調(diào)節(jié)性T淋巴細(xì)胞在腎細(xì)胞癌患者中的應(yīng)用

張朝華 黃研

【摘 要】調(diào)節(jié)性T細(xì)胞 （regulatory T cells，Treg）是一群通過細(xì)胞間接觸和產(chǎn)生抑制性細(xì)胞因子發(fā)揮免疫抑制作用，以調(diào)節(jié)自身T細(xì)胞為主要功能的T細(xì)胞亞群。諸多研究表明許多腫瘤的發(fā)生均和免疫低下有關(guān)。國外已在肺癌、胰腺癌、胃癌、結(jié)腸癌、卵巢癌等腫瘤患者全身以及腫瘤微環(huán)境進(jìn)行了大量研究。檢測Treg細(xì)胞的數(shù)量較正常人群居多。國內(nèi)也研究發(fā)現(xiàn)了腎癌患者調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的預(yù)后較差，但是這類病人使用免疫治療有效率顯著高于百分率水平低的和正常的患者，所以調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的研究在臨床上有著較大的臨床價(jià)值和空間。

【關(guān)鍵詞】調(diào)節(jié)性T細(xì)胞；腎癌患者；應(yīng)用

T淋巴細(xì)胞參與機(jī)體的抗腫瘤免疫應(yīng)答作用，它的亞群的數(shù)量是反映機(jī)體免疫功能的重要指標(biāo)。調(diào)節(jié)性T細(xì)胞 （regulatory T cells，Treg）是一群通過細(xì)胞間接觸和產(chǎn)生抑制性細(xì)胞因子而發(fā)揮免疫抑制作用，以調(diào)節(jié)自身得T細(xì)胞為主要功能的T細(xì)胞亞群。在眾多癌癥患者中，許多由自身T細(xì)胞識別的腫瘤相關(guān)抗原已被證實(shí)是正常的自體成分，而不是突變基因的產(chǎn)物。因此，腫瘤免疫從某種意義上來說也是一種自身免疫。諸多研究表明，在惡性腫瘤的治療中免疫因素的作用日益明顯，利用免疫治療有利于患者免疫功能的恢復(fù)，增強(qiáng)機(jī)體的抗腫瘤能力，減少腫瘤的復(fù)發(fā)，從而提高患者生存率。

腎細(xì)胞癌是腎內(nèi)最常見的惡性腫瘤，發(fā)病率占全世界惡性腫瘤2%，每年死亡超過10萬人。腎癌的發(fā)病率從1950年至今增加126%，年死亡率增加37%。由于新的影像學(xué)診斷技術(shù)的提高，50%為偶發(fā)癌，盡管這些偶發(fā)瘤一般局限在腎內(nèi)，但50%左右的患者最終發(fā)展為全身疾病。腎癌對化療和放療均不敏感，而有轉(zhuǎn)移的腎癌愈后更差，放、化療反應(yīng)率僅2%～6%，這與腎癌的生物學(xué)特性和多重耐藥有關(guān)。研究表明，免疫因素在腎癌自然消除中起非常重要的作用。而細(xì)胞因子已被證明在免疫調(diào)節(jié)中有特殊作用，外周單核細(xì)胞受激活后可以產(chǎn)生的α-干擾素，在免疫反應(yīng)的啟動(dòng)中有重要作用，若它受到抑制，α-干擾素及IL-2水平均會下降， 而后兩者在機(jī)體抗腫瘤的防御機(jī)制中是非常重要的。腎癌患者的干擾素水平均有不同程度的下降，補(bǔ)充這一類細(xì)胞因子使之在體內(nèi)維持較高水準(zhǔn)，對腫瘤的治療有這非常重要的意義。研究發(fā)現(xiàn)，以α-干擾素和IL-2為基礎(chǔ)聯(lián)合應(yīng)用5-FU治療有轉(zhuǎn)移的腎癌可明顯提高病人生存率，但增加5-FU的用量并不能增加患者的生存時(shí)間。目前對轉(zhuǎn)移腎癌使用以細(xì)胞因子為基礎(chǔ)的免疫治療反應(yīng)率15%，完全反映率5%，可明顯提高病人的生存率。因此探討腎癌免疫治療的具體機(jī)制，尋找未來的潛在治療靶點(diǎn)，對腎癌的綜合治療具有重要臨床意義。

自身反應(yīng)性T細(xì)胞與機(jī)體保護(hù)性機(jī)制建立平衡，形成自身耐受，當(dāng)機(jī)體調(diào)控出現(xiàn)一點(diǎn)偏差，自身耐受平衡就會被打破，會導(dǎo)致自身免疫失衡。所以Treg細(xì)胞對自身免疫性疾病、腫瘤免疫以及移植耐受起著重要的作用。Treg細(xì)胞在腫瘤免疫中的研究是目前的熱點(diǎn)，已在肺癌、胰腺癌、胃癌、結(jié)腸癌、卵巢癌等腫瘤患者全身以及腫瘤微環(huán)境進(jìn)行了大量研究。Sasada等[1]對149例胃癌患者及7例出現(xiàn)腹膜轉(zhuǎn)移的胃癌患者外周血中檢測Treg細(xì)胞的數(shù)量以及表型，并且與健康志愿者相比，胃癌患者外周血存在較高水平的Treg細(xì)胞，有腹膜轉(zhuǎn)移者 Treg細(xì)胞比例最高， 結(jié)論Treg細(xì)胞的數(shù)量與腫瘤預(yù)后密切相關(guān)，其數(shù)量越高，患者預(yù)后越差。Ormandy等[2]也發(fā)現(xiàn)肝癌患者外周血以及腫瘤微環(huán)境中Treg細(xì)胞數(shù)量較正常人明顯增高，而且病毒肝炎感染患者外周血中活動(dòng)期Treg細(xì)胞較恢復(fù)期明顯增高。這種Treg細(xì)胞改變了機(jī)體對于腫瘤細(xì)胞的免疫監(jiān)視，此理論可以部分解釋機(jī)體對腫瘤抗原反應(yīng)性弱的原因。

大量研究表明，腫瘤患者常處于免疫功能低下的狀態(tài)，腫瘤細(xì)胞可以產(chǎn)生逃避抗腫瘤免疫反應(yīng)的機(jī)制。正常T細(xì)胞中包含Treg細(xì)胞，可控制外周自身免疫反應(yīng)，導(dǎo)致對腫瘤的免疫耐受。Treg介導(dǎo)的免疫反應(yīng)和腫瘤生長密切相關(guān)。近些年來的實(shí)驗(yàn)證據(jù)表明，機(jī)體主要通過 Treg細(xì)胞以“主動(dòng)”的方式維持自身免疫耐受。小鼠腫瘤模型揭示Treg細(xì)胞能抑制腫瘤免疫反應(yīng)[3]，Hall等[4]發(fā)現(xiàn)在無應(yīng)答性小鼠體內(nèi)，直接去除Treg可以引起有效的抗同源腫瘤免疫反應(yīng)"。給予抗CD25單克隆抗體可引起有效的抗同源腫瘤細(xì)胞的特異性免疫反應(yīng)。去除或減少Treg細(xì)數(shù)量可以誘導(dǎo)腫瘤免疫，從而產(chǎn)生抗腫瘤免疫反應(yīng)，抑制腫瘤生長或減少腫瘤的發(fā)生[5]。由此可見，在體內(nèi)或體外去除Treg可以消除對固有腫瘤的免疫無應(yīng)答性，引起腫瘤特異性和非特異性效應(yīng)細(xì)胞自然發(fā)育，這種新的激活抗腫瘤免疫的途徑可能有助于設(shè)計(jì)有效的抗腫瘤治療方案。

目前國內(nèi)外的大量研究表明Treg細(xì)胞在腫瘤免疫方面有著廣泛的應(yīng)用前景。體外去除非腫瘤易感性小鼠脾細(xì)胞懸液中Treg細(xì)胞可引起腫瘤效應(yīng)細(xì)胞如CD8+CTL、NK、LAK細(xì)胞等分化發(fā)育，共同激發(fā)有效的腫瘤免疫，而無需抗原刺激起作用，結(jié)合了APC自身抗原肽/MHC復(fù)合物的Treg還可有效增殖，這種CD4+自身反應(yīng)性T細(xì)胞能產(chǎn)生大量IL-2，從而引起大量效應(yīng)細(xì)胞的產(chǎn)生[6]。研究還發(fā)現(xiàn)，使用已克隆出的CD8-GITRL可下調(diào)Treg的抑制作用[7]。Treg通過細(xì)胞接觸方式發(fā)揮抑制CD8+細(xì)胞的作用，并在轉(zhuǎn)錄水平抑制穿孔素、顆粒酶B及γ-干擾素的分泌，使CD8+T細(xì)胞出現(xiàn)對外界刺激的低反應(yīng)性[8]。因此不能殺滅腫瘤細(xì)胞。最近研究表明在體內(nèi)Treg細(xì)胞通過TGF-β信號來抑制CD8+T細(xì)胞的增殖和細(xì)胞毒性來抑制腫瘤免疫[9]。因此通過免疫治療恢復(fù)患者正常免疫反應(yīng)促進(jìn)細(xì)胞因子產(chǎn)生有助于誘導(dǎo)CD8+T細(xì)胞溶解靶細(xì)胞的功能。

國內(nèi)曾經(jīng)有人通過流式細(xì)胞術(shù)與免疫組化的方法研究了外周血及腫瘤組織內(nèi)Treg細(xì)胞百分率的變化對腎癌IL-2、INF-α聯(lián)合5-FU抗腫瘤免疫治療臨床療效的影響[10]。通過研究患者的術(shù)后生存率和無復(fù)發(fā)生存時(shí)間來評價(jià)。結(jié)果為外周血Treg細(xì)胞百分率水平高的患者免疫治療有效率顯著高于百分率水平低的和正常的患者。得出結(jié)論外周血Treg細(xì)胞百分率水平高的患者對IL-2、INF-α聯(lián)合5-FU抗腫瘤免疫治療的療效顯著優(yōu)于Treg細(xì)胞百分率水平低和正常的患者。所以說，外周血Treg細(xì)胞百分率水平可能作為腎癌抗腫瘤免疫治療臨床療效的預(yù)測指標(biāo)之一。

國內(nèi)有人在明確了Treg細(xì)胞在腎癌外周血及腫瘤組織中的百分率的基礎(chǔ)上，并且進(jìn)一步研究了Treg細(xì)胞與腎癌患者的預(yù)后的關(guān)系[11]。結(jié)果顯示，腎癌患者總生存時(shí)間和無復(fù)發(fā)生存時(shí)間與外周血中Treg細(xì)胞的百分率顯著相關(guān)，Treg細(xì)胞百分率水平較高者，其術(shù)后復(fù)發(fā)時(shí)間較早，總生存時(shí)間也較短，說明了患者的外周血中Treg細(xì)胞水平可能作為提示腎癌患者預(yù)后的指標(biāo)之一。

總之 腎癌與Treg細(xì)胞的關(guān)系，已經(jīng)在國內(nèi)得到了重視和研究，相信將來會有更多地人參與研究當(dāng)中去。Treg細(xì)胞的比例與腎癌發(fā)生，發(fā)展，治療和預(yù)后等諸方面，都等待的人去研究。

參考文獻(xiàn)：

[1] Sasada T， Kimura M， Yoshida Y， et al. CD4+CD25+ regulatory T cells in patients with gastrointestinal malignancies： possible involvement of regulatory T cells in disease progression [J]. Cancer， 2003， 98（5）： 1089-1099.

[2] Ormandy LA， Hillemann T， Wedemeyer H， er al. Increased populations of regulatory T cells in peripheral blood of patients with hepatocellular carcinoma [J]. Cancer Res， 20005， 65（6）： 2457-2464.

[3] Golgher D， Jones E， Powrie F， et al. Depention of CD25+ regulatory cells uncovers immune response to shared murine tumor rejection antigens[J]. Eur J Immunol， 2002， 32： 3267-3275.

[4] Hall BM. Mechanisms of induction of tolerance to organ allografts[J]. J Crit Rev Immunol， 2002， 20（4）：267-324.

[5] Yu P， Lee Y， Liu W， et al. Intratumor depletion of CD4+ cells unmasks tumor immunogenicity leading to the rejection of late-stage tumors[J]. J Exp Med， 2005， 201（5）： 779-791.

[6] Wildin RS， Smyk-Pearson S， Filipovich AH. Clinical and molecular features of the immunodysregulation， polyendocrinopathy， enteropathy， X linked IPEX） syndrome[J]. J Med Genet， 2002， 39（8）： 537-545.

[7] Kim JD， Choi BK， Bae JS， et al. Cloning and characterization of GITR ligand[J]. Genes Immunol， 2003， 4（8）： 564-569.

[8] Camara NO， Sebille F， Lechler RI. Human CD4+CD25+ regulatory cells have marked and sustained effects on CD8+ T cell activation[J]. Eur J Immunol， 2003， 33（12）： 3473-3483.

[9] Chen ML， Pittet MJ， Leonid Gl. Regulatory T cells suppress tumor-specific CD8 T cell cytotoxicity through TGF-β signals in vivo[J]. Proc Natl Acad Sci USA， 2005， 102（2）： 419-424.

[10] 張朝華 腎癌患者外周血和腫瘤組織內(nèi)TREG細(xì)胞比例與預(yù)后的關(guān)系 中國藥業(yè) 2010，18（9）；30-31

[11] 張朝華 腎癌患者外周血和腫瘤組織內(nèi)TREG細(xì)胞比例與患者術(shù)后免疫治療臨床療效的關(guān)系 中華醫(yī)學(xué)雜志 2010，117（8）；7-10.