溫慶偉,鄭妮,陳春霞,梁杏梅,黃仁彬
陽桃根為酢漿草科植物楊桃Averrhoa carambola L.的干燥根,分布于云南、廣東、廣西、福建及臺灣、馬來西亞、巴西、菲律賓等國家和地區(qū)[1]。廣西作為楊桃的主產(chǎn)地之一,資源相當(dāng)豐富。在民間,陽桃根主要用于治療風(fēng)濕痹痛,骨節(jié)風(fēng),癱瘓不遂,慢性頭風(fēng),心胃氣痛,遺精,白帶等。到目前為止,對陽桃根化學(xué)成分的了解較少,僅見報道它含有β-谷甾醇,羽扇豆醇和1,5-二羥基-6,7-二甲氧基-2-甲基蒽醌-3-O-β-吡喃葡萄糖苷[2~3]。陽桃葉中主要含有脂肪酸類、脂肪烷烴類及萜類等揮發(fā)性成分,carambolaflvone, isositexin[4~5]。我們的前期藥理學(xué)研究表明:它的醇提取物、水提取物的多糖及其醇提液的三氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇等萃取部位,均具有明顯降低動物血糖水平的作用[6~7]。因此,進行陽桃根化學(xué)成分類型的試驗研究,將會對了解它的物質(zhì)組成及確定其單體化合物分離、純化方法提供有力的依據(jù),也為今后明確它的降血糖藥效物質(zhì)奠定一些基礎(chǔ)。
陽桃根在2010年6月收集于廣西靈山縣。經(jīng)過廣西中醫(yī)藥研究院賴茂祥教授鑒定為酢漿草科植物楊桃Averrhoa carambola L.的干燥根。曬干,粉碎后,備用。
石油醚(60~90℃)、95%乙醇、乙酸乙酯、甲醇、氫氧化鈉、醋酐、三氯甲烷、濃硫酸、溴酚藍(lán)、三氯化鐵、鐵氰化鉀、明膠、氯化鈉、碘化汞鉀、碘化鉍鉀、硅鎢酸、濃鹽酸、鎂粉、氫氧化鉀、三氯化鋁、濃氨水、硼酸、醋酸鎂、鹽酸羥胺、吡啶、亞硝酰鐵氰化鈉、3,5-二硝基苯甲酸、苦味酸、茚三酮、硫酸銅、氯化鈉、酒石酸鉀、α-萘酚均為國產(chǎn)分析純。精密試紙(0.5-5.0,上海三愛思試劑有限公司)。
CAMAG薄層色譜儀(瑞士);電子天平(余姚市金諾天平儀器有限公司)。
圖1 樣品溶液制備流程圖
按2.1樣品溶液制備流程(見圖1)進行樣品溶液的制備,具體方法如下。
⑴石油醚提取液
取藥材粉末10 g,加石油醚(60~90 ℃)100 mL,索氏提取4小時,濾渣揮去石油醚,備用;濾液放在表面皿上揮發(fā),殘留物進行三萜類、甾體、揮發(fā)油與油脂等成分的檢查。
⑵乙醇提取液
取步驟⑴濾渣,加95%乙醇100 mL,用水浴加熱回流提取2小時,濾過,濾渣備用;直接取部分濾液進行酚類、鞣質(zhì)、有機酸等成分的檢查;將剩余濾液減壓濃縮至浸膏狀,置于蒸發(fā)皿中,加少量5%鹽酸攪拌萃取,得萃取液A;分取稀鹽酸溶解部分進行生物堿的理化試驗。萃取后的殘渣分為兩部分:
一部分以少量乙醇(約10 mL)溶解,得溶液B,進行黃酮、蒽醌、苷等類成分的檢查;另外一部分溶于少量乙酸乙酯(約15 mL)中,得溶液C,并轉(zhuǎn)移至分液漏斗中,加5%NaOH 15 mL振搖,使酚性物質(zhì)、有機酸等溶入下層堿水溶液中,分取乙酸乙酯層,用蒸餾水洗掉堿性,進行香豆素、萜類及萜類內(nèi)酯化合物等成分的檢查。
⑶水浸液
取步驟⑵所得的濾渣,加水50 mL,50~60 ℃水浴加熱1小時左右,濾過,濾液進行糖類、皂苷、氨基酸、多肽、蛋白質(zhì)等成分的檢查。
取按2.2樣品溶液制備方法所制得的六種樣品溶液按文獻的方法[8~10],進行試驗,結(jié)果見表1-3。
表1 石油醚提取液化學(xué)反應(yīng)試驗結(jié)果
表2 乙醇提取液化學(xué)反應(yīng)試驗結(jié)果
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表3 水提取液化學(xué)反應(yīng)試驗結(jié)果
本研究的結(jié)果表明:陽桃根中石油醚(60~90℃)提取液含有油脂、甾體或三萜類(可能是苷元),不含揮發(fā)油;乙醇提取液中含有酚類、有機酸、鞣質(zhì)、香豆素、萜類或萜類內(nèi)酯、甾體和三萜類成分,但生物堿、黃酮類成分反應(yīng)現(xiàn)象不明顯;水提取液中皂苷類成分反應(yīng)明顯,并含糖、多糖、苷類、氨基酸、多肽等,只有蛋白質(zhì)、多肽類化學(xué)成分反應(yīng)現(xiàn)象不明顯。由此可見,陽桃根的化學(xué)成分基本與陽桃葉的成分一致[11]。
甾體、有機酸、酚類及多糖等少數(shù)幾類化學(xué)成分的反應(yīng)現(xiàn)象比較明顯,它們在該植物中的含量可能較高;而其他各類成分的反應(yīng)現(xiàn)象均不是十分顯著,含量可能很低。因此,在對這些單體化學(xué)物的富集、分離及純化時,一定要注意選擇好色譜柱(或填料)、洗脫劑的類型,這樣才能達到更好的分離效果。
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