析相比具有以下優(yōu)點(diǎn):快速。核型分析方法因需要對(duì)胎兒細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)然后進(jìn)行，通常從獲得標(biāo)本到出報(bào)告需要2～3周的時(shí)間，而利用QF-PCR或者FISH技術(shù)不需要進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，可以直接提取胎兒DNA進(jìn)行試驗(yàn)，整個(gè)過程只需數(shù)小時(shí)，孕婦及家人可以在采集標(biāo)本后的24～48 h內(nèi)收到診斷報(bào)告，大大縮短孕婦等待時(shí)間及減輕其在等待期間的焦慮。陽(yáng)性結(jié)果的孕婦，可以及早終止妊娠，爭(zhēng)取最佳醫(yī)療處理時(shí)間。所需樣本量少。完成核型分析至少需要15～20 ml的羊水標(biāo)本或2～4 mg的絨毛標(biāo)本，而QF-PCR和FISH只需要2 ml外周血就可以完成實(shí)驗(yàn)［33］。成本低。與核型分析相比較，分子生物學(xué)技術(shù)的檢測(cè)成本大大減低，可以大大減輕孕婦及家人的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。操作簡(jiǎn)便。核型分析操作復(fù)雜，對(duì)操作人員技術(shù)要求高，而應(yīng)用分子生物學(xué)技術(shù)操作簡(jiǎn)便，并且可以自動(dòng)化操作，適合在我國(guó)現(xiàn)有國(guó)情下進(jìn)行大規(guī)模應(yīng)用。但是分子生物學(xué)技術(shù)仍有一些不足之處，如熒光定量PCR技術(shù)目前只能夠檢測(cè)21、18、13、X及Y5種染色體非整倍體，無(wú)法對(duì)所有染色體進(jìn)行檢測(cè)。且存在一定的局限性，若單獨(dú)應(yīng)用將會(huì)有染色體結(jié)構(gòu)異常及嵌合體不能檢出。

3 展望

利用母血中胎兒的遺傳物質(zhì)進(jìn)行Downs綜合征的產(chǎn)前診斷，因取材無(wú)創(chuàng)、檢測(cè)時(shí)間短有著明顯的優(yōu)勢(shì)。無(wú)創(chuàng)性產(chǎn)前診斷的基礎(chǔ)研究已取得很大進(jìn)展，臨床應(yīng)用研究也取得了初步成功，但由于其尚處于起步階段，在臨床應(yīng)用中仍存在有許多問題，如何有效地提取胎兒DNA，避免母血細(xì)胞的污染，以及減少費(fèi)用等等。隨著技術(shù)的不斷進(jìn)步和發(fā)展，這些問題逐步被解決，無(wú)創(chuàng)性的產(chǎn)前檢查技術(shù)可望成為產(chǎn)前診斷的常規(guī)。

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