免疫細(xì)胞及相關(guān)細(xì)胞因子在格林－巴利綜合征和實(shí)驗(yàn)性自身免疫性神經(jīng)炎中的作用研究進(jìn)展

賁 瑩，張鳳華，張 冬

格林 －巴利綜合征(Guillain-Barre syndrome，GBS)又稱急性感染性多發(fā)性神經(jīng)炎［1］，其病理改變是周圍神經(jīng)組織中小血管周圍淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞浸潤導(dǎo)致周圍神經(jīng)炎癥及髓鞘脫失［2］，嚴(yán)重病例可出現(xiàn)繼發(fā)軸索變性。實(shí)驗(yàn)性自身免疫性神經(jīng)炎(experimental allergic neuritis，EAN)是T細(xì)胞介導(dǎo)的周圍神經(jīng)系統(tǒng)炎性脫髓鞘性自身免疫病，與GBS有相似的臨床表現(xiàn)和免疫學(xué)特點(diǎn)，是人類研究GBS的理想動物模型［3-4］。近年來，對GBS、EAN的研究主要集中在其免疫學(xué)機(jī)制上，尤其是對免疫細(xì)胞及其分泌的相關(guān)細(xì)胞因子在疾病中所起的作用研究較多。現(xiàn)對此方面的研究作一綜述。

1 Th1細(xì)胞及其細(xì)胞因子的作用

Th1細(xì)胞主要分泌γ干擾素(IFN-γ)、α干擾素(TNF-α)、白介素 2(IL-2)、IL-1β 等，介導(dǎo)免疫應(yīng)答。在EAN和GBS的周圍神經(jīng)組織中有大量Th1細(xì)胞浸潤，促進(jìn)炎癥發(fā)生、發(fā)展。

1.1 IFN-γ IFN-γ主要由Th1細(xì)胞分泌，現(xiàn)發(fā)現(xiàn)其免疫功能主要有:①激活巨噬細(xì)胞，使其產(chǎn)生自由基，導(dǎo)致髓鞘磷脂損傷。②增強(qiáng)毛細(xì)血管通透性，吸引T細(xì)胞向周圍神經(jīng)系統(tǒng)移行、浸潤。③上調(diào)細(xì)胞間黏附分子1(ICAM-1)在T細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和血旺細(xì)胞表面表達(dá)，誘導(dǎo)血旺細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞和巨噬細(xì)胞主要組織相容性復(fù)合物Ⅱ類抗原(major histocompatibility complex classⅡ，MHC-Ⅱ)的表達(dá)。④刺激血旺細(xì)胞提呈外源P2蛋白給P2特異性T細(xì)胞。⑤誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞、血旺細(xì)胞表達(dá)iNOS mRNA，加速一氧化氮(NO)的產(chǎn)生。⑥促進(jìn)IL-2、IL-1β、腫瘤壞死因子α(TNF-α)等的產(chǎn)生，并與其有協(xié)同的促炎作用。Zhu等［5］研究發(fā)現(xiàn)，GBS患者急性期血清檢測，IFN-γ水平顯著升高，一般為IL-4的2～3倍。Wu等［6］發(fā)現(xiàn)在 EAN鼠淋巴結(jié)、脾臟中產(chǎn)生IFN-γ水平與EAN病情程度大致呈平行關(guān)系，并且在疾病開始前在脾臟以及淋巴結(jié)已發(fā)現(xiàn)有IFN-γ mRNA表達(dá)的T細(xì)胞，提示IFN-γ是EAN發(fā)病的關(guān)鍵因素。

1.2 TNF-α Th1細(xì)胞、巨噬細(xì)胞分泌 TNF-α。其免疫功能為:①激活巨噬細(xì)胞，上調(diào)iNOS特異性mRNA在血旺細(xì)胞表達(dá)，促進(jìn)NO釋放［7］。②刺激T細(xì)胞、血旺細(xì)胞分泌 IL-6、IL-2、IFN-γ 等淋巴因子，并與他們產(chǎn)生協(xié)同作用，促進(jìn)炎癥發(fā)展。Radhakrishnan等［8］檢測到急性期GBS患者血清及腦脊液中TNF-α水平顯著增高，并與疾病嚴(yán)重程度密切相關(guān)。Radhakrishnan等［9］研究顯示，未經(jīng)治療的GBS患者血清TNF-α水平較對照組高。經(jīng)過靜脈注射免疫球蛋白或血漿置換治療后，血清TNF-α的含量大幅度下降。TNF-α注射于鼠坐骨神經(jīng)引起軸索變性，同抗髓磷脂的抗體一起注射，引起血管周圍神經(jīng)纖維脫髓鞘，但單獨(dú)大劑量TNF-α的注射未引起 脫 髓 鞘［10］。Weishaupt 等［11］認(rèn) 為 TNF-α 在EAN發(fā)病中的作用可能與誘導(dǎo)T細(xì)胞、施萬細(xì)胞凋亡有關(guān)。

1.3 IL-1β IL-1β是早期的促炎細(xì)胞因子。Th1細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、血旺細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞(NK)均能分泌IL-1β。由于巨噬細(xì)胞移行、浸潤EAN和GBS的周圍神經(jīng)系統(tǒng)，所以巨噬細(xì)胞是周圍神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)IL-1β的主要來源［12］。其作用為:①促進(jìn)血旺細(xì)胞增殖，刺激巨噬細(xì)胞和血旺細(xì)胞分泌TNF和IL-6。②和TNF-α協(xié)同作用使ICAM-1分泌增加，并且促進(jìn)蛋白酶的釋放［13］。③IL-1β還可增加T細(xì)胞表面MHC-Ⅱ類抗原的表達(dá)。在EAN大鼠臨床癥狀出現(xiàn)前就已經(jīng)在其淋巴結(jié)和坐骨神經(jīng)中檢測到IL-1β mRNA的表達(dá)。因此，在EAN的自身免疫反應(yīng)中IL-1β可能起到了啟動因子的作用。

2 Th17細(xì)胞及其細(xì)胞因子的作用

Th17細(xì)胞是新發(fā)現(xiàn)的不同于Th1細(xì)胞和Th2細(xì)胞的新型CD4+輔助性T細(xì)胞亞群，其在固有免疫和適應(yīng)性免疫中均發(fā)揮重要作用，通過分泌IL-17A/F、IL-22、IL-6、TNF-α、集落刺激因子等炎癥相關(guān)細(xì)胞因子參與自身免疫，并在誘導(dǎo)自身免疫的組織損害及炎癥過程中起著決定性的作用。Th17細(xì)胞分泌的IL-17具有促炎作用，能誘導(dǎo)促炎細(xì)胞因子(如 IL-6、TNF)、趨化因子(如 MCP1和 MIP2)和基質(zhì)金屬蛋白酶的表達(dá)，刺激NO和前列腺素E2的產(chǎn)生，引起組織細(xì)胞浸潤和組織破壞。IL-17還能增加ICAM-1表達(dá)，對T細(xì)胞的活化起協(xié)同刺激作用，并能促進(jìn)樹突狀細(xì)胞的成熟［14-15］。最近，Maurer等［16］研究發(fā)現(xiàn)，主要分泌 IL-17的 Th17細(xì)胞在受EAN侵襲的坐骨神經(jīng)的血管周圍聚集，提示Th17細(xì)胞參與了EAN病理過程的進(jìn)展。IL-17基因缺陷小鼠誘導(dǎo)產(chǎn)生的EAN臨床癥狀明顯減輕，組織病理學(xué)變化減輕，并更加容易緩解［17］，抗IL-17抗體可以使EAN癥狀明顯減輕［18］。

3 Foxp3+Treg細(xì)胞及其細(xì)胞因子的作用

Foxp3+Treg細(xì)胞是不同于Th1和Th2的具有調(diào)節(jié)功能的T細(xì)胞群體，具有免疫抑制功能，在多種免疫性疾病中起重要的調(diào)節(jié)作用?；罨腇oxp3+Treg細(xì)胞主要通過細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞抗原4(CTLA-4)傳遞抑制信號，以接觸抑制的方式抑制T細(xì)胞的活化和增殖。另外，F(xiàn)oxp3+Treg細(xì)胞能夠預(yù)防過度的炎性反應(yīng)和(或)自身免疫，從而致免疫耐受和免疫穩(wěn)態(tài)［19］，其可分泌細(xì)胞因子IL-10和β型轉(zhuǎn)化生長因子(TGF-β)抑制免疫反應(yīng)。TGF-β可從以下3個方面對免疫功能起抑制作用:①抑制免疫效應(yīng)細(xì)胞的增殖。②抑制免疫效應(yīng)細(xì)胞的分化和活性。③抑制細(xì)胞因子的產(chǎn)生及其免疫調(diào)節(jié)作用。在EAN臨床癥狀發(fā)生前或到疾病活動早期或高峰期EAN大鼠的坐骨神經(jīng)中沒有Foxp3+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞聚集。與此相對比的是在EAN恢復(fù)期發(fā)現(xiàn)了Foxp3+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞在坐骨神經(jīng)中的積聚，提示其作用是抑制炎癥，使EAN消退［16］。用髓鞘堿性蛋白、P2蛋白或P0蛋白培養(yǎng)EAN的脾細(xì)胞，檢測發(fā)現(xiàn)其TGF-β mRNA的表達(dá)增加，且在臨床恢復(fù)期時(shí) TGF-β mRNA 的表達(dá)最高。Creange等［20］對GBS患者血清中的TGF-β進(jìn)行了檢測發(fā)現(xiàn)，其含量明顯高于非炎性神經(jīng)系統(tǒng)疾病和健康對照組。在GBS患者即將進(jìn)入恢復(fù)期前TGF-β含量最高，在恢復(fù)期TGF-β含量有所下降，但仍明顯高于非炎性神經(jīng)系統(tǒng)疾病和健康對照組。TGF-β含量的增加和恢復(fù)期的時(shí)間相關(guān)性提示，TGF-β在疾病的全過程中起著控制炎性反應(yīng)，促進(jìn)組織修復(fù)的作用。

GBS和EAN中由細(xì)胞免疫參與的自身免疫過程對疾病的發(fā)生、進(jìn)展和轉(zhuǎn)歸起著決定性作用。在臨床癥狀的發(fā)展期、高峰期主要以Th1、Th17細(xì)胞及其分泌的促炎細(xì)胞因子如 IFN-γ、TNF-α、IL-1β、IL-17等占優(yōu)勢，而在恢復(fù)期以Foxp3+Treg細(xì)胞及其分泌的抑炎細(xì)胞因子TGF-β等為主。因此在該病的藥物治療中，應(yīng)探索能促進(jìn)Foxp3+Treg細(xì)胞的分化，或增加抑炎細(xì)胞因子表達(dá)的藥物，這將為GBS的治療開拓條新的思路。

［1］孫蘭萍.血清髓鞘脂抗體水平的測定對診斷格林－巴利綜合癥的意義［J］.航空航天醫(yī)學(xué)雜志，2011，22(4):483-484.

［2］張跟平.格林－巴利綜合癥患者血漿置換與IVIG治療效果對比分析［J］.醫(yī)學(xué)信息，2010(4):845-846.

［3］楊孫鳳，李淮玉.sTNFR1對EAN治療作用的免疫學(xué)和組織病理學(xué)研究［J］.安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2009，44(2):197-200.

［4］楊歡，李慶華，胡玨，等.從Th1、Th17細(xì)胞極化探討iMDC負(fù)載P258-73肽段干預(yù)EAN的機(jī)制［J］.中風(fēng)與神經(jīng)疾病雜志，2009，26(3):260-265.

［5］Zhu W，Mix E，Nennesmo I，et al.Anti-cytokine autoantibodies in experimental autoimmune neuritis in Lewis rats［J］.Exp Neurol，2004，190(2):486-494.

［6］Wu Y，Wang H，Wang W，et al.A study of associated cell-mediated immune mechanisms in experimental autoimmune neuritis rats［J］.J Neuroimmunol，2007，185(1-2):87-94.

［7］Hafer Macko C E，Sheikh K A，Li C Y，et al.Immune attack on the Schwann cell surface in acute inflammatory demyelinating polyneuropathy［J］.Ann Neurol，1996，39(5):625-635.

［8］Radhakrishnan V V，Sumi M G，Reuben S，et al.Circulating tumour necrosis factor alpha＆soluble TNF receptors in patients with Guillain-Barre syndrome［J］.Indian J Med Res，2003，117:216-220.

［9］Radhakrishnan V V，Sumi M G，Reuben S，et al.Serum tumour necrosis factor-alpha and soluble tumour necrosis factor receptors levels in patients with Guillain-Barre syndrome［J］.Acta Neurol Scand，2004，109(1):71-74.

［10］Di Marco R，Khademi M，Wallstrom E，et al.Amelioration of experimental allergic neuritis by sodium fusidate(fusidin):suppression of IFN-gamma and TNF-alpha and enhancement of IL-10［J］.J Autoimmun，1999，13(2):187-195.

［11］Weishaupt A，Bruck W，Hartung T，et al.Schwann cell apoptosis in experimental autoimmune neuritis of the Lewis rat and the functional role of tumor necrosis factor-alpha［J］.Neurosci Lett，2001，306(1-2):77-80.

［12］Murwani R，Armati P.Peripheral nerve fibroblasts as a source of IL-6，TNF-alpha and IL-1 and their modulation by IFN-gamma［J］.J Neurol Sci，1998，161(2):99-109.

［13］Tissi L，Puliti M，Barluzzi R，et al.Role of tumor necrosis factor alpha，interleukin-1 beta，and interleukin-6 in a mouse model of group B streptococcal arthritis［J］.Infect Immun，1999，67(9):4545-4550.

［14］Bettelli E，Korn T，Oukka M，et al.Induction and effector functions of T(H)17 cells［J］.Nature，2008，453(7198):1051-1057.

［15］Dong C.TH17 cells in development:an updated view of their molecular identity and genetic programming［J］.Nat Rev Immunol，2008，8(5):337-348.

［16］Maurer M，Toyka K V，Gold R.Cellular immunity in inflammatory autoimmune neuropathies［J］.Rev Neurol(Paris)，2002，158(12 Pt 2):S7-S15.

［17］Komiyama Y，Nakae S，Matsuki T，et al.IL-17 plays an important role in the development of experimental autoimmune encephalomyelitis［J］.J Immunol，2006，177(1):566-573.

［18］Weaver C T，Hatton R D，Mangan P R，et al.IL-17 family cytokines and the expanding diversity of effector T cell lineages［J］.Annu Rev Immunol，2007，25:821-852.

［19］Tang Q，Bluestone J A.The Foxp3+regulatory T cell:a jack of all trades，master of regulation［J］.Nat Immunol，2008，9(3):239-244.

［20］Creange A，Belec L，Clair B，et al.Circulating transforming growth factor beta 1(TGF-beta1)in Guillain-Barre syndrome:decreased concentrations in the early course and increase with motor function［J］.J Neurol Neurosurg Psychiatry，1998，64(2):162-165.