用DNA倍體定量分析和陰道鏡活檢進(jìn)一步篩查宮頸液基細(xì)胞學(xué)異常病例 458 例的結(jié)果分析

趙中晟 畢學(xué)杰

宮頸癌的發(fā)病率逐年增加和越來(lái)越年輕化引起人們的重視，而宮頸液基細(xì)胞學(xué)檢查（TCT）對(duì)于宮頸癌和癌前病變（宮頸上皮內(nèi)瘤變）的早期發(fā)現(xiàn)、早期治療提供有力幫助。本研究對(duì) 2011年5～12月期間宮頸液基細(xì)胞學(xué)檢查結(jié)果異常的ASCUS、LSIL、HSIL和SCC的病例共計(jì) 458 例進(jìn)行DNA倍體分析和陰道鏡活檢病理進(jìn)一步驗(yàn)證，現(xiàn)將結(jié)果分析報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2011年5～12月間德宏州人民醫(yī)院和石家莊市婦產(chǎn)醫(yī)院病理科對(duì)門診、住院患者檢查液基細(xì)胞學(xué)共計(jì) 12460 例，共篩查出宮頸細(xì)胞異常者 458 例（3.67%），其中ASCUS 391 例（3.14%）、LSIL 45 例（0.36%）、HSIL 23 例（0.21%）和SCC 3 例（0.024%）。年齡 21～75 歲，平均 33.23 歲。

1.2 方法

1.2.1 液基細(xì)胞采用新柏氏液基細(xì)胞學(xué)檢查技術(shù)提供，婦科醫(yī)師取材，自動(dòng)機(jī)器制片，巴氏染色，分別由 2 位高職診斷醫(yī)師共同確認(rèn)，采用TBS分類，篩選結(jié)果異常為ASCUS、LSIL、HSIL和SCC患者共 458 例。

1.2.2 對(duì) 458 例液基細(xì)胞學(xué)異常病例采取液基制片后，進(jìn)行FeulgenDNA染色，采用武漢蘭丁醫(yī)學(xué)高科技有限公司提供的DNA細(xì)胞自動(dòng)檢測(cè)分析儀進(jìn)行DNA倍體定量分析,所有Feulgen染色片。

用全自動(dòng)細(xì)胞圖像分析系統(tǒng)(AICM)行掃描處理［1］。每例計(jì)數(shù) 8000 個(gè)細(xì)胞。DNA診斷結(jié)果為如下 4 種情況：（1）未見異倍體細(xì)胞及異倍體細(xì)胞峰（以細(xì)胞DNA為 2 C為主）。（2）少量異倍體細(xì)胞（以少數(shù)細(xì)胞DNA指數(shù)>2.5 為主，即出現(xiàn)少量 5 C細(xì)胞小于 1～5 個(gè)）。（3）可見異倍體細(xì)胞及異倍體細(xì)胞峰（以大量細(xì)胞DNA指數(shù)>2.5 為主，大于 5 C異常細(xì)胞數(shù)量在 5～15 個(gè)之間）。（4）大量異倍體細(xì)胞及異倍體細(xì)胞峰（以大量細(xì)胞DNA指數(shù)>2.5 為主，大于 5 C異常細(xì)胞數(shù)量大于 15 個(gè)）。凡是有DNA指數(shù)>2.5 以上細(xì)胞的玻片,都要通過(guò)細(xì)胞技術(shù)員在顯微鏡下逐一對(duì)DNA指數(shù)>2.5 細(xì)胞進(jìn)行核實(shí),以排除AcCell系統(tǒng)將垃圾和重疊的細(xì)胞核誤認(rèn)為癌細(xì)胞或異常細(xì)胞。

1.2.3 對(duì) 458 例細(xì)胞學(xué)異常的病例均進(jìn)行陰道鏡檢查，對(duì)可疑部位采取 4 點(diǎn)活檢，病理連續(xù)切片，高年資病理醫(yī)師閱片，結(jié)果為未見宮頸病變或?qū)m頸鱗狀上皮細(xì)胞增生、CIN I、CIN II、CIN III和宮頸癌變。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 計(jì)數(shù)資料間比較用χ2檢驗(yàn)進(jìn)行分析，P<0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 宮頸細(xì)胞異常和DNA倍體分析掃描結(jié)果的關(guān)系 對(duì) 458 例液基細(xì)胞學(xué)檢查異常的病例均進(jìn)行DNA倍體定量掃描，共分類出未見異倍體細(xì)胞及異倍體細(xì)胞峰（以細(xì)胞DNA指數(shù)為 2 C為主）248 例（54.15%）、少量異倍體異常細(xì)胞 107 例（23.36%）（圖 1）、可見異倍體細(xì)胞 59 例（12.88%）（圖 2），現(xiàn)大量異倍體細(xì)胞及異倍體細(xì)胞峰（以大量細(xì)胞DNA指數(shù)>5 C為主）44 例（9.61%）（圖 3），見表1。

表1 細(xì)胞學(xué)異常的DNA倍體定量結(jié)果比較（例）

圖1 少量異倍體異常細(xì)胞直方圖和散點(diǎn)圖

圖2 可見異倍體異常細(xì)胞直方圖和散點(diǎn)圖

圖3 大量異倍體異常細(xì)胞直方圖和散點(diǎn)圖

2.2 宮頸細(xì)胞異常和活檢病理結(jié)果的關(guān)系 對(duì) 458 例細(xì)胞學(xué)異常病理選取可疑部位采取 4 點(diǎn)活檢，病理連續(xù)切片，高年資病理醫(yī)師閱片，結(jié)果為未見宮頸病變或?qū)m頸鱗狀上皮細(xì)胞增生共計(jì) 243 例（50.87%）、CIN I共 76 例（16.59%）、CIN II共109例（23.80%）、CIN III共計(jì) 39 例（8.52%）和宮頸癌變 1 例（0.22%）。見表2。

表2 細(xì)胞學(xué)異常和活檢病理結(jié)果比較（例）

2.3 DNA倍體分析和活檢病理的關(guān)系

通過(guò)兩種方法比較，DNA倍體分析的異常檢出率和活檢病理異常檢出率基本一致，統(tǒng)計(jì)學(xué)上無(wú)顯著性差異，P>0.05。見表3。

表3 DNA倍體分析和活檢病理的比較（例）

3 討論

DNA異倍體的出現(xiàn)是染色體異常的表現(xiàn)，同時(shí)也是細(xì)胞癌變的特征指標(biāo)。ASCUS和LSIL病變中如出現(xiàn)DNA異倍體細(xì)胞，提示提示病變有進(jìn)一步發(fā)展的趨勢(shì)或者高危HPV感染的可能性。

本研究通過(guò)DNA倍體定量分析對(duì)細(xì)胞學(xué)異常的病例 458 例篩出倍體異常 210 例（占 45.85%）和活檢異常結(jié)果 215 （46.94%）對(duì)比無(wú)顯著差別（P>0.05）。證明用細(xì)胞學(xué)DNA倍體定量分析可以替代有創(chuàng)的陰道鏡觀察 2～4 點(diǎn)活檢方法，其結(jié)果可以和活檢媲美。

眾所周知，TCT對(duì)常規(guī)人群HSIL、LSIL的檢出率分別提高了 59.7%和 60%，TCT的假陽(yáng)性率和假陰性率比傳統(tǒng)涂片都顯著降低。盡管如此，細(xì)胞學(xué)結(jié)果仍不能作為診斷及治療的依據(jù)，只有正確理解此項(xiàng)報(bào)告，進(jìn)行正確、及時(shí)、必要的陰道鏡檢查，取得準(zhǔn)確的組織結(jié)果才能使患者得到正確的診治。ASCCP（美國(guó)陰道鏡與宮頸病理協(xié)會(huì)）于 2001年針對(duì)宮頸細(xì)胞學(xué)結(jié)果異常與經(jīng)組織學(xué)證實(shí)的宮頸上皮內(nèi)瘤變制定了一整套循證醫(yī)學(xué)指南[2]。臨床醫(yī)師接到患者細(xì)胞學(xué)ASC及以上異常報(bào)告后往往采取宮頸活檢方式進(jìn)一步確診，而活檢結(jié)果表明細(xì)胞學(xué)檢查經(jīng)常出現(xiàn)假陰性和假陽(yáng)性?；顧z是有創(chuàng)檢查，但通常僅取 2～4 點(diǎn)位，如果活檢未取到病變部位，就可能造成假陰性。區(qū)別于正常和反應(yīng)性改變，又無(wú)法明確診斷的病例給出限定，但只有通過(guò)完善、正規(guī)的管理和篩選才能得到正確的診斷，最大程度減少漏診或過(guò)度診斷、治療。

2001版TBS建議:ASCUS伴炎癥反應(yīng)先治療炎癥,炎癥消退后重復(fù)涂片;ASC-US伴明顯萎縮改變的先做增生試驗(yàn),然后涂片鑒別是萎縮產(chǎn)生的反應(yīng)性改變還是SIL;對(duì)ASC-US傾向良性反應(yīng)改變的需涂片隨訪,2 次涂片時(shí)間不應(yīng)少于 3 個(gè)月(一般 3～6 個(gè)月重復(fù)涂片,短期內(nèi)重復(fù)涂片會(huì)造成假陰性,連續(xù) 3 次涂片陰性才算正常。對(duì)ASC-US傾向SIL者要陰道鏡觀察和檢查。國(guó)內(nèi)目前常用處理原則:（1）3～6 個(gè)月復(fù)查細(xì)胞學(xué);（2）高危型HPV-DNA檢測(cè);（3）即刻陰道鏡檢查。大量研究結(jié)果顯示，ASC-US可能是反應(yīng)性變化，也可能隱藏著宮頸病變[3]。

張薇等[4]報(bào)道，若以病理學(xué)診斷為金標(biāo)準(zhǔn),計(jì)算常規(guī)細(xì)胞學(xué)和DNA倍體分析診斷CIN II或CIN II以上級(jí)別的敏感性。若以ASCUS和LSIL診斷作為活檢發(fā)現(xiàn)CIN II或CIN II以上級(jí)別的敏感性為 92.9%和 35.7%。而若以發(fā)現(xiàn) 1 個(gè)以上、3 個(gè)以上和 10 個(gè)以上非整倍體細(xì)胞作為活檢而發(fā)現(xiàn)CIN II或CIN II以上級(jí)別的敏感性分別為 100%、92.9%和 21.4%。

本研究對(duì)DNA倍體異常的病例進(jìn)行比對(duì)，發(fā)現(xiàn)少量異倍體異常細(xì)胞 107 例（23.36%）、可見倍體異常占 59 例（12.88%），現(xiàn)大量異倍體細(xì)胞及異倍體細(xì)胞峰（以大量細(xì)胞DNA指數(shù)>5 C為主）44 例（9.61%），而活檢結(jié)果CIN I共 76 例（16.59%）、CIN II共 109 例（23.80%）、CIN III共計(jì) 39 例（8.52%）和宮頸癌變 1 例（0.22%）。結(jié)果表明，CIN I級(jí)和部分CIN II級(jí)基本掃描結(jié)果為少量DNA倍體異常和可見倍體異常;部分CIN II、CIN III級(jí)和SCC的掃描結(jié)果為大量DNA倍體異常。

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