用健康人新鮮抗凝全血校準血細胞分析儀

孫洪波

（白城中心醫(yī)院檢驗科，吉林 白城 137000）

用健康人新鮮抗凝全血校準血細胞分析儀

孫洪波

（白城中心醫(yī)院檢驗科，吉林 白城 137000）

目的 探討用新鮮血校準血細胞分析儀的方法。方法 采集健康人新鮮EDTA-K2抗凝血分裝3管，用MEK8222K給新鮮血定值，用另外的新鮮血校準MEK7222K，計算各參數(shù)的相對偏差，與給定的標準比較。結果 各參數(shù)校準后相對偏差明顯降低，在判斷標準的一列范圍內。結論 用抗凝新鮮血做血細胞分析儀的校準，校準品易得、經濟、效果好，尤其適用于沒有配套校準品的儀器，可以推廣使用。

血細胞分析儀；校準；新鮮血；健康人

血細胞分析儀是各醫(yī)院檢驗科最常用的儀器，且工作量巨大，因此很多檢驗科都擁有多臺血細胞分析儀，其檢測結果的準確性直接影響著疾病的診斷和療效觀察。要保證檢測結果的準確性，就必須對儀器定期校準，而有些血細胞分析儀供應商不能提供配套的校準品，用其他的校準品測定結果也不理想。因此建立一套方便、經濟實用的校準方法勢在必行。本文就如何用健康人新鮮抗凝血進行血細胞分析儀的校準做了如下探討。

1 材料與方法

1.1 材料

儀器：日本光電MEK8222K、MEK7222K血細胞分析儀；試劑：進口配套試劑；EDTA-K2抗凝采血管。

1.2 方法

①新鮮全血采集：選擇WBC（白細胞）、RBC（紅細胞）、Hb（血紅蛋白）、Hct（血細胞比容）、Plt（血小板）和 MCV（平均紅細胞體積）結果均在參考范圍內的健康志愿者1例，用EDTA-K2做抗凝劑，抗凝濃度為2.0mg/mL，采血10mL，混勻后平均分裝于3管。②儀器準備：兩臺儀器均做全面清洗和保養(yǎng)，并確認儀器的背景計數(shù)、精密度及攜帶污染率均在說明書規(guī)定的范圍內。MEK8222-K已間接溯源至國際標準，定期校準，參加衛(wèi)生部和吉林省臨床檢驗中心的室間質評成績優(yōu)秀，每天做兩個濃度水平的室內質控，結果在控，可視為規(guī)范操作的檢測系統(tǒng)作為標準儀器，用它給新鮮血定值。③新鮮血定值：取其中1管新鮮血，輕輕地將新鮮血反復顛倒混勻，并置于兩手掌間慢慢搓動，使血液充分混勻。打開瓶塞時，墊上軟紙，使濺出的血液被吸收。用MEK8222-K連續(xù)檢測11次，第1次檢測結果不用，以防止攜帶污染，計算第2～11次檢測結果的均值，做為新鮮血的定值。④校準MEK7222K：取另外一管用MEK7222-K連續(xù)檢測11次，計算第2～11次檢測結果的均值。⑤計算出均值：均值的小數(shù)點后數(shù)字保留位數(shù)較日常報告結果多一位。⑥相對偏差計算：即各參數(shù)均值與定值的差異計算。計算公式為(均值—定值)/定值×100%，相對偏差全部等于或小于表1中的第一列數(shù)值時，儀器不需進行調整。相對偏差介于表中第一列與第二列數(shù)值之間時，需對儀器進行調整。⑦校準結果的驗證：將第3管未用的新鮮血充分混勻，在儀器上重復檢測11次，舍棄第1次結果，計算第2～11次檢測結果的均值，計算相對偏差，再次與表中的數(shù)值對照。如各參數(shù)的差異全部等于或小于第一列數(shù)值，證明校準合格。

2 結 果

2.1 校準前相對偏差：結果見表1，WBC、Hb相對偏差分別為9.3%、5.3%，介于第一列和第二列之間，需要調整儀器的校準系數(shù)。其他四項參數(shù)的相對偏差均小于第一列數(shù)據，不需調整結果。

表1 判別標準及MEK7222K校準結果（百分數(shù)差異%）

2.2 校準后WBC、Hb相對偏差：結果見表2，WBC、Hb相對偏差分別為1.2%、0.6%，均小于第一列數(shù)據，校準成功，計算出新系數(shù)輸入儀器。計算公式：新系數(shù)=原來系數(shù)×（定值/校準前所測均值）。

表2 校準前后調整的結果比較

3 討 論

我國2002年中華醫(yī)學會檢驗分會第五屆血液與體液專家委員會討論《血液分析儀校準規(guī)范化的建議》對血液分析儀校準的一般要求為：儀器安裝時必須由廠家進行校準并提供校準紀錄，否則不能用于臨床；更換部件進行維修后，可能對檢測結果的準確性有影響時需校準；室內質控結果顯示系統(tǒng)的檢測結果有漂移時（排除儀器故障和試劑的因素后）；對于開展常規(guī)檢測的實驗室，要求每6個月至少進行一次校準[1,2]。

我科的MEK8222-K血細胞分析儀使用配套試劑，定期用配套校準物校準；規(guī)范地開展室內質量控制；歷年參加衛(wèi)生部和吉林省臨床檢驗中心的室間質評成績優(yōu)秀；人員經過培訓?？梢暈橐?guī)范操作的檢測系統(tǒng)，可用它給新鮮血定值。但整個定值及校準的操作要保證在8h內(溫度條件為18～25℃)完成。

如表1所示，用MEK7222K測定第二管新鮮血11次后，RBC、HCT、PLT、MCV的相對偏差均在一列百分數(shù)內，根據要求不需要調整，WBC和Hb的相對偏差分別為9.3%和5.3%介于百分數(shù)差異的一列與二列之間，需要調整儀器的校準系數(shù)，計算出WBC、Hb的校準系數(shù)分別為：0.91、0.95，將WBC原來系數(shù)乘以0.91、將Hb原來系數(shù)乘以0.95后輸入儀器，再用第3管新鮮血驗證校準結果，相對偏差結果如表2所示均在一列百分數(shù)差異內，說明調整成功、校準合格。

隨著科學、經濟的發(fā)展，醫(yī)院檢驗科大都擁有多臺血細胞分析儀，為了給臨床診療提供科學、客觀的依據，如何保證結果的準確性顯得尤為重要。為了保證儀器檢測結果的準確性，就必須按照要求進行儀器的校準工作。血細胞分析儀的校準只能使用配套的校準品，校準品的定值只針對特定的機型，對非配套的儀器校準結果不理想，而有些品牌的儀器又不能提供配套的校準品[3,4]，所以要保證校準按要求進行，就需要建立一套簡便、適用的校準方法，以保證不同品牌、類型的儀器的校準工作按要求進行。用健康人抗凝新鮮全血校準儀器，看似操作步驟較多，但標本易得，是一種方便、有效、可行的校準方法，每個檢驗科只要保證有一臺儀器可直接或間接溯源至國際標準，其他儀器就可以用新鮮血進行儀器校準。

另外，配套校準品的價格昂貴，保質期短，還受進貨周期等因素的影響。有些血細胞分析儀供應商根本不能提供配套的校準品，用其他非配套的校準品測定結果較差，用健康人新鮮抗凝全血做校準顯得尤為重要。健康人的新鮮血隨時都可獲得，沒有經濟成本，雖操作步驟較多，但較容易掌握，值得推廣。

綜上所述，用健康人新鮮抗凝全血校準儀器，校準物易得、操作易掌握、可以節(jié)約大量的經濟開支，尤其適用于不能提供配套校準物或有配套校準物機型卻沒有定值的儀器，可以推廣使用。

[1] 葉應嫵,王毓三,申子瑜.全國臨床檢驗操作規(guī)程[M].3版.南京:東南大學出版社,2006:140-141.

[2] 羅春麗.臨床檢驗基礎[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2010:69-71.

[3] 伏攀,李春碧.用新鮮全血校準血細胞分析儀的方法[J].中國醫(yī)學創(chuàng)新,2010,7(6):130-132.

[4] 黃海燕,李雪宏,張淑貞,等.抗凝新鮮血在血細胞分析儀校準和比對中的應用探討[J].檢驗醫(yī)學與臨床,2011,8(12):1452-1454.

R446；R197.39

B

1671-8194（2013）23-0372-02