沙冬青莖甲醇提取物對(duì)小菜蛾幼蟲(chóng)生長(zhǎng)發(fā)育抑制作用研究

雷雪靜　賀達(dá)漢　何玉玲　馬永林

摘要：室內(nèi)測(cè)定了沙冬青莖甲醇提取物對(duì)小菜蛾幼蟲(chóng)生長(zhǎng)發(fā)育的抑制作用。研究結(jié)果表明，其提取物對(duì)小菜蛾幼蟲(chóng)相對(duì)生長(zhǎng)率(RGR)、近似消化率(AD)、食物利用率(ECI)和食物轉(zhuǎn)化率(ECD)雖在一段時(shí)間內(nèi)連續(xù)發(fā)生變化，但最高濃度為0.2 g／mL時(shí)，這4項(xiàng)指標(biāo)始終低于其他處理。沙冬青莖甲醇提取物對(duì)小菜蛾幼蟲(chóng)歷期的影響不明顯，但使蛹期延長(zhǎng)，幼蟲(chóng)死亡率升高，且提取物濃度越高，這些作用效果越明顯。

關(guān)鍵詞：沙冬青莖甲醇提取物；小菜蛾；抑制作用

中圖分類號(hào)：S 482．39

沙冬青[Ammopiptanthus mongolicus(Max-im.ex Kom.)Cheng f.]系豆科旱生植物，屬于第3紀(jì)亞熱帶常綠闊葉林旱生化類型的殘遺種，是溫帶荒漠地區(qū)唯一的常綠闊葉灌木Ⅲ。該植物味苦微辛，性溫有毒，綿羊、山羊偶有啃食則呈醉狀，采食過(guò)多可致死。據(jù)有關(guān)資料記載該植物綜合利用價(jià)值較高，除固沙、綠化觀賞等功能外，其葉和嫩莖可殺蟲(chóng)，被列入可開(kāi)發(fā)利用植物資源。那么該植物體內(nèi)的有毒物質(zhì)對(duì)昆蟲(chóng)是否也具有毒殺、驅(qū)避、生長(zhǎng)發(fā)育抑制作用，作者研究沙冬青一年內(nèi)生長(zhǎng)的嫩莖的殺蟲(chóng)活性對(duì)綜合開(kāi)發(fā)利用該植物及植物源農(nóng)藥開(kāi)發(fā)提供初步依據(jù)。

小菜蛾[Plutella zylostella(L.)]屬鱗翅目菜蛾科，是一種全球性的十字花科蔬菜害蟲(chóng)。因其分布廣，易于飼養(yǎng)，所以常作為試蟲(chóng)。利用植物次生物質(zhì)調(diào)節(jié)害蟲(chóng)行為從而控制作物蟲(chóng)害的研究，特別是從植物或植物產(chǎn)品中提取和分離控制害蟲(chóng)的生物活性物質(zhì)已成為害蟲(chóng)防治的一個(gè)世界性的趨勢(shì)。

1材料與方法

1.1供試材料

于2006年10月采集沙冬青嫩莖，洗凈、陰干后粉碎并過(guò)60目篩。每次各稱取50 g粉，用濾紙包好，將濾紙包置于索氏提取器的樣品管中，先用甲醇浸泡5 h，然后再于75℃下連續(xù)提取24 h，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀將提取液濃縮至浸膏。浸膏置于4℃冰箱中冷藏保存。

供試的小菜蛾采自未施任何農(nóng)藥的甘藍(lán)田中，然后在室內(nèi)用新鮮、無(wú)農(nóng)藥的油菜及甘藍(lán)飼養(yǎng)。選取第2代后的2齡中期幼蟲(chóng)供試。

1.2生長(zhǎng)發(fā)育抑制作用的測(cè)定

參照楊振德等飼喂稱重法測(cè)定。將新鮮甘藍(lán)葉片用打孔器打成直徑為2 cm的圓形葉碟。稱取沙冬青莖甲醇提取物2 g，加入1 mL無(wú)水乙醇攪拌溶解(可加熱至45～50℃，溶解效果會(huì)更好)，待完全溶解后加入蒸餾水依次稀釋成0.2、0.1、0.05 g／mL3個(gè)濃度溶液。將3種濃度的提取液分別涂抹在葉碟兩面，各處理40片葉碟。另設(shè)對(duì)照，對(duì)照葉碟在10％的乙醇溶液中浸泡8 s后取出晾干，同樣浸泡40片葉碟。將處理好的葉碟放人直徑為6 cm的培養(yǎng)皿(墊有保濕濾紙)中，每皿2片葉碟(已稱重)作為一個(gè)重復(fù)，接人饑餓4 h的2齡中期幼蟲(chóng)(已稱重)，每皿1頭，重復(fù)20次。用保鮮膜封口，昆蟲(chóng)針扎孔透氣，向培養(yǎng)皿內(nèi)注入0.5 mL，蒸餾水保濕。然后將培養(yǎng)皿放入光照周期L∥D=14 h∥10 h、溫度20℃的光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。24 h后對(duì)幼蟲(chóng)、葉碟再次稱重；48 h后對(duì)幼蟲(chóng)、葉碟、糞便稱重并更換新鮮甘藍(lán)葉片(需稱重)。以后每天稱取幼蟲(chóng)、葉片、糞便重量，并每隔1天更換新鮮葉片，直至幼蟲(chóng)化蛹，觀察記錄幼蟲(chóng)期、蛹期所需時(shí)間(d)，計(jì)算化蛹率、羽化率。

1.3數(shù)據(jù)計(jì)算與分析

根據(jù)楊振德等方法計(jì)算相對(duì)生長(zhǎng)率(RGR)、近似消化率(AD)、食物利用率(ECI)、食物轉(zhuǎn)化率(ECD)等。

利用DPS V3.01專業(yè)統(tǒng)計(jì)軟件分析數(shù)據(jù)方差，數(shù)據(jù)之間的差異用Duncans新復(fù)極差法進(jìn)行比較。

2結(jié)果與分析

2.1沙冬青莖甲醇提取物對(duì)小菜蛾幼蟲(chóng)生長(zhǎng)發(fā)育的抑制作用

用不同濃度提取物藥液處理過(guò)的葉碟飼喂小菜蛾2齡中期幼蟲(chóng)2 d，然后更換未處理過(guò)的新鮮甘藍(lán)葉片繼續(xù)飼喂。各處理幼蟲(chóng)的體重增加量、取食量均有一定的變化，體現(xiàn)在RGR、AD、ECI、ECD 4項(xiàng)指標(biāo)的變化中(圖1)。

從各項(xiàng)指標(biāo)的變化明顯看出，幼蟲(chóng)取食處理葉片后的3 d內(nèi)，幼蟲(chóng)在0.20 g／mL下的相對(duì)生長(zhǎng)率、近似消化率、食物利用率、食物轉(zhuǎn)化率始終低于其他2個(gè)處理值；低濃度下(0.05 g／mL)4項(xiàng)指標(biāo)值始終低于對(duì)照值，即濃度越高，幼蟲(chóng)體重增加量越小，對(duì)食物的利用能力越小。尤其是幼蟲(chóng)取食處理葉片1 d后，可能由于對(duì)環(huán)境的不適應(yīng)，各處理下的幼蟲(chóng)相對(duì)生長(zhǎng)率都發(fā)生下降。但CK、0.1 g／mL、0.05g／mL濃度下的變化急劇，0.2g／mL濃度變化非常小。幼蟲(chóng)取食處理葉片2 d后，可能由于適應(yīng)了培養(yǎng)箱內(nèi)環(huán)境，幼蟲(chóng)取食能力、消化力開(kāi)始逐漸恢復(fù)，所以幼蟲(chóng)相對(duì)生長(zhǎng)率均開(kāi)始上升，但0.2 g／mL處理下幼蟲(chóng)相對(duì)生長(zhǎng)率的變化仍最小，而且在整個(gè)取食處理葉片后的4 d內(nèi)生長(zhǎng)變化極其平緩。從圖1可看出幼蟲(chóng)在高濃度下生長(zhǎng)率低而且變化緩慢與高濃度下低的食物消化能力、食物轉(zhuǎn)化、利用能力有密切的關(guān)系。

2.2沙冬青莖甲醇提取物對(duì)小菜蛾發(fā)育歷期、化蛹率及羽化率、死亡率的影響

沙冬青莖甲醇提取物不同濃度對(duì)小菜蛾2齡中期幼蟲(chóng)發(fā)育至蛹的歷期影響不是很大，最大濃度0.2 g／mL與CK處理下幼蟲(chóng)歷期差異不顯著，相差不到1 d，但0.2 g／mL處理下的小菜蛾蛹期比其他處理明顯延長(zhǎng)，而且化蛹率和羽化率明顯降低，即濃度越高，幼蟲(chóng)的死亡率越高，0.2 g／mL時(shí)幼蟲(chóng)死亡率已達(dá)到75％。

3討論與結(jié)語(yǔ)

沙冬青莖甲醇提取物對(duì)小菜蛾幼蟲(chóng)具有生長(zhǎng)發(fā)育抑制作用。其不同濃度下的幼蟲(chóng)生長(zhǎng)變化體現(xiàn)在不同濃度下的RGR的變化。高濃度時(shí)RGR明顯比低濃度及對(duì)照低。

高濃度下幼蟲(chóng)生長(zhǎng)緩慢與低的食物消化能力、吸收能力、轉(zhuǎn)化能力有密切關(guān)系。這一點(diǎn)從食物近似消化率(AD)、食物利用率(ECI)、食物轉(zhuǎn)化率(ECD)的連續(xù)變化中看出。處理葉碟飼喂后的幼蟲(chóng)體重增加緩慢，高濃度下幼蟲(chóng)體重增加量明顯低于低濃度及對(duì)照下的幼蟲(chóng)體重增加量，幼蟲(chóng)生長(zhǎng)遲緩，而且死亡率較高。最高濃度下的幼蟲(chóng)死亡率達(dá)到了75％，而對(duì)照僅有30％。提取物濃度越高，幼蟲(chóng)死亡率也越高。即使飼喂新鮮無(wú)處理葉片，幼蟲(chóng)死亡率仍比對(duì)照明顯增加。這一結(jié)果與蔡霞等測(cè)定水葫蘆乙醇提取物對(duì)小菜蛾生長(zhǎng)發(fā)育抑制作用結(jié)果相似，表明提取物同時(shí)存在瞬時(shí)效應(yīng)和滯后效應(yīng)，這在害蟲(chóng)防治上應(yīng)受到重視。所以，做提取物對(duì)小菜蛾幼蟲(chóng)生長(zhǎng)發(fā)育影響作用試驗(yàn)時(shí)，提取物濃度應(yīng)比其他作用如拒食、胃毒、觸殺時(shí)低，這樣才能保證飼養(yǎng)過(guò)程中幼蟲(chóng)數(shù)量不至于太少，而影響測(cè)定數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。

沙冬青莖甲醇提取物雖對(duì)小菜蛾具有生長(zhǎng)發(fā)育抑制作用，但具體是哪種或哪幾種成分起作用，以哪種方式起作用還需進(jìn)一步研究。