產(chǎn)ESBLs酶大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌耐藥性分析

黃育敏

（海南省婦幼保健院檢驗(yàn)中心，海南?？?70206）

產(chǎn)ESBLs酶大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌耐藥性分析

黃育敏

（海南省婦幼保健院檢驗(yàn)中心，海南?？?70206）

目的了解下呼吸道感染產(chǎn)ESBLs酶大腸埃希菌及肺炎克雷伯菌的耐藥特性，為臨床抗菌藥物合理使用提供依據(jù)。方法采用VITEK-32對(duì)大腸埃希菌及肺炎克雷伯菌進(jìn)行菌株鑒定，采用K-B法進(jìn)行藥敏試驗(yàn)及采用確證試驗(yàn)進(jìn)行ESBLs測(cè)定。結(jié)果我院下呼吸道產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌陽(yáng)性率為27.1%，產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌陽(yáng)性率為40.5%；這兩種菌對(duì)亞胺培南和美羅培南顯示100%敏感，對(duì)頭孢西丁、哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星也有較高的敏感性。對(duì)其余的抗菌藥物耐藥率均較高，相同藥物中產(chǎn)ESBLs菌的耐藥率均比非產(chǎn)ESBLs的高。結(jié)論根據(jù)我院的藥敏結(jié)果分析，建議對(duì)大腸埃希菌及肺炎克雷伯菌臨床經(jīng)驗(yàn)用藥可選用碳青霉烯類抗生素。

大腸埃希菌；肺炎克雷伯菌；耐藥性；ESBLs

產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶（Extended-spectrum β-lacta-mases，ESBLs）的大腸埃希菌及肺炎克雷伯菌是下呼吸道感染的主要病原菌，同時(shí)也是醫(yī)院感染中最常見(jiàn)的條件致病菌。隨著頭孢菌素類抗生素廣泛應(yīng)用，導(dǎo)致產(chǎn)ESBLs發(fā)生率逐年升高，給臨床治療帶來(lái)極大的困難。為此對(duì)海南省婦幼保健院2012年1月至6月兒科下呼吸道感染患兒痰標(biāo)本分離出的非重復(fù)肺炎克雷伯菌111株及大腸埃希菌59株耐藥性進(jìn)行回顧性分析，以期為臨床更有針對(duì)性地選擇抗菌藥物提供參考和幫助。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 菌株來(lái)源2012年1月至6月，我院兒科送檢的下呼吸道感染患兒標(biāo)本中分離出的非重復(fù)肺炎克雷伯菌111株及大腸埃希菌59株。

1.1.2 儀器與試劑VITEK-32鑒定儀、GNI+鑒定卡購(gòu)自法國(guó)生物梅里埃公司。血瓊脂平板培養(yǎng)基、M-H藥敏平板購(gòu)自安圖公司。

1.1.3 藥敏紙片氨芐西林、氨芐西林/舒巴坦、哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、頭孢唑啉、頭孢噻肟(30μg)、頭孢噻肟/克拉維酸(30μg/10μg)、頭孢他啶(30μg)、頭孢他啶/克拉維酸(30μg/10μg)、頭孢呋辛、頭孢哌酮/舒巴坦、頭孢吡肟、頭孢西丁、亞胺培南、美洛培南、慶大霉素、阿米卡星、環(huán)丙沙星、復(fù)方新諾明、左氧氟沙星等抗生素紙片購(gòu)自英國(guó)Oxoid公司。

1.2 方法

1.2.1 菌株鑒定將檢驗(yàn)合格的痰標(biāo)本接種于血平板及中國(guó)蘭平板，35℃培養(yǎng)18～24 h?？梢删溥M(jìn)行分純，純化后的菌落用GNI+鑒定卡在VITEK-32鑒定儀上進(jìn)行菌株鑒定。

1.2.2藥敏試驗(yàn)采用K-B紙片擴(kuò)散法，按照CLSI 2008 M100-S18相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)判斷。

1.2.3 ESBLs檢測(cè)參照CLSI推薦的確證試驗(yàn)進(jìn)行：頭孢噻肟與頭孢噻肟/克拉維酸組合；頭孢他啶與頭孢他啶/克拉維酸組合，任一組藥物的抑菌圈的直徑差≥5 mm時(shí)，判定為ESBLs陽(yáng)性株。大腸埃希桿菌ATCC25922、肺炎克雷伯菌ATCC700603為陽(yáng)性質(zhì)控。

2 結(jié)果

2.1 陽(yáng)性率在大腸埃希菌中產(chǎn)ESBLs陽(yáng)性率為27.1%(16/59)，肺炎克雷伯菌中產(chǎn)ESBLs陽(yáng)性率為28.8%(32/111)，總陽(yáng)性率為28.2%(48/170)。

2.2 耐藥情況大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對(duì)碳青霉烯類藥物亞胺培南、美羅培南的敏感性均為100%，其次對(duì)阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦、頭孢西丁的敏感率也較高，除頭胞西丁外，對(duì)其他頭孢類藥物耐藥率均較高。對(duì)同種藥物，產(chǎn)SEBLs菌對(duì)抗生素的耐藥性均高于非產(chǎn)SEBLs菌，見(jiàn)表1。

表1 大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對(duì)常用抗菌藥物的耐藥率（%）

3 討論

超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs)于1983年在德國(guó)發(fā)現(xiàn)后，醫(yī)學(xué)領(lǐng)域?qū)＜覍?duì)于該酶耐藥性方面的研究持續(xù)增溫。近年來(lái)由于臨床對(duì)抗菌藥物的不合理使用，尤其是第三代頭孢的大量使用，導(dǎo)致產(chǎn)ESBLs菌的耐藥性逐年增加。

ESBLs是由質(zhì)粒介導(dǎo)的一類水解酶[1]，可通過(guò)質(zhì)粒在細(xì)菌中傳播，是腸桿菌科細(xì)菌對(duì)β-內(nèi)酰胺類藥物產(chǎn)生耐藥的主要原因之一，具有水解含氧亞氨基β-內(nèi)酰胺類抗生素的能力，它能分解一、二、三代頭孢菌素和青霉素類抗生素，甚至可以分解第四代頭孢類抗菌藥物。

本研究對(duì)2012年1月至6月我院兒科送檢的下呼吸道感染患兒痰標(biāo)本中分離出的大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌進(jìn)行耐藥性分析，產(chǎn)ESBLs菌株總陽(yáng)性率為28.2%(48/170)，低于劉成偉等[2]報(bào)道的35.8%，與孟祥紅等[3]報(bào)道的28.14%接近，高于郭緒平等[4]報(bào)道的18.0%。產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌陽(yáng)性率為27.1% (16/59)，低于朱德妹等[5]報(bào)道的56.2%、蔣冬香等[6]報(bào)道的50.1%。產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌陽(yáng)性率為28.8% (32/111)，低于朱德妹等[5]報(bào)道的43.6%、蔣冬香等[6]報(bào)道的37.2%。差異可能與各地收集的標(biāo)本類型不同，也可能與各地習(xí)慣性用藥不同有關(guān)。

由表1可見(jiàn)，產(chǎn)ESBLs菌株對(duì)頭孢菌素、單環(huán)β-內(nèi)酰胺類抗生素均呈高度耐藥，但對(duì)碳青霉烯類藥物均敏感，對(duì)阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦、頭孢西丁亦有較高的敏感性。在同種藥物中產(chǎn)SEBLs菌株對(duì)抗菌藥物的耐藥性均高于非產(chǎn)SEBLs菌株，其中產(chǎn)ESBLs菌對(duì)氨芐西林的耐藥率高達(dá)100%，除對(duì)頭孢西丁的耐藥率較低外(12.5%～18.7%)，對(duì)二、三代頭孢菌素的耐藥率達(dá)71.8%～100%，但對(duì)含酶抑制劑的抗生素（如：哌拉西林/他唑巴坦）其耐藥率也僅為12.5%～21.9%。本研究還顯示產(chǎn)ESBLs菌株對(duì)左氧氟沙星、環(huán)丙沙星、復(fù)方新諾明、慶大霉素亦存在較高的耐藥率，這可能與產(chǎn)ESBLs菌不僅攜帶ESBLs質(zhì)粒，同時(shí)還攜帶有對(duì)氨基糖甙類和喹諾酮類抗菌藥物的耐藥基因有關(guān)。

鑒于近年大腸埃希菌及肺炎克雷伯菌的耐藥性逐年增加，臨床對(duì)產(chǎn)ESBLs菌感染經(jīng)驗(yàn)性用藥時(shí)應(yīng)避免使用頭孢類抗生素以及氨基糖甙類和喹諾酮類，應(yīng)使用敏感率高的碳青霉烯類抗生素。產(chǎn)ESBLs的大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌是醫(yī)院感染的主要病原菌，除了應(yīng)加強(qiáng)監(jiān)測(cè)與合理使用抗菌藥物外，還應(yīng)加強(qiáng)醫(yī)院內(nèi)的隔離和消毒措施，減少醫(yī)院內(nèi)交叉感染的發(fā)生。

[1]Bish Jacoby GA,Medeinos AA.A functional classification scheme for β-lacatamases and its correlateion with molecular structure[J]. An-timicrobAgents Chemother,1995,39:1211.

[2]劉成偉,李文桂,鄭行萍,等.產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶大腸桿菌和肺炎克雷伯菌的分布及耐藥性分析[J].中國(guó)病原生物雜志,2006, 12:404-406.

[3]孟祥紅,肖漓.產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶大腸桿菌和肺炎克雷伯菌的耐藥性研究[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)診斷學(xué),2006,1:55-57.

[4]郭緒平,李陽(yáng).產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶腸桿菌的分布及耐藥性分析[J].重慶醫(yī)學(xué),2007,27(7):566-567.

[5]朱德妹,汪復(fù),胡付品,等.2010年中國(guó)CHINET細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)[J].中國(guó)化療與感染雜志,2011,9(20):321-329.

[6]蔣冬香,陳剛,王玉春,等.產(chǎn)ESBLs,大腸埃希菌與肺炎克雷伯菌的臨床分布與耐藥性[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,2011,21(2): 371-373.

Drug resistance analysis of Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae producing extended spectru beta-lactamases

HUANG Yu-min.Hainan Provincial Maternity and Infant Health Hospital,Haikou 570206,Hainan, CHINA

ObjectiveTo investigate the drug resistance of Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae producing extended-spectrum β-lactamases(ESBLs),and then provide bases for clinical control and treatment of ESBLs bacteria infection.MethodsThe bacterial identification of E.coli and K.pneumoniae were performed on VITEK-32, antimicrobial susceptibility was tested by disc diffusion test(K-B method),and ESBLs was detected by confirmatory test.ResultsThe positive rate of E.coli producing ESBLs was 27.1%,and the positive rate of K.pneumoniae producing ESBLs was 40.5%,E.coli and K.pneumoniae had 100%susceptible rate to imipenem and meropenem,and they were susceptible to cefoxitin,piperacillin/tazobactam,amikacin,but to other antimicrobials,the resistance rate of them were high.To the same antimicrobial,ESBLs positive strains had higher resistance rate than ESBLs negative ESBLs strains.ConclusionAccord to the result of drug sensitive test,carbapenem antibiotics could be the best choice to control the infection due to E.coli and K.pneumoniae.

Escherichia coli;Klebsiella pneumoniae;Drug resistance;Extended-spectrum β-lactamases(ESBLs)

R378.2

A

1003—6350（2013）06—0858—02

10.3969/j.issn.1003-6350.2013.06.0366

2012-10-09)

黃育敏。E-mail：hnhym20000@126.com