子宮內(nèi)膜癌中MMP-9、CD44v6的表達(dá)及意義

高 萍 李曉云 陳曉麗 王雪楠 楊愛軍 任英霞

子宮內(nèi)膜癌中MMP-9、CD44v6的表達(dá)及意義

高 萍1李曉云2陳曉麗2王雪楠2楊愛軍2任英霞1

目的檢測基質(zhì)金屬蛋白酶MMP-9和細(xì)胞粘附分子CD44拼構(gòu)變異體6（CD44v6）在子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)。方法免疫組學(xué)S-P法檢測73例EC組織、27例正常內(nèi)膜中CD44v6、MMP-9表達(dá)情況。結(jié)果MMP-9在EC中的陽性表達(dá)顯著高于正常增生期子宮內(nèi)膜（P＜0.01）；高、中分化的EC中MMP-9的陽性表達(dá)率低于低分化組（P＜0.05）；肌層浸潤組MMP-9陽性和強(qiáng)陽性的表達(dá)率高于無肌層浸潤組（P＜0.05），但與肌層浸潤深度無關(guān)（P＞0.05）。CD44v6在EC中的陽性表達(dá)顯著高于正常增生期子宮內(nèi)膜（P＜0.01）；CD44v6與肌層浸潤深度有關(guān)（P＜0.05）。結(jié)論聯(lián)合檢測CD44v6、MMP-9可作為判斷EC惡性程度，預(yù)測轉(zhuǎn)移和評估預(yù)后的生物學(xué)指標(biāo)。

子宮內(nèi)膜癌；基質(zhì)金屬蛋白酶-9；CD44拼構(gòu)變異體6

子宮內(nèi)膜癌（Endometrial carcinoma）是女性生殖道常見的三大惡性腫瘤之一近年來發(fā)病率有明顯上升趨勢，且發(fā)病趨于年輕化[1]。其發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明，一旦發(fā)生浸潤轉(zhuǎn)移及復(fù)發(fā)，預(yù)后較差。本研究旨在探討MMP-9和CD44v6在EC的表達(dá)及其與EC生物學(xué)行為及預(yù)后的關(guān)系，從而為EC的早期診斷和治療開辟新途徑。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取2005年1月～2012年12月在濟(jì)寧醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院病理科診斷明確的EC根治術(shù)后患者73例作為觀察組。納入標(biāo)準(zhǔn)：術(shù)前未進(jìn)行任何治療；無其它的相關(guān)疾?。慌R床資料完整?；颊吣挲g28～79歲，平均49.05歲。病理分級Ⅰ級26例，Ⅱ級23例，Ⅲ級24例。選取同期因子宮肌瘤行子宮切除的正常增生期子宮內(nèi)膜組織27例作為對照組，兩組之間資料比較差別無顯著性（P＞0.05）。

1.2 試劑與方法鼠抗人MMP-9、CD44v6單克隆抗體，S-P光譜超敏試劑盒、DAB酶底物顯色劑等均購自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司。操作按S-P試劑盒說明進(jìn)行。

1.3 結(jié)果判定以細(xì)胞膜和/或細(xì)胞漿出現(xiàn)的黃色、棕黃色或棕褐色著色為陽性細(xì)胞。結(jié)果判定方法[2]：高倍鏡隨機(jī)選10個(gè)染色良好的視野（腫瘤壞死區(qū)、邊緣區(qū)及與良性組織交界區(qū)均不作為計(jì)數(shù)視野），陽性的腫瘤細(xì)胞所占百分比（A）：無陽性腫瘤細(xì)胞0分；1%～25%陽性腫瘤細(xì)胞1分；26%～49%陽性腫瘤細(xì)胞2分；≥50%陽性腫瘤細(xì)胞3分。染色強(qiáng)度（B）：無色0分；淺黃色1分；棕黃色2分；棕褐色3分。最終計(jì)分A×B：0分為陰性（-）；1～3分為陽性（+）；4～9分為強(qiáng)陽性（++）。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS 16.0軟件系統(tǒng)。各組間用χ2檢驗(yàn)，相關(guān)性應(yīng)用Spearman等級相關(guān)法，雙尾檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 MMP-9和CD44v6在不同子宮內(nèi)膜組織中的表達(dá)MMP-9和CD44v6在EC中的陽性表達(dá)率分別為83.6%和72.6%，高于對照組的25.9%和44.4%，差異有顯著性（P均＜0.01）。

2.2 MMP-9和CD44v6在不同子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)MMP-9的表達(dá)與EC病理分級及肌層浸潤程度均明顯相關(guān)（P＜0.05）；與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及組織類型不相關(guān)（P＞0.05）。CD44v6的表達(dá)與EC的肌層浸潤及浸潤深度均明顯相關(guān)（P＜0.01）；隨淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和病理分級增高有下降的趨勢，但其差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。CD44v6和MMP-9在3例腺鱗癌均為強(qiáng)陽性表達(dá)，均明顯高于其在70例腺癌的陽性和強(qiáng)陽性表達(dá)率，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差別（P＞0.05）。見表1。

表1 MMP-9、CD44v6在不同子宮內(nèi)膜癌組織中的表達(dá)[n(%)]

3 討論

腫瘤細(xì)胞向遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，首先必須降解細(xì)胞外基質(zhì)和基底膜。包括腫瘤細(xì)胞粘附、基底成分蛋白水解、遷移三個(gè)階段。在此過程中細(xì)胞粘附分子、降解酶類、瘤細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)及其受體密切相關(guān)[3]。

CD44v6是CD44的一種拼構(gòu)變異體，主要在上皮源性細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞中表達(dá)，與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)[3-4]。本研究發(fā)現(xiàn)CD44v6在子宮內(nèi)膜癌的陽性率為72.6%，明顯高于對照組，說明EC中CD44v6的高表達(dá)與其發(fā)生有一定關(guān)系。CD44v6在肌層浸潤組的陽性表達(dá)率59.5%明顯低于無肌層浸潤組的90.4%（P＜0.05）。CD44v6在有肌層浸潤時(shí)表達(dá)降低，使得腫瘤細(xì)胞間粘附性下降，便于腫瘤細(xì)胞從原發(fā)灶脫落向遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。雖CD44v6的表達(dá)隨病理分級增高和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有降低趨勢，卻無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，這與劉乃富等[5]研究結(jié)果一致。另外3例腺鱗癌中CD44v6均為陽性表達(dá)，陽性表達(dá)率高于腺癌，但統(tǒng)計(jì)學(xué)上卻無意義。筆者認(rèn)為樣本量較少可能是造成這種差異并無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的原因，所以對CD44v6與不同組織學(xué)分型EC的關(guān)系有待擴(kuò)大樣本量進(jìn)一步研究。另外雖統(tǒng)計(jì)學(xué)顯示MMP-9表達(dá)與EC組織類型不相關(guān)，但作者認(rèn)為這種結(jié)果可能與腺鱗癌樣本量（僅3例）較少有關(guān)，有待今后擴(kuò)大樣本研究。

目前在對其它腫瘤的研究發(fā)現(xiàn)CD44v6 表達(dá)的蛋白參與了癌細(xì)胞與基底層粘連蛋白及Ⅳ型膠原酶（MMP-2、MMP-9）的粘附，為癌細(xì)胞降解細(xì)胞外基質(zhì)創(chuàng)造條件，使癌細(xì)胞容易從細(xì)胞巢上脫落。本研究結(jié)果亦顯示：CD44v6與 MMP-9 在EC中均呈高表達(dá)狀態(tài)，且其陽性表達(dá)率均顯著增高的趨勢一致，說明CD44v6和MMP-9在EC發(fā)生、發(fā)展過程中可能有協(xié)同促進(jìn)作用，詳盡的機(jī)制還有待進(jìn)一步研究。

[1] Benshushan A. Endometrial adenocarcinoma in young patients：evaluation and fertility-preservingtreatment[J]. Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol, 2004, 117(2)：132.

[2] Khan KN, Kitajima M, Hiraki K, et al. Immunopathogenesis of pelvic endometriosis：role of hepatocyte growth factor, macrophages and ovarian steroids[J]. AmJReprod Immunol, 2008,60(5)：383-404.

[3] Montgomery E, Abraham SC, Fisher C, et al. CD44 loss in gastric stromal tumors as a prognostic marker[J]. Am J Surg Pathol, 2004,28(2)：168.

[4] 廖治,肖洪濤,瞿大成,等.CD44分子與子宮內(nèi)膜癌關(guān)系的研究進(jìn)展[J].西部醫(yī)學(xué), 2009 21(6)：1027-1028.

[5] 劉乃福,薛鳳霞.COX-2、P16及CD44v6在人子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)及臨床意義[J].山東醫(yī)藥,2010,50(20)：97-98.

R34

A

1673-5846(2013)06-0300-02

1濟(jì)寧市婦幼保健院，山東濟(jì)寧 272100

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