MTA1和FLIP在食管鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)及意義

西安市中心醫(yī)院心胸外科（西安710003） 劉晨旭 周 斌

食管癌是消化道最常見(jiàn)腫瘤，在我國(guó)發(fā)病率較高，嚴(yán)重威脅著人民的健康［1］。近年來(lái)，許多與腫瘤浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移有密切關(guān)系的基因已相繼被克隆出，其中腫瘤轉(zhuǎn)移基因（MTA1）是進(jìn)幾年來(lái)發(fā)現(xiàn)的和信號(hào)傳導(dǎo)及基因調(diào)節(jié)有關(guān)的腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)基因。大量研究表明［2－3］，MTA1和許多種惡性腫瘤的浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移有著密切的關(guān)系。FLIP（FLICE－inhibitory protein）是近年來(lái)發(fā)現(xiàn)的一類含有死亡效應(yīng)結(jié)構(gòu)域的凋亡、抑制蛋白，它廣泛存在于病毒、真核生物和哺乳動(dòng)物等許多物種中。目前可證實(shí)FLIP與炎癥、腫瘤及自身免疫性疾病的發(fā)生、發(fā)展有密切的關(guān)系。本實(shí)驗(yàn)對(duì)人類食管癌組織中MTA1、FLIP的表達(dá)情況及兩者間的關(guān)系進(jìn)行分析，以探討MTA1和FLIP蛋白的表達(dá)與食管鱗癌的侵潤(rùn)、轉(zhuǎn)移和分化程度之間的關(guān)系，以及它們兩者之間的相關(guān)性。

材料與方法

1 材 料 選取81例食管癌患者的癌組織作為研究對(duì)象，31例距癌組織邊緣＞5cm的正常食管組織作為對(duì)照組。標(biāo)本均為西安交通大學(xué)第二醫(yī)院胸外科手術(shù)切除的組織，入選的患者術(shù)前均未行放療、化療和其他激素免疫治療，術(shù)后病理診斷均為鱗癌。其中男65例，女16例，年齡42～72歲。病理類型、分期及淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移情況，經(jīng)病理科醫(yī)師確定。

2 方 法 使用SP法進(jìn)行抗MTA1和抗FLIP免疫組織化學(xué)染色。陰性對(duì)照則使用PBS代替一抗。結(jié)果判定：陽(yáng)性表達(dá)的細(xì)胞核內(nèi)見(jiàn)棕黃色的顆粒。光學(xué)顯微鏡下每張切片在診斷確切的食管癌組織中隨機(jī)選取5個(gè)高倍視野，每高倍視野計(jì)數(shù)100個(gè)細(xì)胞。切片內(nèi)的陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)＞10%做為MTA1或FLIP陽(yáng)性表達(dá)。

3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 所有數(shù)據(jù)經(jīng)SPSS 11．0軟件進(jìn)行處理，使用χ2檢驗(yàn)，變量之間的關(guān)系分析則采用spearman等級(jí)相關(guān)分析，P＜0．05差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

MTA1蛋白、FLIP蛋白在食管癌組織中陽(yáng)性率均高于正常組織中陽(yáng)性表達(dá)率（P＜0．05）。MTA1、FLIP蛋白在食管癌組織陽(yáng)性表達(dá)與患者年齡、性別、腫瘤的長(zhǎng)度均無(wú)關(guān)。MTA1表達(dá)與腫瘤的組織分化程度、T分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有明顯相關(guān)性。FLIP的表達(dá)與腫瘤的組織分化程度無(wú)關(guān)，與腫瘤的T分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有明顯相關(guān)性。MTA1和FLIP陽(yáng)性表達(dá)存在明顯正相關(guān)。見(jiàn)表1～5。

表1 兩組MTA1、PLIP表達(dá)比較

表2 MTA1、FLIP在食管癌患者中表達(dá)與腫瘤長(zhǎng)度關(guān)系比較

表3 MTA1、FLIP在食管癌患者中表達(dá)與年齡、性別的關(guān)系比較

表4 MTA1、FLIP在食管癌患者中的表達(dá)與臨床病理因素的關(guān)系

表5 MTA1、FLIP在食管癌中的表達(dá)相關(guān)性

討 論

1 MTA1在食管癌組織中的表達(dá)及意義 本組資料食管鱗癌組織中MTA1的陽(yáng)性表達(dá)率為72．84%，正常的組織為6．45%。這兩者比較有顯著差異性（P＜0．05），提示MTA1在食管癌的發(fā)生中起到重要的作用，可以作為診斷食管癌的一種重要的生物學(xué)指標(biāo)。本研究發(fā)現(xiàn)，MTA1蛋白的陽(yáng)性表達(dá)和患者的年齡、性別及腫瘤長(zhǎng)度均無(wú)關(guān)系（P＞0．05）；MTA1蛋白在中、高分化組中的陽(yáng)性表達(dá)率為60．00%，低分化組為88．89%，二者比較有顯著差異性（P＜0．05），這說(shuō)明MTA1蛋白的陽(yáng)性表達(dá)和腫瘤的組織學(xué)的分級(jí)有關(guān)系，并隨著其分級(jí)的降低陽(yáng)性表達(dá)水平明顯的升高；MTA1蛋白的陽(yáng)性表達(dá)和腫瘤的T分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有顯著的相關(guān)性（P＜0．05），說(shuō)明MTA1蛋白在腫瘤的浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移中起著顯著的作用。推測(cè)其機(jī)制可能是因?yàn)樵贛TA1陽(yáng)性表達(dá)的癌細(xì)胞中，MTA1蛋白可以和組蛋白去乙?；附Y(jié)合，募集組蛋白去乙酰化酶到目的基因啟動(dòng)子的區(qū)域，通過(guò)除去組蛋白的乙酰基重塑染色質(zhì)結(jié)構(gòu)，使目的基因變得更加得緊密而不利于繼續(xù)轉(zhuǎn)錄［4］。進(jìn)而MTA1可通過(guò)這種功能直接或間接的作用于某些可以抑制腫瘤浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移基因，下調(diào)其轉(zhuǎn)錄過(guò)程，使腫瘤抑制基因的數(shù)量下降，從而促使腫瘤的發(fā)生、發(fā)展。綜上所述，MTA1基因在食管鱗癌的、增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移及臨床進(jìn)展中可能起著重要的調(diào)節(jié)作用。

2 FLIP在食管癌組織中的表達(dá)及意義 本研究結(jié)果表明，F(xiàn)LIP在食管癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)率為76．54%，在正常肺組織為19．35%，兩者比較差異有顯著性（P＜0．05），說(shuō)明FLIP在食管癌組織中表達(dá)明顯上調(diào)。FLIP的表達(dá)與患者年齡、性別及腫瘤長(zhǎng)度無(wú)相關(guān)性（P＞0．05）。FLIP與腫瘤的分化程度盡管無(wú)明顯相關(guān)性（P＞0．05）。FLIP的表達(dá)與食管癌的T分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均有顯著相關(guān)性（P＜0．05），并隨著腫瘤臨床分期的增加、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，其表達(dá)水平逐漸升高。這可能與以下機(jī)制有關(guān)：①FLIP的抑制凋亡作用。FLIP含量增加，食管癌細(xì)胞凋亡減少，食管癌細(xì)胞過(guò)度生長(zhǎng)并易產(chǎn)生侵犯，同時(shí)過(guò)度生長(zhǎng)的瘤體上癌細(xì)胞脫落，造成轉(zhuǎn)移。②FLIP增多，癌細(xì)胞得以對(duì)抗T細(xì)胞的殺傷作用［5］。以上研究結(jié)果提示，F(xiàn)LIP蛋白的表達(dá)與食管癌的惡性轉(zhuǎn)化密切相關(guān)，其在腫瘤中的高表達(dá)能夠抑制正常的細(xì)胞凋亡過(guò)程，從而細(xì)胞異常增生和惡性轉(zhuǎn)化，使癌細(xì)胞獲得永生性。FLIP在腫瘤細(xì)胞中表達(dá)越強(qiáng)，癌細(xì)胞的生存能力和腫瘤的惡性程度也隨之增高，癌細(xì)胞更容易侵襲周圍組織而發(fā)生轉(zhuǎn)移，從而增加治療難度。表明FLIP蛋白的高表達(dá)是預(yù)示預(yù)后不良的標(biāo)志。FLIP可成為腫瘤基因診斷性標(biāo)志物和腫瘤治療的新靶點(diǎn)［6－7］。

3 MTA1、FLIP在食管癌中陽(yáng)性表達(dá)的相關(guān)性 惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、侵襲轉(zhuǎn)移，是一種高度選擇的非隨機(jī)過(guò)程，是多個(gè)基因共同參與的結(jié)果，與多種分子水平密切相關(guān)。FLIP基因的增多能夠使正常的細(xì)胞凋亡過(guò)程受到抑制。MTA1基因?yàn)槟[瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)基因，通過(guò)此種功能直接或間接作用于某些抑制腫瘤浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移基因，下調(diào)其轉(zhuǎn)錄，使腫瘤抑制基因的數(shù)量減少，從而促使腫瘤的發(fā)生、發(fā)展，而與細(xì)胞凋亡過(guò)程無(wú)關(guān)。但是與細(xì)胞凋亡抑制基因FLIP存在明顯的正相關(guān)。這可能是由于MTAI下調(diào)腫瘤抑制基因的數(shù)量，而其數(shù)量的減少也間接的影響細(xì)胞凋亡的過(guò)程，但其具體作用機(jī)制有待于進(jìn)一步研究。聯(lián)合檢測(cè)MTA1、FLIP、表達(dá)對(duì)于臨床高危復(fù)發(fā)病例，給予積極治療，對(duì)提高預(yù)后具有重要意義，并可作為建立食管癌預(yù)后模型的重要指標(biāo)。

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