木蝴蝶種子化學(xué)成分研究

魏曉楠，林彬彬，謝國勇，李建文，秦民堅(jiān)

[摘要] 目的：研究紫葳科Bignoniaceae植物木蝴蝶Oroxylum indicum種子的化學(xué)成分。方法：采用硅膠柱色譜、Sephadex LH-20凝膠柱色譜等手段進(jìn)行分離純化，通過化合物的理化常數(shù)和波譜數(shù)據(jù)鑒定其結(jié)構(gòu)。結(jié)果：從木蝴蝶種子的95%乙醇提取物中分離并鑒定了20個(gè)化合物，分別為木蝴蝶苷A（1）、木蝴蝶苷B（2）、白楊黃素（3）、黃芩苷元（4）、槲皮素（5）、芹菜素（6）、山柰酚（7）、槲皮素-3-O-阿拉伯吡喃糖苷（8）、羽扇豆醇（9）、2α，3β-二羥基羽扇豆醇（10）、赤松素（11）、二氫赤松素（12）、膽甾-5-烯-3，7-二醇（13）、連翹環(huán)己醇（14）、異連翹環(huán)己醇（15）、zarzissine（16）、（E）-銀松素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（17）、腺苷（18）、β-谷甾醇（19）、β-胡蘿卜苷（20）。結(jié)論：化合物11～13，15～18為首次從木蝴蝶植物中分離得到，其中除化合物18外，其余6個(gè)化合物均為首次從紫葳科植物中獲得。

[關(guān)鍵詞] 木蝴蝶屬；木蝴蝶；化學(xué)成分

木蝴蝶為紫薇科木蝴蝶屬植物木蝴蝶Oroxylum indicum（L.）Vent 的成熟種子，原名千張紙，少數(shù)民族地區(qū)稱之為“三百兩銀藥”，主要分布于四川、貴州、云南、廣西、海南、廣東及福建。木蝴蝶性味苦、甘、涼，入肺、肝、胃經(jīng)。有清肺、利咽、止咳、疏肝、和胃之功效，主治肺熱咳嗽、喉痹、音啞、肝胃氣痛、瘡口不斂[1]。已有文獻(xiàn)報(bào)道指出，在木蝴蝶成熟種子中含有大量的具有生物活性的黃酮類化合物，如黃芩苷、黃芩苷元、白楊黃素、槲皮素等[2]?，F(xiàn)代藥理研究表明，木蝴蝶藥材所含有的成分具有抗微生物活性和抗炎作用，對煙曲霉、黑曲霉、念珠菌、黃曲霉等真菌有良好的抑菌活性，同時(shí)對多種致病細(xì)菌有抑制活性[3]。到目前為止對木蝴蝶的化學(xué)成分研究報(bào)道較少，藥效物質(zhì)基礎(chǔ)有待進(jìn)一步明確。為了進(jìn)一步合理利用該藥用資源，作者對木蝴蝶種子進(jìn)行了化學(xué)成分的研究，從木蝴蝶種子的95%乙醇提取物中分離并鑒定了20個(gè)化合物，其中化合物11～13，15～18為首次從木蝴蝶植物中分離得到，其中除化合物18外，其余6個(gè)化合物均為首次從紫葳科植物中獲得。

1 材料

Bruker ACF-500型核磁共振光譜儀，用TMS作內(nèi)標(biāo)。柱色譜硅膠（青島海洋化工廠）；薄層硅膠板（煙臺江友硅膠開發(fā)有限公司）；凝膠Sephadex LH-20（Pharmacia product.）；所用試劑均為分析純。

木蝴蝶種子于2011年購于安徽亳州市，經(jīng)中國藥科大學(xué)中藥資源教研室秦民堅(jiān)教授鑒定為紫葳科植物木蝴蝶O. indicum，憑證標(biāo)本（No.Wei-061203）保存于中國藥科大學(xué)中藥資源學(xué)教研室。

2 提取和分離

木蝴蝶藥材10 kg，粉碎并用95%乙醇加熱回流提取，提取3次，每次2 h，提取液回收乙醇后濃縮成浸膏（700 g），將浸膏加適量硅膠拌樣，進(jìn)行硅膠柱色譜分離，以氯仿-甲醇系統(tǒng)（100∶1～1∶1）梯度洗脫，得到的20個(gè)流分（Fr.A～T）。Fr.E經(jīng)硅膠（石油醚-乙酸乙酯40∶1～1∶1）柱色譜，Sephadex LH-20（氯仿-甲醇1∶1）柱純化得化合物9（60 mg）；Fr.F經(jīng)硅膠（石油醚-乙酸乙酯35∶1～1∶1）柱色譜、Sephadex LH-20（氯仿-甲醇1∶1）柱純化得化合物19（40 mg）；Fr.H經(jīng)硅膠（石油醚-乙酸乙酯30∶1～1∶1）柱色譜、Sephadex LH-20（氯仿-甲醇1∶1）柱純化得化合物3（50 mg）；Fr.I經(jīng)硅膠（石油醚-乙酸乙酯25∶1～1∶1）柱色譜、Sephadex LH-20（氯仿-甲醇1∶1）柱純化得化合物10（10 mg），11（12 mg），12（9 mg），13（10 mg）；Fr.G經(jīng)硅膠（石油醚-乙酸乙酯20∶1～1∶1）柱色譜、Sephadex LH-20（氯仿-甲醇1∶1）柱純化得化合物4（50 mg），5（12 mg），6（15 mg）；Fr.H經(jīng)硅膠（氯仿-甲醇25∶1～1∶1）柱色譜、Sephadex LH-20（氯仿-甲醇1∶1）柱純化得化合物20（19 mg），7（16 mg），8（10 mg），14（10 mg），15（8 mg）；Fr.I經(jīng)硅膠（氯仿-甲醇20∶1～1∶1）柱色譜、Sephadex LH-20（氯仿-甲醇1∶1）柱純化得化合物1（20 mg），16（10 mg），17（12 mg），18（10 mg），F(xiàn)r.Q經(jīng)硅膠（氯仿-甲醇8∶1～1∶1）柱色譜、Sephadex LH-20（甲醇）柱純化得化合物2（18 mg）。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1 黃色粉末；ESI-MS m/z 433[M+H]⁺ ；¹H-NMR（DMSO-d₆，500 MHz）δ： 5.01（1H，d，J=7.0 Hz，H-1″），7.02（1H，s，H-3），7.06（1H，s，H-8），7.57～7.64（3H，m，H-3′～5′），8.03～8.11（2H，dd，J=1.5，12.0 Hz，H-2′，6′），12.61（1H，s，5-OH），8.58（1H，s，6-OH）；¹³C-NMR（DMSO-d6，125 MHz）δ： 163.4（C-2），104.7（C-3），182.5（C-4），146.5（C-5），130.8（C-6），149.2（C-7），94.4（C-8），151.6（C-9），106.1（C-10），130.6（C-1′），126.3（C-2′，6′），129.1（C-3′，5′），131.9（C-4′），100.9（C-1″），73.1（C-2″），77.3（C-3″），69.7（C-4″），75.8（C-5″），60.6（C-6″）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[4]一致，鑒定為木蝴蝶苷A。

化合物2 黃色粉末；ESI-MS m/z 595[M+H]⁺；¹H-NMR（DMSO-d₆，500 MHz）δ： 4.22（1H，d，J=7.8 Hz， H-1），5.05（1H，d，J=7.5 Hz，H-1″），7.00（1H，s，H-3），7.14（1H，s，H-8），7.62（3H，m，H-3′～5′），8.10（2H，dd，J=1.9，8.1 Hz，H-2′，6′），8.51（1H，s，6-OH），12.58（1H，s，5-OH）；¹³C-NMR（DMSO-d6，125 MHz）δ： 163.5（C-2），104.5（C-3），182.5（C-4），146.3（C-5），130.7（C-6），149.2（C-7），94.3（C-8），151.4（C-9），106.1（C-10），130.4（C-1′），126.3（C-2′，6′），129.1（C-3′，5′），131.8（C-4′），103.6（C-1″），73.5（C-2″），76.8（C-3″），69.6（C-4″），75.6（C-5″），69.1（C-6″），100.8（C-1），73.1（C-2），77.1（C-3），70.2（C-4），75.6（C-5），61.1（C-6）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[4]一致，鑒定為木蝴蝶苷B。

化合物3 淡黃色粉末；ESI-MS m/z 255[M+H]⁺ ； ¹H-NMR（DMSO-d₆，300 MHz）δ： 12.82（1H，s，5-OH），10.89（1H，s，7-OH），8.07（2H，dd，J=1.3，7.5 Hz，H-2′，6′），7.65（1H，t，J=7.5 Hz，H-4′），7.57（2H，t，J=7.5 Hz，H-3′，5′），6.97（1H，s，H-3），6.22（ 1H，d，J=2.0 Hz，H-6），6.53（1H，d，J=2.0 Hz，H-8）. 以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[5]一致，鑒定為白楊黃素。

化合物4 淡黃色粉末；ESI-MS m/z 271[M+H]⁺ ； ¹H-NMR（DMSO-d6，500 MHz）δ： 12.70（1H，s，5-OH），8.06（2H，d，J=7.0 Hz，H-2′，6′），7.58（3H，d，J=7.0 Hz，H-3′～5′），6.92（1H，s，H-3），6.63（1H，s，H-8）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[6]一致，鑒定為黃芩苷元。

化合物5 黃色粉末；ESI-MS m/z 303[M+H]⁺ ； ¹H-NMR（DMSO-d6，500 MHz）δ： 12.47（1H，s，5-OH），7.67（1H，d，J=2.0 Hz，H-2′），6.88（1H，d，J=8.5 Hz，H-5′），7.54（1H，dd，J=8.5，2.0 Hz，H-6′），6.18（1H，d，J=1.7 Hz，H-6），6.40（1H，d，J=1.7 Hz，H-8）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[7]一致，鑒定為槲皮素。

化合物6 淡黃色粉末；ESI-MS m/z 271[M+H]⁺ ； ¹H-NMR（DMSO-d₆，500 MHz）δ： 12.95（1H，s，5-OH），10.54（2H，br s，7，4′-OH），7.92（2H，d，J=8.7 Hz，H-2′，6′），6.93（2H，d，J=8.7 Hz，H-3′，5′），6.77（1H，s，H-3），6.19（1H，d，J=1.8 Hz，H-6），6.48（1H，d，J=1.8 Hz，H-8）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[8]一致，鑒定為芹菜素。

化合物7 黃色針晶（甲醇）；ESI-MS m/z 287[M+H]⁺ ； ¹H-NMR（DMSO-d₆，300 MHz）δ： 12.79（1H，s，5-OH），10.27（3H，br s，3，7，4′-OH），7.92（2H，d，J=8.7 Hz，H-2′，6′），6.92（2H，d，J=8.7 Hz，H-3′，5′），6.58（1H，s，H-6），6.74（1H，s，H-8）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[9]一致，鑒定為山柰酚。

化合物8 棕黃色粉末；ESI-MS m/z 435[M+H]⁺ ； ¹H-NMR（pry-d5，300 MHz）δ： 8.35（1H，d，J=2.1 Hz，H-2′），7.26（1H，d，J=8.4 Hz，H-5′），8.13（1H，dd，J=2.1，8.4 Hz，H-6′），6.70（1H，d，J=2.1 Hz，H-6），6.67（1H，d，J=2.1 Hz，H-8），6.06（1H，d，J=5.7 Hz，Ara-H-1）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[10]一致，鑒定為槲皮素-3-O-阿拉伯吡喃糖苷。

化合物9 白色無定形粉末；ESI-MS m/z 427[M+H]⁺ ； ¹H-NMR（DMSO-d6，500 MHz）δ： 4.54（1H，s，H-29a），4.68（1H，s，H-29b）；¹³C-NMR（DMSO-d6，125 MHz）δ： 150.1（C-20），109.5（C-29），18.9（C-30），39.2（C-1），28.0（C-2），76.7（C-3），39.5（C-4），54.8（C-5），17.9（C-6），35.0（C-7），42.3（C-8），49.8（C-9），37.5（C-10），20.4（C-11），24.6（C-12），38.2（C-13），42.5（C-14），27.1（C-15），36.6（C-16），43.0（C-17），47.7（C-18），47.3（C-19），29.1（C-21），40.1（C-22），28.0（C-23），15.6（C-24），15.8（C-25），15.7（C-26），14.3（C-27），17.7（C-28）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[11]一致，鑒定為羽扇豆醇。

化合物10 白色無定形粉末；ESI-MS m/z 443[M+H]⁺；¹H-NMR（CDCl3，500 MHz） δ： 4.57（1H，s，H-29a），4.69（1H，s，H-29b），3.67（1H，m，H-2），2.97（1H，d，J=9.5 Hz，H-3）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[4]一致，鑒定為2α，3β-二羥基羽扇豆醇。

化合物11 白色粉末；ESI-MS m/z 213[M+H]⁺ ； ¹H-NMR（CDCl₃，300 MHz）δ： 7.49（2H，d，J=7.5 Hz，H-2′，6′），7.36（2H，t，J=7.5 Hz，H-3′，5′），7.25（1H，t，J=7.5 Hz，H-4′），7.02（2H，dd，J=16.3 Hz，H-α，β），6.58（2H，d，J=1.6 Hz，H-2，6），6.27（1H，s，H-4）；¹³C-NMR（CDCl₃，75 MHz）δ： 140.2（C-1），138.3（C-1′），129.6（C-α），128.7（C-β），156.9（C-3，5），127.9（C-3′，5′），106.2（C-2，6），126.6（C-2′，6′），102.3（C-4），127.8（C-4′）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[12]一致，鑒定為赤松素。

化合物12 白色粉末；ESI-MS m/z 215[M+H]⁺ ； ¹H-NMR（CDCl₃，300 MHz）δ： 7.28（2H，d，J=7.1 Hz，H-2′，6′），7.18（3H，t，J=8.9，7.6 Hz，H-3′～5′），6.24（2H，s，H-2，6），6.19（1H，s，H-4），2.85（4H，m，H-α，β）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[13]一致，鑒定為二氫赤松素。

化合物13 白色粉末；ESI-MS m/z 403[M+H]⁺ ； ¹H-NMR（CDCl₃，500 MHz）δ： 5.72（1H，s，H-6），3.62（1H，m，H-7），3.28（1H，m，H-3）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[14]一致，鑒定為膽甾-5-烯-3，7-二醇。

化合物14 白色粉末；ESI-MS m/z 161[M+H]⁺ ； ¹H-NMR（C₅D₅N，500 MHz）δ： 4.20（1H，m，H-8），3.90（1H，m，H-4）；¹³C-NMR（C₅D₅N，125 MHz）δ： 70.0（C-1），36.1（C-2），31.7（C-3），69.8（C-4），31.8（C-5），36.1（C-6），45.1（C-7），58.8（C-8）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[15]一致，鑒定為連翹環(huán)己醇。

化合物15 白色粉末；ESI-MS m/z 161[M+H]⁺ ； ¹H-NMR（C₅D₅N，500 MHz）δ： 3.90（1H，m，H-4），4.20（1H，m，H-8）；¹³C-NMR（C₅D₅N，125 MHz）δ： 71.2（C-1），34.4（C-2），31.1（C-3），67.4（C-4），31.1（C-5），34.4（C-6），43.0（C-7），58.7（C-8）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[15]一致，鑒定為異連翹環(huán)己醇。

化合物16 白色粉末；ESI-MS m/z 136[M+H]⁺ ； ¹H-NMR（DMSO-d₆，500 MHz）δ： 12.75（1H，br s，NH），8.11（1H，s，H-3），8.09（1H，s，H-6），7.04（2H，s，NH₂）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[16]一致，鑒定為zarzissine。

化合物17 淡棕色粉末；ESI-MS m/z 375[M+H]⁺ ； ¹H-NMR（CD₃OD，500 MHz）δ： 7.52（2H，d，J=7.5 Hz，H-2′，6′），7.33（2H，t，J=7.5 Hz，H-3′，5′），7.23（1H，t，J=7.5 Hz，H-4′），7.07（2H，dd，J=16.3 Hz，H-α，β），6.67（1H，s，H-2），6.49（1H，t，J=2.1 Hz，H-4），6.84（1H，s，H-6），4.90（1H，d，J=7.4 Hz，H-1″），3.93～3.44（2H，m，H-2″，6″）；¹³C-NMR（CD₃OD，125 MHz）δ： 138.7（C-1），104.7（C-2），159.7（C-3），107.4（C-4），160.5（C-5），108.8（C-6），128.6（C-7），129.7（C-8），130.1（C-1′），129.6（C-2′，6′），127.6（C-3′，5′），140.9（C-4′），102.5（C-1″），74.9（C-2″），78.1（C-3″），71.5（C-4″），78.3（C-5″），62.6（C-6″）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[17]一致，鑒定為（E）-銀松素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。

化合物18 白色粉末；ESI-MS m/z 268[M+H]⁺ ； ¹H-NMR（DMSO-d₆，500 MHz）δ： 8.34（1H，s，H-2），8.14（1H，s，H-8），5.88（1H，d，J=6.2 Hz，H-1′），7.30（2H，s，NH₂），5.41（1H，d，J=6.2 Hz，2′-OH），5.14（1H，d，J=4.7 Hz，3′-OH），5.38（1H，dd，J=4.6，7.2 Hz，5′-OH），4.61（1H，dd，J=6.1，5.2 Hz，H-2′），4.15（1H，dd，J=4.7，3.5 Hz，H-3′），3.97（1H，dd，J=3.3，3.5 Hz，H-4′），3.68（1H，m，H-5′a），3.56（1H，m，H-5′b）；¹³C-NMR（DMSO-d₆，125 MHz）δ： 156.1（C-6），152.3（C-2），149.0（C-4），139.8（C-8），119.3（C-5），87.9（C-1′），85.8（C-4′），73.4（C-2′），70.6（C-3′），61.6（C-5′）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[18]一致，鑒定為腺苷。

化合物19 白色粉末，mp 142～143 ℃，與β-谷甾醇對照品的混合熔點(diǎn)不下降。且經(jīng)TLC多種體系檢查，確定化合物19為β-谷甾醇（β-sitosterol）。

化合物20 白色粉末，mp 290～293 ℃，與β-胡蘿卜苷對照品的混合熔點(diǎn)不下降。且經(jīng)TLC多種體系檢查，確定化合物20為β-胡蘿卜苷（β-daucosterol）。

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Chemical constitunents of seeds of Oroxylum indicum

WEI Xiao-nan， LIN Bin-bin， XIE Guo-yong， LI Jian-wen， QIN Min-jian*

（Department of Resources Science of Traditional Chinese Medicines， State Key Laboratory of Natural Medicines，

China Pharmaceutical University， Nanjing 211198， China）

[Abstract] Objective： To study the chemical constituents in the seeds of Oroxylum indicum. Method： Twenty compounds were isolated and purified by silica gel， and Sephadex LH-20 column chromatography， and their structures were determined by spectroscopic analysis including NMR and MS. Result： Twenty compounds were isolated and identified as oroxin A （1），oroxin B （2）， chrysin （3）， baicalein （4）， quercetin （5）， apigenin （6）， kaempferol （7）， quercetin-3-O-ara-binopyranoside （8）， lupeol （9）， lup-20（29）-ene-2α，3β-diol （10）， pinosylvin （11）， dihydropinosylvin （12）， cholest-5-ene-3，7-diol （13）， rengyol （14）， isorengyol （15）， zarzissine （16）， （E）-pinosylvin-3-O-β-D-glucopyranoside （17）， adenosine（18）， sitosterol （19） and daucosterol （20）. Conclusion： Compounds 11-13 and 15-18 were obtained from the genus Oroxylum for the first time， and except compound 18， the remaining 6 compounds were obtained from the family Bignoniaceae for the first time.

[Key words] Oroxylum； Oroxylum indicum； chemical constitunents

doi：10.4268/cjcmm20130212

[責(zé)任編輯 孔晶晶]