山女鱒人工繁育技術試驗

唐敬偉 任 波

（龍江縣水產(chǎn)技術推廣站 黑龍江 龍江 161100）

（中國水產(chǎn)科學院黑龍江水產(chǎn)研究所 黑龍江 哈爾濱 150010）

前言：山女鱒（Oncorhychus masou masou）屬于鮭形目、鮭科、鮭亞科、大麻哈魚屬，原產(chǎn)于日本，是馬蘇大麻哈魚的陸封淡水河溪魚類，屬冷水性魚類。我國于1996年引進，并成功進行了人工繁殖。該魚特點是終生保留幼鮭斑，體態(tài)雍容，色彩典雅，肉質(zhì)細嫩，品味鮮爽，深受消費者的喜愛，市場價格較高。

圖1 山女鱒成魚

在日本的20多種鮭科魚類中，被公認為是肉質(zhì)最好吃、淡水游釣最受歡迎的魚類，售價相當于虹鱒的2-3倍。又因體形、顏色雍容高稚，歷史上就倍受喜愛而被稱為“山女魚”或“山溪女皇”。至上個世紀90年代，日本的餐飲及游釣市場呈現(xiàn)出對山女鱒更加旺盛的需求趨勢。而當時的我國養(yǎng)鱒業(yè)僅僅是虹鱒魚單一品種養(yǎng)殖，品種的單一已經(jīng)成為養(yǎng)鱒業(yè)持續(xù)發(fā)展的限制因素。

1 山女鱒人工繁殖技術研究

1.1 材料和方法

池養(yǎng)山女鱒2年性成熟，產(chǎn)卵排精后死亡率很高，壽命2—3年，多為2年，及少可達4年。山女鱒繁殖時間是10月至11月份，繁殖水溫在13℃以下,水溫15℃左右開始產(chǎn)卵，懷卵量與魚體大小成正比例，多在300粒左右，卵重占魚體重的23—24%。滿2年的山女鱒大的可達500g左右。人工養(yǎng)殖條件下山女鱒1周年生長最高可達130g,平均值為56g。

1.1.1 查明性腺達完熟的年齡和完熟時期

黑龍江低溫區(qū)（即黑龍江水產(chǎn)研究所渤海冷水性魚類試驗站）：每年10月中旬至12月上旬是完熟產(chǎn)卵時期，雄魚早熟約半個月。22～24月齡的雄魚100%發(fā)育完熟，雌魚約70%發(fā)育完熟，30%的雌魚需達35～36月齡發(fā)育完熟，人繁季節(jié)是10月中旬至12月上旬。完熟雌魚約76%在10月中旬至11月中旬產(chǎn)卵繁殖，24%在11月中旬至12月上旬產(chǎn)卵繁殖。

1.1.2 親魚培育技術

在查明性腺發(fā)育規(guī)律、完熟時期及飼料質(zhì)量對懷卵量的影響等問題的基礎上，經(jīng)多年時間逐步完善了親魚培育技術。

親魚培育技術的關鍵：

①從12-14月齡開始篩選培育后備親魚，卵母細胞徑1mm左右，此時加強培育可以減少卵母細胞退化數(shù)量，增加完熟卵數(shù)。

②供篩選的群體尾數(shù)應為篩選尾數(shù)的3倍以上，這樣可以保證優(yōu)中選優(yōu)，擴大遺傳差異，避免種質(zhì)退化。

③篩選規(guī)格應是中等至上中等的個體，因為大型個體中雄魚多，小型個體懷卵少。

④選出的個體要體色鮮明，體表粘液多，無外傷。

⑤篩選數(shù)量要根據(jù)計劃采卵數(shù)量和平均每尾親魚懷卵數(shù)量決定。每尾親魚懷卵數(shù)量根據(jù)表5，可認定為650粒，擠腹法采卵，平均每尾可采640粒，剖腹法采卵可采出690粒。

⑥根據(jù)池水交換率確定放養(yǎng)密度和放養(yǎng)重量，單位面積放養(yǎng)密度，放養(yǎng)重量應在商品魚的三分之一以下。

⑦飼料中脫脂魚粉含量應達到45%以上，粗蛋白50%以上，油脂10%以上。充足的營養(yǎng)可以保證成熟卵生成數(shù)量和質(zhì)量，由于親魚培育水溫及飼料等培育方法不同，育成的親魚規(guī)格也不同，尾均采卵數(shù)量也不相同。從早春開始用親魚專用飼料進行親魚專門培育，是提高采卵數(shù)量的重要方法。據(jù)報道，飼料質(zhì)量可以影響成熟卵的生成數(shù)量。另外，親魚規(guī)格越大懷卵量越多。如果簡單的投喂商品魚飼料，其雌雄成熟率就會降低，導致產(chǎn)卵率及受精率過低，從而影響苗種的正常生產(chǎn)。

⑧.親魚培育池應放在水流上游，排出水溶氧應達6mg/L以上，原因是山女鱒耐污水的能力較其他鮭魚低。

⑨.采卵前3個月的水溫不超過13℃。

1.1.3 人工采卵受精技術

①采卵期的確認：

每年9月份22月齡（包括極少數(shù)的13月齡山女鱒雄魚）魚開始出現(xiàn)體色變暗，日食量減少的現(xiàn)象，這是親魚進入性成熟期的預兆。從此逐漸出現(xiàn)體色變黑、幼鮭斑形狀變得不規(guī)則、雄魚上下額變成彎曲狀等副性征，部分魚出現(xiàn)癤瘡病、水霉病癥狀。9月下旬開始對培育的親魚進行成熟度檢驗，用擠腹法采卵，能采出卵，就認定為采卵期已經(jīng)開始，用同樣方法，查明采卵期結(jié)束的時間。通過一年的檢測查明了采卵期。

黑龍江水產(chǎn)研究所渤海冷水魚實驗站水溫低為低溫區(qū)：10月上旬-12月下旬，此間22月齡以上的雌魚約70%可采出完熟卵，約30%的雌魚要待下一年的10月份發(fā)育成熟，22月齡雄魚全部可以采出精液，極少數(shù)雄魚12-13月齡即可以采出精液。采卵高峰是10月中旬至11月中旬。

②雌、雄鑒別方法及分池待產(chǎn)：

9月中旬，因副性征的出現(xiàn)，即可進行雌雄鑒別、分池飼育，這樣可便于采卵、采精操作（表1）

表1 山女鱒雌、雄魚鑒別

③親魚熟度鑒別及鑒別間隔期：

完熟雄魚，輕壓腹部即有精液流出，滴入水中即迅速散開。完熟雌魚，手摸腹部可感到卵粒已經(jīng)分離，輕壓腹部即有卵粒流出。每7d進行一次熟度鑒別。

④采卵、采精方法及比例：

采卵時，一人端臉盆，一人擠卵。擠卵者一手套上紗布或線手套握住雌魚尾柄，使泄殖孔面向臉盆，此時將親魚泄殖孔及附近的水分用毛巾擦干，一手輕壓泄殖孔前方的腹部，只要輕輕施加壓力，成熟卵隨之順勢流出。擠卵過程避免進水，動作要輕快，盡量不要使親魚受傷。

采精方法和采卵一樣也是用擠腹法人工采精，注意精液一定要避免沾水，因此采精前同樣要用干凈的毛巾將雄魚身上的水擦凈，同時避免將尿、糞等污物擠到精液里。

受精量為每1萬粒卵（約900g）加精液5ml,相當于15尾雌魚的采出卵加3～4尾雄魚的精液。雌雄比例為 5∶1 左右。

在采卵時、采精時應根據(jù)己查明的懷卵量及懷精量取親魚的尾數(shù)，這樣可以有效的避免授精不良、精液過多等問題，達到最好的授精效果，也可減少不必要的損失。

池養(yǎng)條件下的山女鱒2年性成熟，繁殖后大部分個體死亡，只有少部分個體可以成熟繁殖二次。為提高采卵率，日本對山女鱒采用剖腹法采卵。

⑤授精方式

干法授精 用一臉盆（擦干）接卵，再取精液覆蓋卵上，然后用干凈羽毛攪拌1分鐘使精卵充分接觸。慢慢加入一點清水，繼續(xù)攪拌1min，靜止1～2min使卵授精，然后用清水漂洗2～3次（主要是將剩余的精液和污物洗出），待授精卵靜水膨脹后裝入孵化桶。

濕法授精 把采到的卵、精同時倒入盛水的盆中，使卵授精。

在黑龍江水產(chǎn)研究所渤海冷水性魚類試驗站主要以干法授精為山女鱒主要授精方式。

⑥人工授精技術研發(fā)（參考資料）：

在虹鱒魚人工授精技術基礎上研發(fā)出新方法、新技術。

單鹽等滲液洗卵法人工授精技術：將傳統(tǒng)的三鹽等滲液，改成NaCl單鹽等滲液。實驗表明用0.9-1.0%NaCl水溶液洗滌采出卵，具有與三鹽等滲液相同效果，可以保證95%以上的受精率。該技術具有新穎性，簡化了等滲液配制程序，便于生產(chǎn)應用。

受精卵微流水洗滌膨脹孵化連續(xù)作業(yè)技術：該技術簡化了授精后清水洗卵、靜水膨脹操作工藝。授精后不經(jīng)洗滌將卵立即放入孵化桶內(nèi)，利用桶內(nèi)的上升水流洗除多余的精液，并使卵在桶內(nèi)微流水環(huán)境中完成吸水膨脹過程。試驗及生產(chǎn)應用證明，該技術具有減少授精后卵的震動次數(shù)、簡化操作工藝的優(yōu)越性。授精后1小時之內(nèi)孵化桶內(nèi)的上升水流量控制在3L/min以下，可以避免卵的震動，保證較高的發(fā)眼率。

單鹽等滲液洗卵及授精卵微流水洗滌膨脹、孵化連續(xù)作業(yè)技術是鮭亞科魚類人工授精技術的重要改進，具有創(chuàng)新意義。

開發(fā)出等滲液浸潤卵受精技術，該技術的操作方法是用等滲液洗卵后，使卵浸潤在少許等滲液中，等滲液量相當于卵量的一半即可，然后將精液加入，用手攪拌半分鐘后加入清水，再用手攪拌1分鐘后立即將授精卵移入微流水孵化桶內(nèi)。該法可使受精率達95%以上。受精量為每1萬粒卵（約900g）加精液5ml,相當于15尾雌魚的采出卵加3-4尾雄魚的精液。

綜上所述，本研究推出的人工授精技術在傳統(tǒng)的授精技術基礎上，進行了合理的技術改進，推出簡便高效的人工授精技術，其操作工藝程序如下：

將15尾雌魚卵采入接卵網(wǎng)盒；

用0.9-1.0%NaCl水溶液500ml淋洗采出卵1-2遍；

將洗滌后的采出卵移入授精盆；

向盆內(nèi)加入約相當卵量1/2的0.9-1%NaCl水溶液；

向盆內(nèi)加入3-4尾雄魚精液，用手攪拌0.5min；

向盆內(nèi)加入清水，水量約為卵量的2倍以上，用手攪拌約1min；

將盆內(nèi)的卵和NaCl水溶液同時移入桶式孵化器的孵化網(wǎng)盒上，一小時之內(nèi)的注水量為不超過3L/min。

在低溫試驗基地（即：黑龍江水產(chǎn)研究所渤海冷水性魚類試驗站）利用鮭鱒魚養(yǎng)殖常規(guī)設備如桶式孵化器，平列式出膜孵化槽，流水式稚魚飼育槽等設備，結(jié)合生產(chǎn)進行了人工繁殖技術研究。在探明性腺發(fā)育規(guī)律、改進6項人繁技術的同時探討了人工繁殖技術參數(shù)，人繁技術已達成熟，確立了山女鱒人繁新技術。

1.1.4 人工孵化及上浮稚魚飼育技術

黑龍江水產(chǎn)研究所渤海冷水性魚類試驗站根據(jù)山女鱒發(fā)眼卵及孵化稚魚規(guī)格均與虹鱒相似的原理，利用鮭鱒魚養(yǎng)殖常規(guī)設備如桶式孵化器、平列式出膜孵化槽、流水式稚魚飼育槽等設備，人工孵化采用了鮭亞科魚類常規(guī)孵化及上浮稚魚飼育技術。結(jié)合生產(chǎn)進行了人工繁殖技術研究。

孵化類型：孵化桶。

孵化用水必須是澄清無污染的水，溶解氧一般是飽和或接近飽和的，適時調(diào)節(jié)供水量是實施科學孵化飼育管理的主要技術措施。判斷供水量是否適當?shù)牧硪粋€簡便方法是檢測排水溶解氧量，達6.5mg/L以上，既為供水量適當。

應用于實際，每個孵化桶中可放受精卵6萬～8萬粒。

受精卵的發(fā)育階段不同，所需要的溫度也不同，溫度的累積標志著受精卵的發(fā)育階段。不同的季節(jié)，每天不同的溫度，受精卵發(fā)育所需要的時間也就不同。如表2所示：

表2 山女鱒受精卵發(fā)育階段積溫

圖1 發(fā)眼卵

圖2 山女鱒孵化稚魚

表3 ：渤海站山女鱒受精卵至發(fā)眼卵發(fā)育積溫圖

溫度，單位∶℃,最大值∶13.40,最小值∶8.66,平均值∶10.88

除影響受精率的因素外，受精卵接觸水后因操作引起的卵的震動，也會是造成死卵從而導致發(fā)眼率低的重要原因。據(jù)報導，受精后卵在水中經(jīng)30～60min完成吸水過程，吸水過程中的卵，抗振力很弱，甚至會因為振動使卵黃膜破損而死亡。

1.1.5 上浮稚魚飼育前的準備工作：

受精卵進入發(fā)眼期之后，便可從孵化桶中取出：

第一：取出的發(fā)眼卵，應先進行簡單輕微的沖洗2～3次，將發(fā)眼卵上粘黏的污物沖洗干凈，放入平列槽內(nèi)。

第二：用卵盤盛卵，在水中將死卵（在水中經(jīng)輕微震蕩后變白或有白點的卵粒和卵粒無眼點透明的，都是死卵。）挑出。也可以將盛有發(fā)眼卵的卵盤取出在避光處挑卵，但是要勤將卵盤放入水中，保持卵的濕潤度，這樣可以避免發(fā)眼卵的缺氧。最好是在水中操作。

第三：將已處理好的發(fā)眼卵放在平列槽里，調(diào)好水流、水位，蓋上蓋板，避免光的直接照射，等待發(fā)眼卵孵化稚魚即可。

注意事項：整個過程要保證發(fā)眼卵的濕潤度，避免缺氧現(xiàn)象，避免光的直接照射，孵化稚魚階段要注意水流、水位的調(diào)整，觀察溫度變化，保證發(fā)眼卵的出苗率。

1.1.6 上浮稚魚飼育技術：

以下敘述了稚魚開始攝食的時間，開口稚魚飼育方法及放養(yǎng)密度等問題，確立了上浮稚魚飼育技術。其主要內(nèi)容是：

① 孵化后積溫達200℃.d前后，卵黃囊吸收約1/2時將稚魚按2萬尾/m2的密度分放到開食飼育槽（平列槽），供水量每萬尾3.0L/min。

②孵化后積溫達300℃.d前后，稚魚卵黃囊吸收約3/5，開始在水中上層游動時,開始投餌馴飼。

③采用虹鱒用開口飼料，每天投喂6～8次。水溫10℃以下日投飼量為稚魚體重的5%。開口稚魚尾重約0.12g,在10℃水溫下馴飼一個月可達0.4g，稚魚形成了主動攝食能力，此后即可開始當年魚（苗種）飼育。

以上敘述主要推出不同水溫條件下，受精至稚魚開食后一個月期間的各發(fā)育階段的孵化、飼育管理技術參數(shù)，包括放養(yǎng)密度、供水量、投喂量等，為人工孵化和開口稚魚的馴飼提供了技術管理依據(jù)。

1.1.7 孵化稚魚過程中的清污問題：

在整個的孵化飼育過程中，除了保證稚魚的供氧量、供水量、放養(yǎng)密度、投喂量以及溫度外，水質(zhì)的問題也相當重要的，不容忽視的。水質(zhì)的好壞也是決定稚魚成活的重要因素之一。所以應及時清除水中污物（如：剩余餌料、已死的稚魚等）保證水質(zhì)清澈。

可用羽毛貼槽壁輕輕掃動，這時魚苗和污物都會掃起，用小網(wǎng)把污物和死魚撈出，這樣可以保證水槽的透水性，把水槽中的水放走一半，可以放走部分污水，再待入水處注入新水便可。

2 結(jié)果

在山女鱒被重視的情況下,許多研究人員在繁殖技術上不斷創(chuàng)新,研究出許多有效便捷的繁殖技術,但是渤海實驗站為保留親魚采用的是擠腹采卵，采精法。

在整個繁殖過程中,每一個環(huán)節(jié)的謹慎都關系著山女鱒繁殖是否成功,重要的繁殖技術更是重中之重。

3 討論

在本文敘述過程中，分別在采卵、授精的方法上提出了實施剖腹法采卵和單鹽等滲液洗卵法，這是兩個針對采卵、授精方面有效快速的方法。

山女鱒第1次性成熟后，絕大多數(shù)都要死亡，沒有必要用擠腹法采卵，改用剖腹法采卵可以大幅度提高采卵效率，也可以將殘卵率降至零。

單等滲液洗卵可以提高受精率，簡化過程。

受精卵微流水洗滌膨脹孵化連續(xù)作業(yè)技術：該技術簡化了授精后清水洗卵、靜水膨脹操作過程，這樣可以避免卵的震動，保證較高的發(fā)眼率。

單鹽等滲液洗卵及授精卵微流水洗滌膨脹、孵化連續(xù)作業(yè)技術是鮭亞科魚類人工授精技術的重要改進，具有創(chuàng)新意義。

結(jié)論

通過本次學習記錄結(jié)果說明，山女鱒的親魚選擇、授精方式、孵化條件等都是山女鱒人工繁殖的重要基礎,首先要注重親魚的培育和選擇，為人工繁殖山女鱒做好準備；其次授精方式恰當運用，直接影響著受精率的提高；再次，孵化條件的優(yōu)良，決定著山女鱒人工繁殖階段的成功與否。

山女鱒的繁殖，改變了我國原有的養(yǎng)鱒業(yè)品種單一現(xiàn)象，為國家的養(yǎng)鱒業(yè)的拓展，提供了基礎。在今后的山女鱒繁殖技術中，應多多引用新的科學技術，采用有效新穎的繁殖手法，來提高山女鱒的繁殖率，這樣可以大大的滿足其社會需求，給山女鱒科研事業(yè)做出貢獻。