HPLC法測定蛇床子素的油/水分配系數(shù)

禚旭晶 苑振亭 趙中華 李志強(qiáng)

（解放軍第230醫(yī)院，遼寧 丹東 118000）

HPLC法測定蛇床子素的油/水分配系數(shù)

禚旭晶 苑振亭 趙中華 李志強(qiáng)

（解放軍第230醫(yī)院，遼寧 丹東 118000）

目的 采用 HPLC 法研究了蛇床子素的油 /水分配系數(shù)。方法 通過測定已知 logP 值的系列化合物和蛇床子素的 logK′值，來推算蛇床子素的 logP 值。結(jié)果 采用 C18，以乙腈 -甲醇 -磷酸氫二鈉（11 ∶ 62 ∶ 27，0.05mol/L 磷酸調(diào) pH 值 3.7）為流動相，檢測波長254nm，流速 1mL/min 測定蛇床子素 logP 值為 3.46。 結(jié)論 采用高效液相色譜法測定蛇床子素 logP 值具有快速、重現(xiàn)性好、樣品不需特殊純化及能測溶解度較小的化合物。

蛇床子素；高效液相色譜法；油/水分配系數(shù)

蛇床子的主要有效成分蛇床子素將其制成凝膠用于亞急性濕疹的治療[1-9]，為探討蛇床子素的透皮吸收情況，現(xiàn)采用HPLC法研究了蛇床子素的油/水分配系數(shù)，介紹如下。

衡量藥物的親脂性最常用的方法是測量藥物的油/水分配系數(shù)，而常見的分析手段有搖瓶、色譜法等。現(xiàn)根據(jù)公式logK′=log（trto）-logto、logP=logK′+logK，采用正辛醇-水體系研究藥物在角質(zhì)層-水中分配[10]。利用高效液相色譜法法研究蛇床子素的油/水分配系數(shù)[11-14]。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

L-7110型高效液相色譜儀，L-7420 UV-VIS檢測器（HITACHI）；AEL-160-21型分析天平（日本SHIMADZU公司）；UV-VIS8500紫外/可見分光光度計（上海天美科學(xué)儀器有限公司）；KQ-100E醫(yī)用超聲波清洗器，產(chǎn)地：昆山市超聲儀器有限公司。

1.2 試藥

蛇床子素對照品（中國藥品生物制品檢定所）；實驗中所用菲、萘、聯(lián)苯、二苯甲烷、二苯胺等其他試劑均為分析純。

2 實驗方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱：Diamonsil C18，150mm×4.6mm，5μm；流動相：乙腈-甲醇-磷酸氫二鈉（11∶62∶27，以0.05mol/L磷酸緩沖液調(diào)pH值為3.7）；檢測波長：254nnm；流速：1mL/min。

2.2 實驗方法

把已知logP值的化合物菲、萘、聯(lián)苯、二苯甲烷、二苯胺和待測樣品蛇床子素等用流動相配成濃度為1mg/mL的溶液，分別精密量取20μL注入液相色譜儀中，測定tr，代入公式計算，蛇床子素圖譜見圖1。

圖1

2.3 實驗?zāi)Ｐ偷慕?/p>

根據(jù)預(yù)試驗結(jié)果表明，蛇床子素在流動相中溶解情況基本符合HPLC的測定要求。選擇已知logP值的上述系列化合物，以上述流動相，分別測定logK′值，根據(jù)公式求出各自的logK值，并與聯(lián)苯的logK作比較得KN值。

如果KN接近于1，那么各化合物在此條件下屬于液-液分配，從而能經(jīng)此求出線性回歸方程。測定結(jié)果見表1。

表1 HPLC測定各種物質(zhì)的參數(shù)

從表1結(jié)果可知，表中各樣品的色譜行為應(yīng)基本屬于液—液分配。根據(jù)測定結(jié)果求出回歸方程為：logP=1.854+2.44logK′（n=5 ，r =0.9700）

2.4 蛇床子素的logP值計算可以通過測定蛇床子素的保留值logK′，再代入該線性回歸方程，求出蛇床子素logP值為3.46。

3 討 論

3.1 采用HPLC法測定蛇床子素的含量有較多報道[15-17]。但多為測定復(fù)方組份中蛇床子素的含量，不適合蛇床子素油水分配系數(shù)測定。經(jīng)過篩選優(yōu)化，選取乙腈-甲醇-磷酸氫二鈉（11∶62∶27，0.05mol/L以磷酸調(diào)pH值為3.7）；作為流動相，取得了較好效果。

3.2 實驗表明，搖瓶法和高效液相色譜法測定的蛇床子素油水分配系數(shù)基本一致。而傳統(tǒng)的搖瓶法測定操作繁雜，采用高效液相色譜法可以克服上述的不足，優(yōu)點：快速，重現(xiàn)性好；能測溶解度較小的化合物。

3.3 蛇床子素的logP值為3.46，具有較高的脂溶性，易于吸收。我們通過調(diào)整凝膠處方的組份，研制成蛇床子素凝膠用于亞急性濕疹的治療，取得較好療效。

[1]國家 藥典 委員會.中 華人民 共和國 藥典 [M].北 京:化 學(xué)工 業(yè) 出版社,2005:219-220.

[2]秦路 平,吳煥,蘇中武,等.蛇床子和興安蛇床果實 揮發(fā)油的成分分析[J].中草藥,1992,23(6):330.

[3]向 仁 德 ,傅 曉 紅 .蛇 床 子 化 學(xué) 成 分 的(Ⅰ)研 究 [J].中 草 藥,1984, 15(9):14-15.

[4]向仁德,王丹,傅曉紅.蛇床子化學(xué)成分的研究(Ⅱ)[J].中草藥,1986, 17(2):6-7.

[5]張新勇,向仁德.蛇床子化學(xué)成分的研究[J].中草藥,1997,28(10): 588-590.

[6]柯昌毅 ,薛 茂 ,夏 雨.蛇 床子素軟膏 治 療嬰兒 濕 疹38例[J].中國 藥業(yè),2003,12(5):67.

[7]王 錦 蘭 .蛇 床 子 搽 劑 治 療 濕 疹 39 例 [J].中 國 民 間 療 法 ,2007, 15(10):21.

[8]郭 漢香,廖鏡云.復(fù)方 蛇床子洗液治療濕60 例臨床觀 察[J].實用中醫(yī)藥雜志,2006,22(6):365-366.

[9]武 在 和 .加 味 蛇 床 子 湯 治 療 陰 囊 濕 疹 240 例 [J].江 西 中 醫(yī)藥,1990,21(6):21.

[10]丁平田.用油/水分配系數(shù)預(yù)測藥物的經(jīng)皮滲透性[J].中國醫(yī)藥工業(yè)雜志,1998,29(4):186-189.

[11]鄭俊民.經(jīng)皮給藥新劑型[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1997:13.

[12]Bronaugh RL,Stewart RF,Congdon ER.Methods for in vitro percutaneous absorption studies:Animal model for human skin[J]Toxico.Appl Pharmacol,1982,62(3):481.

[13]Walter RB.Pharmaceutical Skin Penetration Enhancement[M]. New York:Marcel Dekker,Inc,1993:113.

[14]蔡 巍,杜洪 光,張 恩 宏,等.高 效 液相色譜 法測定 左 炔諾孕酮 的 油水分配系數(shù)[J].分析儀器,2007(1):30-32.

[15]李松,徐以亮.高效液相色譜法測定蛇床子濃縮顆粒中蛇床子素含量[J].時珍國醫(yī)國藥,2000,11(11):992-993.

[16]吳承云,郭力,董曉萍.HPLC測定寄生追風(fēng)液中獨活的有效成分蛇床子素[J].華西藥學(xué)雜志,2000,15(2):129-130.

[17]劉新宇,吳芳.復(fù)方蛇床子洗劑中蛇床子素的RP-HPLC測定[J].中草藥,2001,32(9):790-793.

HPLC Determination of Osthole Oil/Water Partition Coefficient

ZHUO Xu-jing, YUAN Zhen-ting, ZHAO Zhong-hua, LI Zhi-qiang
(PLA 230 Hospital, Dandong 118000, China)

ObjectiveTo study the HPLC method Osthol oil/water distribution coefficient.Methodby measuring the known logP value of a series of compounds and Osthole logK 'values to calculate the logP value of osthol. The results were C18, acetonitrile-methanol-phosphate disodium(11∶62∶27, 0.05 mol/L phosphoric acid pH,3.7) as mobile phase, detection wavelength 254nm,flow rate 1mL/min measured osthole logP value of 3.46.ConclusionDetermination of logP values osthole a rapid, reproducible, and the sample can be measured without special purification, and solubility of the smaller compounds.

Osthole; Performance liquid chromatography; Oil/water partition coefficient

R282.71

：B

：1671-8194（2013）09-0053-02