神經(jīng)生長(zhǎng)因子在胃腺癌組織中的表達(dá)及其與神經(jīng)受浸的相關(guān)性研究

胡海霞，李偉，熊正文，李宏偉，黃勇，蘇紅

（中國人民解放軍第251醫(yī)院病理科，河北張家口075000）

神經(jīng)生長(zhǎng)因子在胃腺癌組織中的表達(dá)及其與神經(jīng)受浸的相關(guān)性研究

胡海霞，李偉，熊正文，李宏偉，黃勇，蘇紅

（中國人民解放軍第251醫(yī)院病理科，河北張家口075000）

目的探討神經(jīng)生長(zhǎng)因子在胃腺癌組織中的表達(dá)及神經(jīng)受浸的情況，并分析其與臨床病理因素的關(guān)系。方法采用免疫組織化學(xué)(EnVisionTM)法檢測(cè)神經(jīng)生長(zhǎng)因子（NGF）在胃腺組織及癌旁組織中的表達(dá)。結(jié)果NGF在癌旁組織中的陽性表達(dá)率為6.66%，其在胃腺組織中的陽性表達(dá)率為51.25%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)；NGF的陽性表達(dá)率與患者年齡、腫瘤直徑、組織學(xué)分級(jí)及浸潤深度無關(guān)，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，但與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及神經(jīng)受浸有關(guān)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。結(jié)論NGF在胃腺組織中過表達(dá)，預(yù)示著患者預(yù)后不良及神經(jīng)易受浸。

神經(jīng)生長(zhǎng)因子；胃腺癌；神經(jīng)受浸；免疫組織化學(xué)

胃癌的發(fā)病率在世界上占所有腫瘤的第二位，是我國最常見的惡性腫瘤之一[1]。其發(fā)生、發(fā)展嚴(yán)重地影響著人們的生活水平及身心健康，特別伴有癌性疼痛，更易造成患者負(fù)面情緒的產(chǎn)生。然而，癌性疼痛發(fā)生的機(jī)制是多方面的，其中神經(jīng)受浸比較常見。為了研究與神經(jīng)受浸有關(guān)的因素，本文欲探討神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)在胃腺癌組織中的表達(dá)及其與臨床病理因素的關(guān)系。

1 材料與方法

1.1 一般來源收集2005年4月至2011年12月期間我科存檔患者資料，并經(jīng)臨床病理醫(yī)生診斷為胃腺癌80例，同時(shí)選取了距腺癌0.5 cm處的癌旁組織30例?；颊吣挲g32～87歲，平均57歲，＜57歲者24例，≥57歲者56例；腫瘤直徑＜4 cm者20例，≥4 cm者60例。組織學(xué)分級(jí)[2]：高分化腺癌32例，要求腺樣結(jié)構(gòu)超過腫瘤的95%；中分化腺癌29例，要求腺樣結(jié)構(gòu)50%～95%；低分化腺癌19例，要求腺樣結(jié)構(gòu)5%～50%；未分化癌要求腺樣結(jié)構(gòu)＜5%。淋巴結(jié)有轉(zhuǎn)移者41例，無轉(zhuǎn)移者39例；神經(jīng)有浸潤52例，神經(jīng)無浸潤28例。癌組織浸潤深度：黏膜下層9例，肌層13例，漿膜層58例。

1.2 主要試劑和方法兔抗人即用型多克隆抗體NGF及相關(guān)配套試劑盒均購自福州邁新生物技術(shù)有限公司。采用免疫組織化學(xué)法EnVisionTM染色組織切片，實(shí)驗(yàn)操作按說明書進(jìn)行。以公司提供的陽性染色切片作為陽性對(duì)照，用磷酸鹽緩沖液(PBS)代替一抗為陰性對(duì)照。

1.3 結(jié)果判斷NGF陽性著色以細(xì)胞質(zhì)呈現(xiàn)黃色或棕黃色顆粒為準(zhǔn)。陽性判定標(biāo)準(zhǔn)[3]：按染色強(qiáng)度及陽性細(xì)胞數(shù)量進(jìn)行半定量積分法分級(jí)。著色程度分為：基本不著色、染色與背景相似者為0分；著色淺、略高于背景者為1分；中度著色、明顯高于背景者為2分；高強(qiáng)度染色、著深棕色者為3分。陽性細(xì)胞數(shù)量分為：陽性細(xì)胞數(shù)＜10%為0分；10%～25%為1分；26%～50%為2分；＞50%為3分。每張切片在高倍鏡(10×40)下取5個(gè)視野計(jì)數(shù)200個(gè)細(xì)胞。兩項(xiàng)相乘：0～2分為陰性(-)，≥3分為陽性(+)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法相關(guān)資料數(shù)據(jù)采用統(tǒng)計(jì)分析軟件SPSS17.0處理，計(jì)數(shù)資料運(yùn)用χ2檢驗(yàn)分析，檢驗(yàn)水準(zhǔn)以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 NGF在胃腺及癌旁組織中的表達(dá)NGF在30例癌旁組織中陽性表達(dá)2例，陰性表達(dá)28例，陽性率為6.66%；而在80例胃腺組織中陽性表達(dá)41例，陰性表達(dá)39例，陽性率為51.25%。經(jīng)χ2檢驗(yàn)分析，NGF在兩者中的表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=18.21，P＜0.01)，見表1和圖1、圖2。

表1 NGF在胃腺癌及癌旁組織中的表達(dá)（例）

圖1 NGF在癌旁組織中的表達(dá)（EnVisionTM×100）圖2NGF在胃腺癌組織中的表達(dá)（EnVisionTM×100）

2.2 NGF的表達(dá)與胃腺癌臨床病理因素的關(guān)系NGF在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)組中的陽性表達(dá)率為73.17%，而在無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中的陽性表達(dá)率為28.20%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)；NGF在神經(jīng)受浸組中的陽性表達(dá)率為73.07%，而在無神經(jīng)受浸組中的陽性表達(dá)率為10.17%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)；但NGF的陽性表達(dá)與患者年齡、腫瘤直徑、組織學(xué)分級(jí)、癌組織浸潤深度無關(guān)，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，見表2。

表2 NGF的表達(dá)與胃腺癌臨床病理因素的關(guān)系（例）

3 討論

NGF是對(duì)神經(jīng)組織有營養(yǎng)活性的一大類肽類物質(zhì)的總稱，它由α、β、γ三種亞基構(gòu)成。NGF受體分為高親和力TrkA受體和低親和力p75受體，前者為功能受體，其主要功能是通過信號(hào)通路MEK/MAPK激活抗凋亡蛋白來實(shí)現(xiàn)某些腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)；后者為輔助受體，其可增強(qiáng)NGF與TrkA的結(jié)合力，調(diào)節(jié)TrkA的信號(hào)傳導(dǎo)，并與細(xì)胞程序死亡相關(guān)，可誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞的凋亡[4]。有資料顯示，NGF高表達(dá)具有促進(jìn)膽管癌細(xì)胞增殖的作用，而在乳腺癌中的表達(dá)隨著腫瘤惡性程度的增高而增高，肝癌組織中NGF的表達(dá)明顯高于正常肝組織及肝硬化組織[5-7]。本研究結(jié)果表明，NGF在癌旁組織中陽性表達(dá)率為6.66%，遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于在胃腺癌組織中陽性表達(dá)率為51.25%，推測(cè)NGF有可能參與了胃癌的發(fā)生。實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)一步顯示，NGF的表達(dá)與患者年齡、腫瘤直徑、組織學(xué)分級(jí)、癌組織浸潤深度無關(guān)，而與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、神經(jīng)受浸有關(guān)。同時(shí)，鏡下觀察發(fā)現(xiàn)，在神經(jīng)受浸組織中癌細(xì)胞數(shù)量明顯多于無神經(jīng)受浸組織，且陽性表達(dá)也較高，這說明神經(jīng)組織中表達(dá)的NGF具有吸引腫瘤細(xì)胞運(yùn)動(dòng)的趨向性，而腫瘤細(xì)胞分泌NGF所形成的濃度梯度誘導(dǎo)神經(jīng)組織的定向生長(zhǎng)，導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞對(duì)神經(jīng)的浸潤發(fā)生。也有學(xué)者認(rèn)為，NGF的嗜神經(jīng)能力與NGF與其受體結(jié)合后促進(jìn)腫瘤細(xì)胞肝素酶的轉(zhuǎn)錄有關(guān)[4]。

總之，NGF參與了胃腺癌發(fā)生、發(fā)展的過程，其在胃腺癌組織中的過表達(dá)更有利于癌細(xì)胞浸潤神經(jīng)。因而，檢測(cè)NGF有無過表達(dá)，能在一定程度上了解患者病情的進(jìn)展。但NGF與腫瘤細(xì)胞運(yùn)動(dòng)的趨向性之間是如何實(shí)現(xiàn)的有待研究進(jìn)一步探討。

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Expression of nerve growth factor in gastric adenocarcinoma and its correlation with nerve invasion

HU Hai-xia,LI Wei,XIONG Zheng-wen,LI Hong-wei,HUANG Yong,SU Hong.Department of Pathology,the 251stHospital of Chinese PLA,Zhangjiakou 075000,Hebei,CHINA

ObjectiveTo investigate the expression of nerve growth factor(NGF)in gastric carcinoma and the situation of nerve invasion,and analyze the relationship between nerve growth factor and clinicopathological factors.MethodsNGF was detected in gastric carcinoma and paracancerous tissue by immunohistochemistry(EnVisionTM).ResultsThe positive expression rate of NGF was 6.66%in paracancerous tissue and 51.25%in gastric carcinoma,showing statistically significant difference(P＜0.01).The positive expression rate of NGF was not related to age,tumor size,histological classification,infiltrated depth,with no statistically significant difference among them (P＞0.05).The positive expression rate of NGF was related to lymphatic nodes metastasis and nerve invasion,with statistically significant difference(P＜0.01).ConclusionThe over-expression of NGF in gastric carcinoma indicates unfavorable prognosis and nerve invasion.

Nerve growth factor;Gastric adenocarcinoma;Nerve invasion;Immunohistochemistry

R735.2

A

1003—6350（2013）06—0788—02

10.3969/j.issn.1003-6350.2013.06.0338

2012-11-14)

胡海霞。E-mail：liwei-324@163.com