自殺基因在腫瘤治療應(yīng)用中的研究進(jìn)展

楊章孺 吳敬波

自殺基因在腫瘤治療應(yīng)用中的研究進(jìn)展

楊章孺 吳敬波★

自殺基因療法是具有臨床應(yīng)用前景的新型腫瘤治療方法，也是目前腫瘤治療研究的焦點。本文就目前自殺基因在國內(nèi)外腫瘤治療中取得的成果，分別從原理、種類、旁觀者效應(yīng)、靶向治療及聯(lián)合治療等幾個方面做一綜述。

自殺基因；基因治療；惡性腫瘤

腫瘤基因治療（gene therapy）定義為將核酸轉(zhuǎn)移到腫瘤或者正常細(xì)胞，旨在通過直接殺滅細(xì)胞，免疫調(diào)節(jié)或修正錯誤的遺傳信息和消除惡性增殖狀態(tài)，使腫瘤消除。據(jù)相關(guān)統(tǒng)計數(shù)據(jù)，目前全球至少有1550種基因治療的臨床試驗（http://www.wiley. co.uk/genmed/clinical），其中7%的試驗與自殺基因治療相關(guān)。

1 自殺基因的機理

自殺基因療法（suicide gene therapy）也被稱為基因?qū)蛐悦盖绑w藥物治療（Gene Directed Enzyme Prodrug Therapy，GDEPT）或藥物的前體激活基因治療（Genetic Prodrug Activation Therapy，GPAT）。GDEPT可以采取細(xì)胞基礎(chǔ)治療（CBT）即腫瘤細(xì)胞附近的細(xì)胞被修飾以表達(dá)自殺基因或腫瘤本身表達(dá)自殺基因。通過使用腫瘤特異性調(diào)控元件（啟動子）使藥物僅在腫瘤細(xì)胞中被激活。

2 自殺基因種類

2.1 單自殺基因療法

HSV-TK/GCV及CD/5-FC是目前發(fā)現(xiàn)最早、研究最深入、應(yīng)用最廣泛的自殺基因系統(tǒng)。胸苷激酶（thymidine kinase，TK）是腺苷類似物丙氧鳥苷（ganciclovir，GCV）單磷酸化的催化劑，可促進(jìn)無毒的GCV 磷酸化成毒性三磷酸更昔洛韋（GCV-TP）。胞嘧啶脫氨酶（Cytosine Deaminase，CD）的胞嘧啶轉(zhuǎn)化為尿嘧啶，將無毒的5-氟胞嘧啶（5-FC）轉(zhuǎn)換成有毒的化合物5-氟尿嘧啶（5-FU），這兩個系統(tǒng)均是通過自殺基因激活前體藥物達(dá)到治療腫瘤的目的。此外，其他自殺基因系統(tǒng)也在不斷研究中[1~3]，如：VZVTK/BVDU；NTR/CB1954；CYP1A2/ acetaminophen；h-β-Glu/HMR1826；CPA /MTX-α- peptide；CPG2/ CMDA，PNP /f l udarabine，lis/lin。

2.2 融合自殺基因療法

由于單自殺基因系統(tǒng)治療對腫瘤細(xì)胞類型有一定依賴性，且容易導(dǎo)致腫瘤耐藥。因此在單自殺基因系統(tǒng)基礎(chǔ)上，利用基因工程技術(shù)將兩種或多種自殺基因連接，或?qū)⒆詺⒒蚺c免疫基因連接，稱為融合自殺基因療法。

2.2.1 CD- TK 融合基因

目前應(yīng)用最廣泛者為 CD -TK（Cytosine Deaminase-Thymidine Kinase）融合基因：TK/GCV 系統(tǒng)通過表達(dá)胸苷激酶將無毒前藥 GCV 磷酸化，摻入細(xì)胞DNA合成鏈并抑制 DNA聚合酶，使細(xì)胞DNA合成終止，導(dǎo)致細(xì)胞死亡； CD/5-FC 系統(tǒng)通過表達(dá)胞嘧啶脫氨酶將無毒性前藥 5-氟胞嘧啶（5-FC）脫氨轉(zhuǎn)變?yōu)橛屑?xì)胞毒性的代謝產(chǎn)物5-氟尿嘧啶（5-FU），5-FU抑制細(xì)胞DNA、RNA及蛋白質(zhì)合成而殺死細(xì)胞。因此 CD-TK 融合基因系統(tǒng)聯(lián)合應(yīng)用可能會導(dǎo)致協(xié)同作用。Luo[4]發(fā)現(xiàn)survivin驅(qū)動的GFP基因可以在胃癌細(xì)胞SCG7901內(nèi)表達(dá)，但不在正常胃上皮細(xì)胞中表達(dá)。 RT-PCR結(jié)果顯示CD-TK基因產(chǎn)物存在于感染SCG7901細(xì)胞中，但在受感染的正常胃上皮細(xì)胞中沒有表達(dá)CD-TK基因產(chǎn)物。受感染的胃癌SCG7901，對前體藥物高度敏感。CD-TK融合基因系統(tǒng)比任一單自殺基因在殺死靶細(xì)胞表現(xiàn)出更好的效果（P<0.01）。受感染的細(xì)胞接受前體藥物治療后導(dǎo)致在G0~Gl期細(xì)胞的比例增加，S期比例下降。體內(nèi)實驗顯示接種SCG7901細(xì)胞的裸鼠，雙自殺基因系統(tǒng)治療顯著抑制腫瘤的生長，表現(xiàn)出比任一單自殺基因更強的效果（P<0.01）。Kang等[5]在體外試驗發(fā)現(xiàn)，當(dāng)5-FC和GCV一起進(jìn)行處理時AF2.CD-TK細(xì)胞對MDA-MB-231人乳腺癌細(xì)胞生長抑制最強。在動物實驗中，含MDA-MB-231細(xì)胞移植瘤的BALB/c裸小鼠注射AF2.CD-TK細(xì)胞后，接受5-FC和GCV處理，腫瘤的體積和重量相比對照組明顯下降。Kojima等[6]也發(fā)現(xiàn)雙自殺基因療法對人膽管癌細(xì)胞在裸鼠模型是有效的。

2.2.2 自殺基因與免疫相關(guān)基因聯(lián)合

主要有兩種方式：第一，自殺基因與直接增強免疫功能基因聯(lián)合：Marukawa等[7]發(fā)現(xiàn)單純皰疹病毒胸苷激酶/更昔洛韋（HSV-TK/GCV）系統(tǒng)結(jié)合單核細(xì)胞趨化蛋白-1（MCP-1）基因，通過促進(jìn)巨噬細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞的聚集和激活，刺激細(xì)胞凋亡，表現(xiàn)出顯著的抗腫瘤作用。Faneca[8]也發(fā)現(xiàn)，聯(lián)合IL-12和HSV-tk基因治療小鼠乳腺腺癌與對照組相比，抗腫瘤效果更好。第二，自殺基因和沉默抑制免疫功能的基因結(jié)合，Ahn等[9]發(fā)現(xiàn)異?；罨男盘栟D(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子3（STAT3）信號與細(xì)胞增殖失控和抑制宿主免疫監(jiān)視有關(guān)。相反，沉默STAT3具有抑制癌細(xì)胞增殖和誘導(dǎo)的抗腫瘤免疫反應(yīng)的雙重影響。將Ad5.CMV.HSV.tk轉(zhuǎn)入STAT-3沉默的CT26細(xì)胞瘤中，可清楚觀察到細(xì)胞凋亡和CT26細(xì)胞腫瘤體積顯著減少，增強自殺基因療法的療效。STAT3的沉默也提高了CD3（+）CD8（+）T細(xì)胞聚集和細(xì)胞毒活性，并改變CT26腫瘤的細(xì)胞因子的表達(dá)模式，反映出抗腫瘤免疫反應(yīng)的增強。

3 旁觀者效應(yīng)研究進(jìn)展

旁觀者效應(yīng)（bystander effect，BE）獨立于細(xì)胞周期起作用。主要通過縫隙連接（gapjunctions，GJ）起作用：通過細(xì)胞之間縫隙連接，將毒性代謝物擴(kuò)散到鄰近細(xì)胞。D. Goodenough[10]證實縫隙連接交換代謝產(chǎn)物，第二信使和電信號的一個過程被稱為細(xì)胞內(nèi)間隙連接交流（GJIC）。

3.1 增強自殺基因治療旁觀者效應(yīng)研究進(jìn)展

不少研究報告都證實了旁觀者效應(yīng)的增強與連接蛋白26和連接蛋白43有關(guān)[8,9]。Ryu等[11]發(fā)現(xiàn)，丙戊酸（VPA）能誘導(dǎo)間隙連接蛋白（CX）43和26表達(dá)，從而提高其在膠質(zhì)瘤細(xì)胞的旁觀者效應(yīng)；而加入間隙連接抑制劑18-β-甘草次酸（18β-GA）處理后旁觀者效應(yīng)被抑制。Li S等[12]發(fā)現(xiàn)全反式維甲酸（ATRA）增強自殺基因療法對髓母細(xì)胞瘤的旁觀者效應(yīng)。也有研究報道ATRA 能增強對前列腺癌，卵巢癌，舌鱗癌HSV-TK/GCV系統(tǒng)治療的療效。Sun等[13]研究也證實，二丁酰環(huán)磷腺苷（DB-cAMP）上調(diào)CX43表達(dá)和細(xì)胞間隙連接通訊功能，提高了HSVTK/GCV治療 Daoy髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞旁觀者效應(yīng)。Garcia-Rodríguez等[14]建立體內(nèi)胰腺導(dǎo)管腺癌的模型觀察E-cadherin在自殺基因治療中的作用，發(fā)現(xiàn)HSV-TK+E-cad治療腫瘤可以增強旁觀者效應(yīng)。此外，E-cad表達(dá)的增加將引起bcl-2蛋白（一種抗凋亡基因）下調(diào)，增強了TK/GCV的治療效果。

4 自殺基因的靶向治療研究

靶向基因治療是指將目的基因通過載體系統(tǒng)導(dǎo)入機體,并特異性地在靶組織細(xì)胞中以可調(diào)控的方式表達(dá), 達(dá)到治療疾病的作用而不影響其他正常細(xì)胞、組織或器官的功能。

4.1 載體

載體是基因治療的關(guān)鍵。目前非病毒載體和病毒載體已廣泛應(yīng)用，非病毒類載體主要包括多聚賴氨酸或脂質(zhì)體及多聚陽離子聚合物還有DNA注射、基因槍法等。其特點是比較安全，但效率低，如脂質(zhì)體和陽離子聚合物介導(dǎo)基因轉(zhuǎn)移缺乏組織的特異性和靶向性，轉(zhuǎn)染效率較低且易被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)吞噬，基因表達(dá)時間短。病毒類載體，包括逆轉(zhuǎn)錄病毒載體、腺病毒載體、腺相關(guān)病毒載體等，其中最常用的是逆轉(zhuǎn)錄病毒載體，其次是腺病毒載體，但病毒類載體也存在潛在的致畸，突變的危險。Dong等發(fā)現(xiàn)免疫原性較強的病毒類載體，會被機體的免疫系統(tǒng)排斥，研究中觀察到靜脈注射高濃度的腺病毒載體會使肝臟發(fā)生嚴(yán)重的炎癥反應(yīng)。國內(nèi)有學(xué)者研制納米顆粒載體，具有小尺寸效應(yīng)，表面效應(yīng)，具有生物親和性，能包裹、濃縮、保護(hù)核苷酸，使其免遭核酸酶的降解；易于在其表面耦聯(lián)特異性的靶向分子，且納米顆粒在體內(nèi)的循環(huán)時間明顯長于普通大小的顆粒。

4.2 自殺基因的表達(dá)率及其靶向性

自殺基因的表達(dá)率及其靶向性是直接影響基因治療效果的因素之一，目前提高表達(dá)率，增強靶向性也是研究的重要環(huán)節(jié)。Finzi等[15]發(fā)現(xiàn)結(jié)腸癌DHDK12和HT29細(xì)胞在S期用甲氨蝶呤（Methotrexate，MTX）誘導(dǎo)，HSV-TK基因的轉(zhuǎn)導(dǎo)率分別比對照細(xì)胞高2和1.5倍。此外，在MTX誘導(dǎo)的DHDK12細(xì)胞，在GCV處理后細(xì)胞凋亡率增加了2倍。Shiozawa[16]將非人類的靈長類動物狨猴作為轉(zhuǎn)基因模型進(jìn)行臨床前研究。使用RMCE（Cre recombinase-mediated cassette exchange）將HSV-TK敲進(jìn)狨猴干細(xì)胞系（cmES）。從 cmES轉(zhuǎn)基因的腫瘤細(xì)胞被GCV有效地摧破壞。 因此，干細(xì)胞治療增加HSV-TK表達(dá)也是一種可行性方式。

4.3 自殺基因結(jié)合特異啟動子

自殺基因連接腫瘤特異性的啟動子、增強子等轉(zhuǎn)錄調(diào)控元件，能提高外源基因在腫瘤中的特異性表達(dá), 從而加強自殺基因?qū)δ[瘤細(xì)胞的殺傷力, Siegele[17]用5'-UTR結(jié)合到HSV-TK上游構(gòu)建新質(zhì)粒（HSV-UTK）有效的限制腫瘤細(xì)胞表達(dá)eIF4E，從而提高了對eIF4E表達(dá)腫瘤（包括頭頸部鱗癌）治療的靶向性。Zhang[18]發(fā)現(xiàn)在非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）中，人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶（hTERT）上調(diào)。因此， 設(shè)計了hTERT啟動子的控制TK基因載體（Ad-hTERTE1A-TK/GCV），結(jié)果表明其能有效地殺死不同類型的腫瘤細(xì)胞，是治療非小細(xì)胞肺癌一種安全和有效的方式。Siegele[17]研究結(jié)果顯示由hTERT 啟動子控制的HSV - tk基因能在肺癌細(xì)胞中選擇性表達(dá),且Ad-HSV-UTk處理的肺癌細(xì)胞對GCV敏感性比對照組高100倍。Petrigliano[19]將PSCA（Prostate Stem Cell Antigen）啟動子驅(qū)動HSV-TK基因聯(lián)合GCV治療前列腺癌，體外實驗表明僅在使用PSCA啟動子的前列腺癌細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)有熒光素酶表達(dá)，體內(nèi)實驗也證實在GCV作用下，實驗組具有特異的誘導(dǎo)細(xì)胞毒性的能力。有研究者[20]構(gòu)建了pVLTR-tk質(zhì)粒轉(zhuǎn)入EBV-LMP1（EBV-latent membrane protein 1）陽性細(xì)胞中，治療與EBV相關(guān)的腫瘤，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，和GCV作用后實驗組顯著降低細(xì)胞存活率和集落形成率，觀察到旁觀者效應(yīng)，體內(nèi)實驗中得出相似結(jié)果，證明pVLTR-TK對EBV-LMP1陽性癌細(xì)胞具有較強的靶向性。為治療EBV相關(guān)的癌提供了新的方向。Qiu[21]構(gòu)建了癌胚抗原（CEA）啟動子結(jié)合TK和CD雙自殺基因的重組質(zhì)粒（pCEA-TK/CD），研究結(jié)果表明，CEA啟動子可以專門驅(qū)動靶基因在CEA陽性肺癌細(xì)胞中表達(dá)，選擇性殺死肺癌細(xì)胞。

4.4 自殺基因?qū)δ[瘤血管靶向治療

Zhang[22]將HSV-TK基因轉(zhuǎn)入內(nèi)皮祖細(xì)胞（EPCTK）與臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞U87，U251，按不同比例混合并給予GCV治療，結(jié)果發(fā)現(xiàn)有很好的血管殺傷性。Varda-Bloom[23]研究發(fā)現(xiàn)修飾過的小鼠內(nèi)皮素原啟動子PPE-1（3X）能夠特異的在腫瘤血管床中誘導(dǎo)表達(dá)，比在正常肺組織的血管床中高35倍，證實了PPE-1（3X）調(diào)控的HSV-TK基因以腺病毒為載體，[AdPPE-1（3X）-HSV-TK]聯(lián)合GCV，能夠有效的誘導(dǎo)腫瘤特異性的壞死、凋亡和單核細(xì)胞浸潤，導(dǎo)致肺轉(zhuǎn)移灶內(nèi)新生血管大規(guī)模的破壞，抑制轉(zhuǎn)移發(fā)展。

4.5 自殺基因的靶向定植

惡性腫瘤細(xì)胞生長較快，會出現(xiàn)一定的乏氧區(qū)域，此處腫瘤細(xì)胞對化療、放療的效果均不佳。而如何利用這一乏氧區(qū)域幫助自殺基因的定植成為研究的重點。Fujimori[24]發(fā)現(xiàn)厭氧菌在乏氧區(qū)定植有兩種方式：一、厭氧細(xì)菌，如雙歧桿菌或梭狀芽孢桿菌進(jìn)入體內(nèi)后，僅在固體腫瘤處選擇性地定位，并繁殖；另一種是使用減毒沙門氏菌菌株，由于其對腫瘤特異性營養(yǎng)素的需求而選擇性地增殖的，也是一個潛在的基因傳遞系統(tǒng)。Sun[25]構(gòu)建乏氧靶向性的雙功能自殺基因CD-UPRT/5-FC，熒光顯微鏡下發(fā)現(xiàn)CDUPRTmDsRed分布在腫瘤缺氧區(qū)域，同時增強了自殺基因在體外和體內(nèi)的放射治療效果。

5 自殺基因治療與其他方法的聯(lián)合應(yīng)用

5.1 自殺基因聯(lián)合放射治療惡性腫瘤

5.1.1 單自殺基因聯(lián)合放療

Hodish等[26]在表達(dá)HSV-TK的腺病毒載體上構(gòu)建一個PPE1-3X啟動子調(diào)控的外部增效的全身性抗血管生成的基因傳遞系統(tǒng)Ad-PPE1-3x-TK，聯(lián)合放療治療轉(zhuǎn)移癌，結(jié)果提示Ad-PPE1-3x-TK在給予GCV后，在單次亞治療和無放射毒性的劑量照射后增敏作用下，帶有結(jié)腸癌腫瘤細(xì)胞CT-26的BALB /c小鼠表現(xiàn)出腫瘤生長抑制和腫瘤血管生成減少，腫瘤中心出現(xiàn)大量壞死（55%~80%）和凋亡。此外，給Lewis肺癌轉(zhuǎn)移瘤的C57BL/6小鼠靜脈注射目標(biāo)載體后，胸部接受放射治療，放射增敏作用下，激活GCV，結(jié)果證實小鼠的存活時間延長。

5.1.2 雙自殺基因聯(lián)合放療

De-Hua Wu發(fā)現(xiàn)TK，CD融合自殺基因轉(zhuǎn)入結(jié)腸癌SW480中，聯(lián)合GCV和5-FC，有放療增敏效果，且兩者聯(lián)合給藥比單獨給藥放射增敏效應(yīng)存在優(yōu)勢。Huang等[27]將CD-TK融合基因轉(zhuǎn)進(jìn)腺樣囊性癌ACC-2細(xì)胞中（ACC-2/CD-TK)，給予40 μg/mL 5-FC 和 0.1 μg/mL GCV處理48 h后，接受放療，提示ACC-2/CD-TK組放射增敏比為2.313,克隆形成率比對照組顯著的降低。而放射后給藥，實驗組和對照組的放射毒性無明顯差別。也證明自殺基因的放療協(xié)同作用和前提藥物給予的時間有關(guān)。

5.1.3 自殺基因與放射誘導(dǎo)啟動子聯(lián)合放療

一些放射誘導(dǎo)啟動子的發(fā)現(xiàn)，也提高了自殺基因治療的效果。國內(nèi)有學(xué)者[28]利用HRE（hypoxia responsive element）構(gòu)建了HRE-Egr嵌合啟動子接受放射后，含HRE啟動子的人腺癌細(xì)胞A549細(xì)胞的HSV-TK表達(dá)量比對照組細(xì)胞HSV-TK表達(dá)量高7倍，對GCV的敏感性增加55倍。Martina Anton等[29]構(gòu)建的含Egr-1（Early growth response -1）啟動子的AdEGR.TK，轉(zhuǎn)入鼠橫紋肌肉瘤，接受放射之后，也得到類似的結(jié)果，將其R1H細(xì)胞中并給于6 Gy的照射，實驗組的HSV-TK基因表達(dá)量高于對照組1.8倍。康保國等將具有放射誘導(dǎo)性的c-fos基因啟動子與誘導(dǎo)性一氧化氮合酶（iNOS）結(jié)合，也取得了滿意的結(jié)果。

5.2 自殺基因與熱療聯(lián)合應(yīng)用

Schmidt等[30]在自殺基因的上游插入熱休克蛋白70（HSP70）啟動子和EGR-1增強子，并轉(zhuǎn)染頭頸部腫瘤細(xì)胞后，給予加熱處理，通過流式細(xì)胞儀分析及免疫印跡分析，熱療組比未熱療組自殺基因的表達(dá)高 5. 83倍。Isomoto等[31]研究也得出相似結(jié)果，證實HSP-tk/GCV聯(lián)合熱療相比對照組，能更好的抑制皮下腫瘤的生長，延長腹膜轉(zhuǎn)移癌小鼠的生存時間。

5.3 自殺基因聯(lián)合溶瘤病毒

溶瘤腺病毒，也稱為條件復(fù)制型腺病毒（conditionally replicating adenovirus，CRAd），可以選擇性地在腫瘤細(xì)胞中傳播，并導(dǎo)致細(xì)胞溶解，其釋放的子代病毒可以感染相鄰癌細(xì)胞，引起級聯(lián)效應(yīng)，可導(dǎo)致腫瘤的最終破壞。Zheng等[32]設(shè)計端粒酶依賴的溶瘤腺病毒，能表達(dá)early region 1A 基因（E1A）和TK基因——（AD-ETK），結(jié)果證實AD-ETK在體外和體內(nèi)對人肝癌（HCC）均有抗腫瘤效果，且TK/GCV系統(tǒng)能增強溶瘤腺病毒的效果。

5.4 術(shù)后自殺基因聯(lián)合疫苗

Finocchiaro等[33]研究自殺基因聯(lián)合細(xì)胞因子增強的疫苗作為手術(shù)的輔助治療自發(fā)犬黑色素瘤，隨訪9年，結(jié)果證實這種手術(shù)輔助的方法，即術(shù)后局部自殺基因治療聯(lián)合皮下疫苗（由腫瘤細(xì)胞提取物與異種細(xì)胞產(chǎn)生的人白細(xì)胞介素-2和粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子的組成）的組合治療（combined treatment，CT），結(jié)合完全手術(shù)處理（complete surgery，CS）的治療方式——（CS+CT），相對于單純手術(shù)處理的對照組（ST），其局部無病生存患者的比例從13%上升到81%，而遠(yuǎn)處無轉(zhuǎn)移率由32%上升至84%。盡管局部手術(shù)處理（partial surgery，PS）聯(lián)合CT組——（PS+CT）效果稍低于CS+CT組，但是仍優(yōu)于ST組。相對于單純手術(shù)治療組（ST），CS+CT和PS+CT的總生存率分別是ST組的7倍和3倍。CS+CT組將無轉(zhuǎn)移生存率和總生存率由99天（分別為11~563天和10~568天）提高到大于2848天（分別為81~2848天和 35~2848天）。為自殺基因治療聯(lián)合免疫治療提供了鼓舞性證據(jù)。

5.5 自殺基因聯(lián)合細(xì)胞毒性基因

Chen[34]利用昆蟲細(xì)胞中內(nèi)含子剪接機制構(gòu)建含有細(xì)胞毒性的載體，（將人生長激素內(nèi)含子和猿猴病毒40大T抗原的內(nèi)含子插入白喉毒素序列，DT-A），在昆蟲細(xì)胞體內(nèi)毒性蛋白（白喉毒素）不表達(dá)，當(dāng)將實驗載體誘導(dǎo)入哺乳動物體內(nèi)后，通過內(nèi)含子拼接使毒性蛋白表達(dá)，最后引起靶細(xì)胞的凋亡，且DT-A基因的腫瘤特異性啟動子的控制下，能夠發(fā)揮腫瘤特異性細(xì)胞殺傷，為構(gòu)建細(xì)胞毒性為基礎(chǔ)的自殺基因藥物的發(fā)展提供依據(jù)。

5.6 自殺基因聯(lián)合ACT

ACT（adoptive T cell）已成為一個有前途的癌癥免疫治療方式，但ACT療法引起的嚴(yán)重毒性限制了其發(fā)展。Marin[35]利用不同的自殺基因改善ACT的安全性，研究結(jié)果表明，HSV-TK等自殺基因活化后可以有效的誘導(dǎo)T細(xì)胞的破壞，從而證實了自殺基因聯(lián)合ACT治療腫瘤可以降低ACT的毒性。

6 展望

盡管基因治療在腫瘤治療領(lǐng)域的作用日益突出，相關(guān)的基礎(chǔ)和臨床試驗也日益增多，但仍存在一些問題亟待解決，其中最大挑戰(zhàn)就是基因轉(zhuǎn)移。最理想的載體特點應(yīng)該具備非侵入性，避免退化和免疫攻擊，對宿主和環(huán)境安全，此外，還應(yīng)該只識別和攻擊靶組織，在限定的時間內(nèi)釋放治療劑量的轉(zhuǎn)化后藥物等優(yōu)點。同時，提高其靶向性和聯(lián)合治療的方式也值得進(jìn)一步的研究，以達(dá)到有效的治療結(jié)果。相信隨著腫瘤研究的不斷深入，基因治療將展現(xiàn)出其更大的生命力。

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Research progress of suicide gene in malignant tumor therapeutic application

YANG Zhangru, WU Jingbo★
(Department of Oncology, Aff i liated Hospital of Luzhou Medical College, Sichuan, Luzhou 646000, China)

Suicide gene therapy was a new cancer treatment method, the focus of current cancer treatment research, which had favorable clinical prospects. This paper mainly reviewed on the achievements of suicide gene achieved in cancer treatment at home and abroad, and discussed from principle, type, bystander effect, targeted therapy and combination therapy, respectively.

Suicide gene; Gene therapy; Malignant tumor

瀘州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院腫瘤科，四川，瀘州 646000

★通訊作者：吳敬波，E-mail:wjb6147@163.com