張延輝 鄭科文 李 揚(yáng)
香菇多糖對(duì)骨折大鼠Gla蛋白和IL-2的影響
張延輝 鄭科文 李 揚(yáng)
目的分析香菇多糖對(duì)骨折大鼠相關(guān)因子的影響,從而研究其在骨折中的藥用意義。方法選取SD大鼠,均為雌性6月鼠齡,隨機(jī)分為對(duì)照組、模型給藥組(雌激素組、香菇多糖高、中、低劑量組)每組8只,共計(jì)40只。模型給藥組行卵巢切除后建立骨質(zhì)疏松性骨折動(dòng)物模型,再以 0.07 mg/kg 雌激素,450,250,150 mg/kg 香菇多糖進(jìn)行灌胃,3次/d,連續(xù) 30 d。采用 Elisa方法測量骨鈣素、IL-2的表達(dá)。結(jié)果與對(duì)照組相比較,給藥組Gla蛋白有不同程度的上調(diào),IL-2不同下調(diào)趨勢(shì)。中劑量組表現(xiàn)最為明顯。結(jié)論香菇多糖隨著劑量的不同對(duì)骨折大鼠有不同的促進(jìn)骨折愈合的作用。
香菇多糖;Gla蛋白;白細(xì)胞介素-2
香菇多糖(Lentinan)是生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑,能夠提高機(jī)體免疫功能。在全球范圍內(nèi)有很多的專家和學(xué)者都將其應(yīng)用于臨床,尤其應(yīng)用在較多的治療各種腫瘤中,但是我國這樣報(bào)道很少見。香菇多糖是屬于天然藥物中的多糖類成分,其主要作用是通過激活免疫細(xì)胞等途徑,來對(duì)免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié),進(jìn)一步提高機(jī)體的生物學(xué)效應(yīng)。對(duì)于其對(duì)骨折愈合狀態(tài)的影響,報(bào)道很少,本實(shí)驗(yàn)以實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為研究對(duì)象,針對(duì)骨折中產(chǎn)生的不同的因子來綜合分析其對(duì)骨折愈合過程的調(diào)節(jié)作用。
1.1 動(dòng)物模型的建立40只雌性SD大鼠,隨機(jī)分為對(duì)照組、模型給藥組(雌激素組、香菇多糖高、中、低劑量組)每組8只。于左側(cè)脛骨上1/3段行縱行切口,一次切開皮膚層,肌肉層于脛骨結(jié)節(jié)下1.5mm處切開骨膜,橫向鋸斷脛骨,隨即以直徑0.8mm克氏針固定,依次縫合切口。只有對(duì)照組不切除卵巢。雌激素組給藥劑量為 0.07mg/kg,香菇多糖組高、中、低給藥劑量為450、250、150mg/kg進(jìn)行灌胃,均為3次/d,連續(xù) 30d。
1.2 方法最后一日取血處死實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)Elisa方法試劑盒說明測量骨鈣素、IL-2的表達(dá)。結(jié)果在酶標(biāo)儀450 nm波長下15 min內(nèi)讀取。
1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析數(shù)據(jù)以表示,利用SPSS 18.0軟件進(jìn)行單因素方差分析和多重比較,P<0.05為差異有顯著性意義。
香菇多糖不同劑量對(duì)骨折大鼠Gla蛋白和IL-2的影響,見表1。
表1 香菇多糖不同劑量對(duì)骨折大鼠Gla蛋白和IL-2的影響[(±s),n]
表1 香菇多糖不同劑量對(duì)骨折大鼠Gla蛋白和IL-2的影響[(±s),n]
組別 Gla蛋白(ug/ml) IL-2(ug/ml)模型對(duì)照組 0.190±0.012 189.22±12.24雌激素組 0.235±0.052 202.23±11.26香菇多糖高劑量組0.255±0.089 228.29±38.44香菇多糖中劑量組0.265±0.092 226.36±41.49香菇多糖低劑量組0.241±0.063 237.29±49.49
Gla蛋白即為骨鈣素,是一種肽類物質(zhì),其主要反應(yīng)骨代謝的指標(biāo)[1],非膠原性蛋白的主要成分主要含有骨鈣素,成骨細(xì)胞合成和分泌較多的該物質(zhì),礦物質(zhì)對(duì)其結(jié)合力很強(qiáng),因此主要靠其來維持穩(wěn)定的礦物質(zhì)。Gla蛋白主要存在于骨組織中,可以微量入血,進(jìn)入循環(huán)中。血中骨鈣素的高低,主要反映成骨細(xì)胞活性和骨轉(zhuǎn)換程度。
白細(xì)胞介素-2是由多種細(xì)胞產(chǎn)生的一種細(xì)胞因子[2],其可以作用于很多細(xì)胞。到現(xiàn)在為止已經(jīng)發(fā)現(xiàn)白細(xì)胞介素1~29號(hào),功能很多并且參與機(jī)體的免疫功能調(diào)節(jié)。另外也有資料報(bào)道,在骨質(zhì)疏松的患者的體內(nèi),其有高度表達(dá)趨勢(shì)。可能機(jī)制為白細(xì)胞介素-2在體內(nèi)可顯著促進(jìn)成骨細(xì)胞的凋亡,進(jìn)而抑制骨質(zhì)疏松性骨折的愈合[3]。
本實(shí)驗(yàn)中,不同劑量的香菇多糖對(duì)骨折后的大鼠體內(nèi)的這兩種因子有很大的影響,其中均以中劑量組最為明顯,既為有促進(jìn)Gla蛋白產(chǎn)生的趨勢(shì),IL-2有降低傾向。綜上所述,香菇多糖確有影響骨折大鼠體內(nèi)相關(guān)因子產(chǎn)生的效果,對(duì)于香菇多糖是否能夠完全促進(jìn)骨折愈合還有待進(jìn)一步臨床的驗(yàn)證和實(shí)驗(yàn)。
[1] Lee MK, Kim JH, Lee CH, et al. Clinicopathological significance of BGP expression in non-small-cell lung carcinoma:relationship with histological type, microvessel density and patients' surviva[J]. Pathology, 2006,38(6):555-560.
[2] Gianni W, Ricci A, Gazzaniga P, et al. Raloxifene modulates interleukin-6 and tumor necrosis factor-alpha synthesis in vivo:results from a pilot clinical study[J]. J Clin Endocrinol Metab, 2004,89(12):6097-6099.
[3] Ji GR, Yao M, Sun CY, et al. Association of collagen type I alpha1(COLIA1) Sp1 polymorphism with osteoporotic fracture in Caucasian post-menopausal women: a meta-analysis[J]. J Int Med Res, 2009,37(6):1725-1732.
R915
A
1673-5846(2013)06-0293-02
黑龍江省牡丹江醫(yī)學(xué)院紅旗醫(yī)院,黑龍江牡丹江 157011