同型半胱氨酸測(cè)定試劑性能評(píng)價(jià)

林廣民

（漯河市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，河南 漯河 462000）

同型半胱氨酸測(cè)定試劑性能評(píng)價(jià)

林廣民

（漯河市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，河南 漯河 462000）

目的對(duì)利德曼同型半胱氨酸測(cè)定試劑盒進(jìn)行性能評(píng)價(jià)。方法用日立7600-110全自動(dòng)生化分析儀P模塊檢測(cè)血清中同型半胱氨酸含量，對(duì)試劑的準(zhǔn)確度，精密度，線性，靈敏度，特異性，穩(wěn)定性，系統(tǒng)比對(duì)等對(duì)試劑性能驗(yàn)證和系統(tǒng)評(píng)估。結(jié)果試劑準(zhǔn)確度。批內(nèi)精密度，批間精密度，線性范圍，靈敏度，特異性，穩(wěn)定性，系統(tǒng)比對(duì)均達(dá)到要求標(biāo)準(zhǔn)。結(jié)論利德曼同型半胱氨酸試劑符合臨床診斷試劑標(biāo)準(zhǔn)要求，可以用于臨床診斷。

同型半胱氨酸；性能評(píng)價(jià)；試劑

高同型半胱氨酸是心腦血管疾病重要，獨(dú)立的危險(xiǎn)因素，同型半胱氨酸濃度升高與心腦血管疾病的發(fā)生密切相關(guān)，同型半胱氨酸升高還可引起神經(jīng)管畸形及先天性畸形等出生缺陷類疾病[1-10]。具有較高的臨床應(yīng)用價(jià)值。本文參照廠家試劑說(shuō)明書和美國(guó)國(guó)家實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)（NCCLS）EP10-A2文件要求，對(duì)利德曼同型半胱氨酸測(cè)定試劑盒進(jìn)行初步評(píng)價(jià)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 儀器和試劑

日立7600-110全自動(dòng)生化分析儀。北京利德曼生物工程有限公司同型半胱氨酸測(cè)定試劑盒 批號(hào)012263K

1.1.2 校準(zhǔn)液和質(zhì)控血清

北京利德曼生物工程有限公司校準(zhǔn)液 北京利德曼生物工程有限公司質(zhì)控血清。伯樂(lè)質(zhì)控品低值，中，高值。

1.1.3 樣本

體檢無(wú)溶血，黃疸，脂血混和血清20mL。高值同型半胱氨酸樣本一份。

1.2 方法

1.2.1 準(zhǔn)確度評(píng)價(jià)

按實(shí)驗(yàn)室常規(guī)操作程序，進(jìn)行同型半胱氨酸項(xiàng)目定標(biāo)，測(cè)定利德曼高，中，低三個(gè)水平質(zhì)控品，每份質(zhì)控品重復(fù)測(cè)定3次，計(jì)算3次重復(fù)測(cè)定的均值。計(jì)算每份質(zhì)控品均值與靶值的偏差，將每份樣本的偏差與企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)（偏差＜±5%）進(jìn)行比較。

1.2.2 精密度評(píng)價(jià)

批內(nèi)精密度將伯樂(lè)質(zhì)控品高，中，低三個(gè)濃度水平分為20份同批連續(xù)測(cè)定，計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)差（sd）和變異系數(shù)（cv），與企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)cv＜5%進(jìn)行比較批間精密度，連續(xù)20d測(cè)定伯樂(lè)高，低兩個(gè)個(gè)濃度水平質(zhì)控品，每天測(cè)定一次。收集20d測(cè)定的數(shù)據(jù)，計(jì)算sd 和cv，與衛(wèi)生部室間質(zhì)量評(píng)價(jià)活動(dòng)的最大允許誤差cv＜6%比較。

表1 準(zhǔn)確度評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)結(jié)果

表2 精密度評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)結(jié)果

1.2.3 線性范圍評(píng)價(jià)

將高值樣本血清進(jìn)行倍比稀釋，比例分別為1/2，1/4，1/8，1/16，1/32，1/64，每個(gè)樣本測(cè)定兩次，測(cè)定順序?yàn)樵海?/2，1/4，1/8，1/16，1/32，1/64.0，和0，1/64，1/32，1/16，1/8，1/4，1/2，原液。求理論濃度與實(shí)測(cè)均值之間的線性關(guān)系，滿足線性相關(guān)系數(shù)r＞0.975，斜率在0.97～1.03之間。

1.2.4 分析靈敏度

取空白樣本（生理鹽水），重復(fù)測(cè)定20次。計(jì)算均值（χ—±s）和標(biāo)準(zhǔn)差（sd），則分析靈敏度等于 ±2sd，當(dāng)檢測(cè)系統(tǒng)給出小于分析靈敏度的值，即可報(bào)告為無(wú)分析物檢出。

1.2.5 特異性評(píng)價(jià)，在混合血清中分別添加膽紅素，血紅蛋白，三酰甘油，紅細(xì)胞，等干擾物質(zhì)，分析添加干擾物質(zhì)樣本和對(duì)照樣本的測(cè)值偏差。判定標(biāo)準(zhǔn)：測(cè)定結(jié)果偏差＞10%判定存在干擾

1.2.6 系統(tǒng)比對(duì)將利德曼試劑和和光試劑分別按照試劑說(shuō)明書在日立7600-110全自動(dòng)生化分析儀上設(shè)定參數(shù)，試劑盒定標(biāo)后，同時(shí)檢測(cè)血清樣本40例，樣本濃度包含高值及正常值，濃度要求有梯度分布，測(cè)定在2h內(nèi)完成。結(jié)果數(shù)據(jù)以利德曼試劑測(cè)定值為X，和光試劑測(cè)定值為Y，計(jì)算回歸方程及相關(guān)系數(shù)r，要求相關(guān)系數(shù)r＞0.975.

1.2.7 穩(wěn)定性

開瓶上機(jī)穩(wěn)定性，在第一次校準(zhǔn)后，開瓶置于儀器試劑倉(cāng)內(nèi)，以后不再校準(zhǔn)，每天檢測(cè)質(zhì)控品，記錄失控時(shí)試劑在機(jī)器內(nèi)放置天數(shù)，

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件處理。

2 結(jié) 果

2.1 準(zhǔn)確度評(píng)價(jià)測(cè)定結(jié)果

見表1。表1說(shuō)明質(zhì)控品三個(gè)濃度水平偏差均小于廠家聲明標(biāo)準(zhǔn)5%符合要求。

2.2 精密度評(píng)價(jià)結(jié)果

見表2。表2說(shuō)明 質(zhì)控品三個(gè)濃度水平批內(nèi)測(cè)定變異系數(shù)小于廠家說(shuō)明書要求的5%，批間測(cè)定20日，變異系數(shù)小于衛(wèi)生部室間質(zhì)量評(píng)價(jià)6%，符合要求。

2.3 線性評(píng)價(jià)

測(cè)試數(shù)據(jù)，經(jīng)過(guò)計(jì)算，在濃度0-70μmol/L范圍內(nèi)理論濃度Y與實(shí)測(cè)數(shù)值X之間的線性方程為Y=0.984X-0.2096 相關(guān)系數(shù)r=1.000 符合廠家說(shuō)明書聲明標(biāo)準(zhǔn)。

2.4 靈敏度評(píng)價(jià)

分析靈敏度的計(jì)算值為0.1μmol/L，符合廠家說(shuō)明書要求。

2.5 分析測(cè)定當(dāng)膽紅素＜20mg/dL，血紅蛋白＜500mg/dL，三酰甘油＜500mg/dL，抗壞血酸＜50mg/dL，紅細(xì)胞＜0.4%時(shí)，測(cè)定結(jié)果偏差＜10%，對(duì)檢測(cè)結(jié)果未產(chǎn)生顯著干擾。符合廠家說(shuō)明書性能要求。

2.6 系統(tǒng)比對(duì)

在日立7600-110生化分析儀P模塊上，利德曼試劑和和光試劑測(cè)定數(shù)據(jù)相關(guān)系數(shù)r為0.998，相關(guān)性良好，符合要求。

2.7 穩(wěn)定性

試劑在儀器試劑倉(cāng)內(nèi)貯存可穩(wěn)定不失控天數(shù)＞30d，符合廠家說(shuō)明書聲明。

3 討 論

同型半胱氨酸是心腦血管疾病的獨(dú)立危險(xiǎn)因子。同型半胱氨酸的測(cè)定越來(lái)越受到臨床醫(yī)師的重視，評(píng)價(jià)結(jié)果表明，豪邁公司的同型半胱氨酸試劑盒（雙試劑循環(huán)酶法），各項(xiàng)性能指標(biāo)能達(dá)到臨床診斷試劑性能要求。適合在全自動(dòng)生化分析儀上使用。

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R446；R54

B

1671-8194（2013）18-0103-02