白槍桿的化學(xué)成分研究（Ⅰ）Δ

譚興起，郭良君，鄭巍，譚昌恒（1.解放軍第85醫(yī)院，上海 010；.解放軍第98醫(yī)院，浙江 湖州 1000；.中國(guó)科學(xué)院上海藥物研究所新藥研究國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，上海 010）

白槍桿（Fraxinus malacophylla Hemsl.）為木犀科梣屬植物，是我國(guó)特有植物，分布于廣西、云南[1]。其味苦、澀，性寒，具有清熱、利尿、通便的功效，主治膀胱炎、膀胱結(jié)石、小便不利、便秘、瘧疾、高燒鼻衄等癥。《科學(xué)的民間藥草》記載白槍桿的根皮、樹皮、樹葉均有顯著的解熱作用。臨床試驗(yàn)結(jié)果表明，白槍桿根皮對(duì)急性和慢性間日瘧是特效的治療劑，對(duì)惡性瘧疾和四日瘧也有效[2]。然而，關(guān)于該植物的化學(xué)成分研究還較少，《中藥大辭典》中記載白槍桿樹皮含新寧堿、鞣質(zhì)、樹脂、糖類、香豆素等[2]；He ZD等[3]曾從白槍桿中分離得到過兩個(gè)裂環(huán)烯醚萜葡糖苷化合物。為了更進(jìn)一步地尋找白槍桿中活性成分，筆者對(duì)白槍桿樹皮80%的乙醇提取物進(jìn)行了化學(xué)成分研究。

1 材料

1.1 儀器

UV-1型三用紫外分析儀（上海顧村電光儀器廠）；201D型升降恒溫水油浴鍋（杭州惠創(chuàng)儀器設(shè)備有限公司）；SHB-ⅢA型循環(huán)水式多用真空泵（上海預(yù)康科教儀器設(shè)備有限公司）；RE-201D型減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（杭州惠創(chuàng)儀器設(shè)備有限公司）；BSZ-100型自動(dòng)部分收集器（上海滬西分析儀器有限公司）；DRX-400 MHz型核磁共振（NMR）儀（德國(guó)Bruker公司）；ZAB-ZF型質(zhì)譜（MS）儀（英國(guó)VG公司）。

1.2 試劑

氯仿、甲醇、乙醚、石油醚、乙酸乙酯、硫酸、冰醋酸均為分析純，乙醇為醫(yī)用95%乙醇，水為自制蒸餾水；薄層層析用硅膠粉（200～300目）和薄層層析用硅膠板均購(gòu)自煙臺(tái)江友硅膠開發(fā)有限公司。

1.3 藥材

白槍桿樹皮于2011年4月采自云南蒙自縣，經(jīng)解放軍第98醫(yī)院藥械科郭良君副主任藥師鑒定其來源為木犀科植物白槍桿（F.malacophylla Hemsl.）。

2 提取與分離

取白槍桿干燥樹皮15kg，用80%乙醇浸泡7天，連續(xù)浸泡3次，合并浸出液，回收蒸干；浸膏用水加熱溶解，濾過，分別用石油醚、氯仿、正丁醇萃取，每個(gè)批次萃取3次，分別蒸干萃取液，得到石油醚、氯仿、正丁醇部分。本試驗(yàn)對(duì)正丁醇部分進(jìn)行分離。將正丁醇部分用大孔樹脂經(jīng)10%、20%、30%的乙醇溶液梯度洗脫，分別合并濃縮，得到10%、20%、30%三部分，再綜合運(yùn)用硅膠、凝膠等色譜手段按以下方法對(duì)這三部分的化學(xué)成分進(jìn)行分離純化，得到化合物1～10。

10%部分經(jīng)氯仿-甲醇及氯仿-甲醇-水系統(tǒng)梯度洗脫。氯仿-甲醇（15∶1，V/V）洗脫部分經(jīng)處理得到3個(gè)化合物:經(jīng)甲醇重結(jié)晶得到化合物9；再經(jīng)70%甲醇凝膠純化，得到化合物4和化合物8。氯仿-甲醇（30∶1→40∶1，V/V）洗脫部分經(jīng)甲醇（略帶水）重結(jié)晶得到白色晶體，即化合物7。氯仿-甲醇-水（7∶1∶1，V/V/V）洗脫部分先后經(jīng)甲醇、氯仿-甲醇（1∶1，V/V）凝膠純化，得到化合物2和化合物3。

20%部分經(jīng)氯仿-甲醇系統(tǒng)梯度洗脫。氯仿-甲醇（10∶1，V/V）洗脫部分經(jīng)甲醇凝膠純化，再用氯仿-甲醇（10∶1，V/V）重結(jié)晶，得到略黃色晶體，即化合物1；氯仿-甲醇（5∶1，V/V）洗脫部分經(jīng)甲醇凝膠純化，再用氯仿-甲醇（5∶1，V/V）重結(jié)晶，得到化合物10。

30%部分經(jīng)氯仿-甲醇系統(tǒng)梯度洗脫。氯仿-甲醇（10∶1，V/V）洗脫部分經(jīng)甲醇-水（7∶3，V/V）凝膠純化，得到化合物6，再經(jīng)硅膠用氯仿-甲醇系統(tǒng)梯度洗脫[氯仿-甲醇（20∶1→15∶1→10∶1，V/V）]，得到化合物5。

各化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)式見圖1。

圖1 化學(xué)結(jié)構(gòu)式Fig 1 Chemical structure

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1:淡黃色晶體，熔點(diǎn)為161～163℃，分子質(zhì)量為194，分子式為C10H10O4。LC-MS（液質(zhì)聯(lián)用）:193（M-H）－；163（M-MeO）+。1H-NMR（400 MHz，DMSO）δ:3.72（3H，s，—OCH3），7.17（1H，d，J＝2.0 Hz，H-2），6.87（1H，d，J＝7.8 Hz，H-5），7.03（1H，dd，J＝7.8，2.0 Hz，H-6），6.27（1H，d，J＝16.0 Hz，8-H），7.54（1H，d，J＝16.0 Hz，9-H）。13C-NMR（100 MHz，DMSO）δ:127.6（C-1），115.2（C-2），146.3（C-3），148.7（C-4），115.3（C-5），122.5（C-6），145.9（C-7），116.0（C-8），167.8（C-9），51.5（—OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[4]報(bào)道基本一致，故鑒定該化合物為咖啡酸甲酯。

化合物2:淺黃色粉末，分子質(zhì)量為342，分子式為C15H18O9。LC-MS:365（M+Na）+，707（2M+Na）+；341（M-H）-。參考文獻(xiàn)[5]，可以判斷13C-NMR數(shù)據(jù)有一個(gè)α-D-葡萄吡喃糖單元。結(jié)合文獻(xiàn)[6]可知，Glc-1位的化學(xué)位移95.79提示被酯化。通過歸屬數(shù)據(jù)，推斷該化合物為1-O-咖啡酰基-α-D-葡萄吡喃糖。化合物2、3的NMR數(shù)據(jù)見表1。

表1 化合物2、3的NMR數(shù)據(jù)Tab 1 NMR data of compound 2，3

化合物3:淡黃色粉末，分子質(zhì)量為342，分子式為C15H18O9。LC-MS:365（M+Na）+，707（2M+Na）+；341（M-H）－。具體碳?xì)湫盘?hào)歸屬見表1。光譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[6]報(bào)道一致，故鑒定該化合物為1-O-咖啡?；?β-D-葡萄吡喃糖。

化合物4:白色結(jié)晶（甲醇），熔點(diǎn)為104～105℃，分子質(zhì)量為314，分子式為C14H18O8。ESI-MS（電噴霧電離質(zhì)譜）:337（M+Na）+，651（2M+Na）+?；衔?的NMR數(shù)據(jù)見表2。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[7]對(duì)照基本一致，故鑒定該化合物為存額阿塔斯德A。

表2 化合物4的NMR數(shù)據(jù)Tab 2 NMR data of compound 4

化合物5:白色粉末，分子質(zhì)量為418，分子式為C18H26O11。 ESI-MS:441（M+Na）+。1H-NMR（400 MHz，DMSO）δ:1.78（3H，d，J＝7.2 Hz，H-10），2.41（1H，m，H-6b），2.68（1H，dd，J＝3.6，14.8 Hz，H-6a），3.42（3H，s，H-7，—OCH3），3.83（3H，s，H-11，—OCH3），3.92（1H，d，J＝5.2 Hz，H-5），4.72（1H，d，J＝7.6hz，H-Glc端基），5.94（1H，s，H-1），6.15（1H，s，H-8），7.48（1H，s，H-3）。13C-NMR（100 MHz，DMSO）δ:92.9（C-1），153.1（C-3），108.2（C-4），30.1（C-5），40.1（C-6），172.1（C-7），122.1（C-8），129.4（C-9），13.1（C-10），166.2（C-11），51.2（C-11，—OCH3），51.4（C-7，—OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[8]報(bào)道基本一致，故鑒定該化合物為7，11-二甲酯油苷。

化合物6:白色粉末，熔點(diǎn)為147～148℃，分子質(zhì)量為524，分子式為 C25H32O12。LC-MS:547（M+Na）+；569（M+HCOO－）－。1H-NMR（400 MHz，CD3OD）δ:Aglycone:5.90（1H，s，H-1），7.51（1H，s，H-3），4.10（1H，m，H-5），2.42（1H，dd，J＝9.3，14.1 Hz，H-6α），2.81（1H，dd，J＝4.4，14.1 Hz，H-6β），6.08（1H，q，J＝7.0 Hz，H-8），1.64（3H，d，J＝7.1 Hz，H-10），3.71（3H，s，—OCH3）；Phenylethyl:4.21（2H，t，J＝7.0 Hz，H-1′），2.82（2H，t，J＝7.0 Hz，H-2′），7.05（2H，d，J＝8.3 Hz，H-4′，8′），6.71（2H，d，J＝8.4 Hz，H-5′，7′）；Glucose:4.80（1H，d，J＝7.7 Hz，H-1″），3.20～3.35（4H，H-2″～5″）。13C-NMR（100 MHz，CD3OD）δ:Aglycone:95.6（C-1），155.6（C-3），109.8（C-4），32.3（C-5），41.7（C-6），173.7（C-7），125.4（C-8），130.9（C-9），14.1（C-10），169.1（C-11），52.4（—OCH3）；Phenylethyl:67.4（C-1′），35.6（C-2′），130.5（C-3′），131.5（C-4′，8′），116.8（C-5′，7′），157.6（C-6′）；Glucose:101.3（C-1″），75.2（C-2″），78.4（C-3″），72.0（C-4″），78.9（C-5″），63.2（C-6″）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[9]報(bào)道一致，故鑒定該化合物為（8Z）-橄欖苦苷。

化合物7:白色結(jié)晶（甲醇），熔點(diǎn)為225～227℃，分子質(zhì)量為 180，分子式為C6H12O6。1H-NMR（400 MHz，CD3OD）δ:3.18（1H，dd，J＝9.1 Hz，H-2），3.40（2H，dd，J＝2.7，9.9 Hz，H-4，6），3.54（2H，t，J＝9.7 Hz，H-1，3），4.12（1H，t，J＝2.7 Hz，H-5），4.40～4.50（6H，m，6×OH）。13C-NMR（100 MHz，CD3OD）δ:73.8（C-4，6），75.0（C-l，3），74.8（C-2），77.0（C-5）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[10]報(bào)道一致，故鑒定該化合物為肌醇。

化合物8:白色結(jié)晶，熔點(diǎn)為104～105℃，分子質(zhì)量為110，分子式為 C6H6O2。1H-NMR（400 MHz，CD3OD）δ:7.65（2H，s，—OH），6.84（2H，m，H-3，6），6.56（2H，m，H-4，5）。13C-NMR（100 MHz，CD3OD）δ:143.5（C-1，2），121.7（C-3，6），125.4（C-4，5）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[11]報(bào)道基本一致，故鑒定該化合物為鄰苯二酚。

化合物9:白色粉末，分子質(zhì)量為208，分子式為C8H16O6。ESI-MS:231（M+Na）+，439（2M+Na）+。1H-NMR（400 MHz，CD3OD）δ:1.21（3H，t，J＝8.1 Hz，—CH3），3.88（2H，m，J＝8.1 Hz，—CH2—），3.81（2H，m），3.52（1H，m，—OH），3.35（3H，m，3×OH），4.81（1H，d，J＝7.0 Hz）。13C-NMR（100 MHz，CD3OD）δ:112.0（C-l），80.2（C-2），75.9（C-3），83.9（C-4），70.1（C-5），64.7（C-6），63.6（—CH2—），15.5（—CH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[12]報(bào)道基本一致，故鑒定該化合物為α-乙基-D-呋喃葡糖苷。

化合物10:黃色不定形粉末，分子質(zhì)量為178，分子式為C7H14O5。13C-NMR（100 MHz，CDCL3）δ:103.0（C-1），74.2（C-2），73.9（C-3），75.3（C-4），72.7（C-5），18.4（C-6），57.5（—OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[12]報(bào)道基本一致，故鑒定該化合物為β-甲基-L-吡喃鼠李糖苷。

4 結(jié)論

本研究中，筆者從白槍桿樹皮中一共分離鑒定出10個(gè)化合物，均為首次從該植物中分離得到，補(bǔ)充了該植物的化學(xué)成分?jǐn)?shù)據(jù)庫(kù)，可為進(jìn)一步了解該植物的特性提供試驗(yàn)依據(jù)。

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