被動顆粒凝集法檢測1890例兒童肺炎支原體抗體分析

歐靜德等

摘要目的：探討兒童肺炎支原體感染狀況。方法：對1890例兒童肺炎采用被動顆粒凝集法測定肺炎支原體抗體結(jié)果，并進行統(tǒng)計學(xué)分析。結(jié)果：兒童肺炎支原體檢測1890例，檢測陽性549例，陽性率為29.05%。其中，男童檢測1195例，陽性301例，陽性率25.19%；女童檢測695例，陽性248例，陽性率35.68%。結(jié)論：被動顆粒凝集法檢測兒童肺炎支原體抗體方法簡便，特異性強，是檢測兒童肺炎支原體有效方法。

關(guān)鍵詞兒童肺炎支原體抗體檢測

支原體是目前發(fā)現(xiàn)的能在無生命培基中生長繁殖的最小的微生物，支原體體形多樣，基本為球形，亦可呈球桿狀或絲狀[1]。支原體是兒童肺炎的重要病原體，為了解兒童肺炎支原體感染狀況，對1890例兒童肺炎采用被動顆粒凝集法測定肺炎支原體抗體結(jié)果進行分析如下。

資料與方法

一般資料：兒童肺炎支原體抗體檢測對象均為2012年1月～2012年10月在兒科門診和兒科病區(qū)就診者，行肺炎支原體檢查1890例，其中，男1195例，女695例，年齡6個月～9歲。

檢測儀器與試劑：自動振蕩混合器、移液管、平板觀測器；日本富士瑞必歐株式會社生產(chǎn)的肺炎支原體抗體檢測試劑盒。

檢測標本采集：抽取靜脈血1～2ml，血樣自然凝固后1500rpm，離心10分鐘，取血清備用。

檢測樣品要求：血清樣品中存在的紅細胞或其他有形成分應(yīng)在試驗前離心除去，以防止干擾試驗結(jié)果。

檢測方法：①試劑準備：試驗前30分鐘，用規(guī)定量的血清稀釋液復(fù)溶致敏粒子和未致敏粒子。②定量測定：用一支經(jīng)校準的滴管，向第1孔中滴加100μl，向第2～8孔（或更多）中各滴加25μl血清稀釋液。用微量移液管向第1孔中滴加25μl樣品。用加樣器或微量移液管，從第1～8孔（或更多）進行對倍稀釋。用試劑盒中提供的一支滴管向第2孔中滴加25μl未致敏粒子，用試劑盒中提供的另一支滴管向第3～8孔（或更多）各滴加25μl致敏粒子。用平板混合器徹底混合各孔中內(nèi)容物約30秒鐘，以便充分混勻。給反應(yīng)板加蓋，在室溫下（15～30℃）靜置2個小時，然后在平板觀測器上讀取凝集圖像。靜置過夜不會使圖像產(chǎn)生顯著變化。

結(jié)果判定：①陽性結(jié)果判定：樣品與未致敏粒子（最終稀釋倍數(shù)1∶20）的反應(yīng)圖像判定為（-），而與致敏粒子（最終稀釋倍數(shù)1∶40）的反應(yīng)圖像判定為（+）或（++），則結(jié)果判定為陽性。將顯示出反應(yīng)圖像為（+）時的最終稀釋倍數(shù)作為抗體滴度。②陰性結(jié)果：不論樣品與未致敏粒子呈現(xiàn)何種反應(yīng)圖像，只要與致敏粒子（最終稀釋倍數(shù)1：40）的反應(yīng)圖像顯示為（-），則結(jié)果判定為陰性。

結(jié)果

1890例兒童肺炎支原體檢測陽性549例，陽性率為29.05%。其中，男童檢測1195例，陽性301例，陽性率25.19%；女童檢測695例，陽性248例，陽性率35.68%。見表1。

討論

本調(diào)查表明，兒童肺炎支原體檢測陽性率為29.05%，表明是兒童肺炎重要的病原體。國內(nèi)文獻顧群英[2]報道，呼吸道感染患兒5640例采用體外被動凝集法檢測血清肺炎支原體抗體，陽性1805例，陽性率為32.0%。佘吉佳等[3]報道，急性呼吸道感染住院患兒中，支原體抗體檢出率達13.78%，其中冬季感染率最高達22.77%。張德文等[4]報道，1942例急性呼吸道感染患兒采用被動顆粒凝集法測定肺炎支原體抗體，陽性622例，總陽性率為32%，陽性率0～1歲組為24.1%，1～3歲組為36.9%，3～5歲組為38.1%，5～14歲為26.9%。大量文獻顯示，支原體抗體是兒童肺炎常見的病原體。

支原體是1898年發(fā)現(xiàn)，廣泛存在于污水、土壤、脊椎動物、昆蟲及人體內(nèi)，是動植物和人類的病原菌之一[5]。自1940年青霉素第一個應(yīng)用于在臨床，在臨床取得較好或顯著的療效[6]，隨著抗菌素的廣泛使用，耐藥性日漸突出，引起醫(yī)學(xué)界的關(guān)注，支原體的治療使用抗菌藥物治療，治療前要進行診斷，支原體檢測有多種方法，各種檢測都有其局限性，從選擇藥物方面來考慮，有條件的應(yīng)做支原體培養(yǎng)及藥敏，以便選擇有效抗生素以提高治療效果，但檢測時間長、復(fù)雜、病情不等人，本文采用被動顆粒凝集法檢測兒童肺炎支原體抗體方法簡便，特異性強，按明確病原體后經(jīng)驗用藥，被動顆粒凝集法檢測兒童肺炎支原體抗體是檢測兒童肺炎支原體有效方法。

參考文獻

1樂杰.婦產(chǎn)科學(xué)[M].第6版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2008：1184-1187.

2顧群英.海島地區(qū)呼吸道感染患兒肺炎支原體抗體的檢測及其流行特點[J].現(xiàn)代實用醫(yī)學(xué)，2009，21（4）：384.

3佘吉佳，嚴湘紅，劉紹坤.兒童急性呼吸道感染370例支原體抗體的檢測分析[J].國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2009，30（12）：1211-1213.

4張德文，羅興旺.被動顆粒凝集法測定肺炎支原體抗體的臨床應(yīng)用[J].國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2010，31（1）：65-66.

5周華.8145例女性生殖道支原體感染及耐藥情況分析[J].臨床合理用藥雜志，2010，3（18）：113.

6張春麗.2010年我院兒科住院患者抗菌藥物使用情況分析[J].臨床合理用藥雜志，2011，4（11）：49.