氣相色譜—質(zhì)譜聯(lián)用測定廣西不同產(chǎn)地磨盤草的揮發(fā)油成分

陳勇 魏后超 農(nóng)莉 李怡萱 劉鼎

磨盤草，又名金花草、唐擋草，耳響草等，系錦葵科苘麻屬植物磨盤草Abutilonindicum(L.) Sweet 的全草。曾收載于《生草藥性備要》、《嶺南采藥錄》、《全國中草藥匯編》、《廣西本草選編》、《桂本草》等文獻(xiàn)[1]。國外主產(chǎn)于巴基斯坦、印度等地，國內(nèi)多分布于廣西、廣東、福建、臺灣、海南、貴州、云南、新疆等地。本品甘，淡，性涼，歸肺，腎經(jīng)。具有疏風(fēng)清熱、益氣通竅、祛痰利尿等功效，用于感冒高燒不退，流行性腮腺炎、淋病、耳鳴耳聾、疝氣癰腫等癥[2]。國內(nèi)目前對該藥材已經(jīng)作了生藥學(xué)、理化鑒別和化學(xué)成分的研究[3-6],藥理研究主要集中在抗炎利尿方面[7]，尚未見對其質(zhì)量控制方面的研究。本實(shí)驗(yàn)采用氣相色譜-質(zhì)譜(Gas Chromatograph-Mass Spectrometer-computer,GC- MS)聯(lián)用技術(shù)對廣西不同產(chǎn)地磨盤草全草中的揮發(fā)油化學(xué)成分進(jìn)行了分析比較研究，為擴(kuò)大磨盤草藥用資源，提高資源利用率，以及藥材的質(zhì)量控制等方面提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 藥材

磨盤草藥材，分別采收于3個不同產(chǎn)地，經(jīng)廣西中醫(yī)藥大學(xué)藥物分析教研室陳勇教授鑒定為錦葵科苘麻屬植物磨盤草Abutilonindicum(L.)Sweet 的干燥全草。

表1 三種磨盤草樣品的來源

1.2 儀器

Agilent 6890N/5973NGC-MS聯(lián)用儀，美國Agilent公司；色譜柱HP-5MS(5% Phenyl Methyl Siloxane, 30 m×0.25 mm×0.25μm)彈性石英毛細(xì)管柱；揮發(fā)油提取器。

1.3 試劑

蒸餾水，正丙醇，無水硫酸鈉。

1.4 揮發(fā)油成分的提取

根據(jù) 2010 年版《中華人民共和國藥典(一部)》(附錄)XD揮發(fā)油測定法[8]，分別取廣西不同產(chǎn)地的磨盤草干燥全草，粉碎。各取200 g，置于2000 ml圓底燒瓶中，加入蒸餾水至燒瓶1/2處，用揮發(fā)油提取器提取6小時，分別得到有淡黃色油狀物少許，用正丙醇溶解，加入少量無水硫酸鈉，備用。

1.5 揮發(fā)油成分的GC-MS分析

1.5.1 GC-MS分離分析條件 色譜條件: HP-5MS(5% Phenyl Methyl Siloxane, 30 m×0.25 mm×0.25 μm)彈性石英毛細(xì)管柱；載氣為高純氦氣，流速：

1 ml/min；進(jìn)樣口溫度：250℃；電離方式：EI源；電子能量：70 eV；離子源溫度：230℃；發(fā)射電流：0.25 mA；質(zhì)量分析器：四極桿，溫度150℃；質(zhì)量掃描范圍:30～500 amu。

1.5.2 磨盤草揮發(fā)油成分分離的升溫程序 揮發(fā)油樣品液分別取1.0 μl注入儀器， 分流比為20∶1，升溫過程為：80℃保持5分鐘，以10℃/min的速度升溫至200℃，保持1分鐘，再以5℃/min的速度升溫至250℃，保持3分鐘。

1.5.3 樣品的分析 經(jīng)氣相色譜分離分析得到的組分，用峰面積歸一化法測定各組分的百分含量，并檢測其成分的GC-MS總離子流色譜，通過美國國家標(biāo)準(zhǔn)與技術(shù)研究所譜庫(National Insititute of Standards and Technology，NIST02)檢索，并結(jié)合有關(guān)文獻(xiàn)譜圖分析所得質(zhì)譜圖，利用各峰的質(zhì)譜裂片圖與文獻(xiàn)資料進(jìn)行比對。

2 結(jié)果

分別從磨盤草1號藥材揮發(fā)油中分離分析出31個組分，鑒定出17個化合物(占揮發(fā)油總質(zhì)量的98.50%)，2號藥材揮發(fā)油中分離分析出24個組分，鑒定出15個化合物(占揮發(fā)油總質(zhì)量的98.98%)，3號藥材揮發(fā)油中分離分析出38個組分，鑒定出26個化合物(占揮發(fā)油總質(zhì)量的95.86%)。其中共有成分主要有2-十五烷酮-6,10,14-三甲基，棕櫚酸，植物醇，油酸酰胺，二十四烷，正二十五烷，分析和鑒定結(jié)果見圖1～3和表2～4。

圖1 廣西博白產(chǎn)磨盤草揮發(fā)油的總離子色譜

圖2 廣西南寧產(chǎn)磨盤草揮發(fā)油的總離子色譜

圖3 廣西玉林產(chǎn)磨盤草揮發(fā)油的總離子色譜

峰號分子式分子量名稱保留時間(min)百分含量(%)1C9H18O2158正壬酸Nonanoicacid9 560 562C11H20O2184反?2?十一烯酸t(yī)rans?2?undecenoicacid11 490 423C18H38254正十八烷Octadecane13 290 804C27H56380正二十七烷Heptacosane13 380 235C12H24O2200正十二烷酸dodecanoicacid13 500 366C14H28O2228十四酸Tetradecanoicacid15 872 187▲C18H36O2682?十五烷酮?6，10，14?三甲基2?Pentadecanone，6，10，14?trimethyl?17 053 998C15H30O2242十五烷酸Pentadecanoicacid17 200 569C18H30O262法尼基丙酮5，9，13?Pentadecatrien?2?one，6，10，14?trimethyl?，(E，E)?18 150 9210C16H30O2254(Z)?7?十六烯酸Z?7?Hexadecenoicacid18 400 55

續(xù)表

注：標(biāo)示有▲的為三地共有的成分

表3 廣西南寧產(chǎn)磨盤草揮發(fā)油鑒定表

注：標(biāo)示有▲的為三地共有的成分

表4 廣西玉林產(chǎn)磨盤草揮發(fā)油鑒定表

續(xù)表

注：標(biāo)示有▲的為三地共有的成分。

3 討論

廣西博白產(chǎn)磨盤草的揮發(fā)油中含有主要化學(xué)成分為棕櫚酸(49.38%)，9,12,15-Octadecatrienal(13.88%)，植物醇(13.15%)，亞油酸(10.47%)。廣西南寧產(chǎn)磨盤草的揮發(fā)油中含有主要化學(xué)成分為植物醇(73.89%)，棕櫚酸(7.22%)，2-十五烷酮-6,10,14-三甲基(7.10%)。廣西玉林產(chǎn)磨盤草的揮發(fā)油中含有主要化學(xué)成分為植物醇(32.40%)，2-十五烷酮-6,10,14-三甲基(10.53%)，油酸酰胺(6.49%)。由上可見，三個產(chǎn)地的磨盤草的揮發(fā)油中含有主要化學(xué)成分是有很大差異的。

三個產(chǎn)地的磨盤草的揮發(fā)油的共有成分為植物醇，棕櫚酸，2-十五烷酮-6,10,14-三甲基，油酸酰胺，二十四烷，正二十五烷，但各化合物的相對含量差異較大，如植物醇，在三個產(chǎn)地的磨盤草揮發(fā)油中的相對含量分別為13.15%、73.89%、32.40%。

對于揮發(fā)性成分和脂溶性、分子質(zhì)量小等物質(zhì)的提取分離，超臨界二氧化碳流體提取法為目前最先進(jìn)的方法之一，它能防止對熱不穩(wěn)定的成分被破壞和逸散，前期曾做過超臨界二氧化碳流體提取，與本實(shí)驗(yàn)水蒸氣提取法相比差異較大。采用超臨界二氧化碳流體萃取法提取磨盤草揮發(fā)油成分與本實(shí)驗(yàn)揮發(fā)油成分研究有所不同，其原因可能是藥材產(chǎn)地及提取工藝不同。本方法可供磨盤草藥材的成分分析及質(zhì)量控制提供實(shí)驗(yàn)參考。

一般新鮮全草類藥材的揮發(fā)油含量較高，能比較有代表性的說明磨盤草的揮發(fā)油成分，因此揮發(fā)油成分的研究應(yīng)注意藥材的不同采收期和不同產(chǎn)地的區(qū)別，在今后的研究工作中，可對不同采收期和不同產(chǎn)地磨盤草藥材的揮發(fā)油成分進(jìn)行分析和比較。本文選自三個不同產(chǎn)地的磨盤草進(jìn)行研究，成分分析鑒定的結(jié)果不盡相同，可能與各地氣候條件、土壤狀況、緯度、海拔高度、日照強(qiáng)度、栽培條件和采集季節(jié)等因素有關(guān)。由于不同產(chǎn)地藥材揮發(fā)油成分及含量存在差異，可作為不同產(chǎn)地該藥材品種及產(chǎn)地的鑒別依據(jù)。

[1] 國家中醫(yī)藥管理局《中華本草》編委會. 中華本草(第十四卷)[M]. 上?？茖W(xué)技術(shù)出版社,1999：335-336.

[2] 廣西壯族自治區(qū)衛(wèi)生廳. 廣西中藥材標(biāo)準(zhǔn)(1990年版)[M]. 廣西科學(xué)技術(shù)出版社,1992：94；295.

[3] 姜建平,廖月葵,林安平,等. 磨盤草的生藥鑒定[J]. 長春中醫(yī)學(xué)院學(xué)報,2006,16(2)：53-54.

[4] 劉娜,賈凌云,孫啟時. 中藥磨盤草的化學(xué)成分[J]. 沈陽藥科大學(xué)學(xué)報,2009,26(3)：96-197.

[5] 陳勇,楊晨,魏后超,等. 磨盤草化學(xué)成分研究[J]. 時珍國醫(yī)國藥,2010,21(9)：2245-2246.

[6] 陳勇,楊晨,魏后超,等. 磨盤草揮發(fā)油化學(xué)成分的 GC-MS分析[J]. 中國民族民間醫(yī)藥,2009，25-26.

[7] 陳勇,楊晨,魏后超,等. 磨盤草藥材醇提物抗炎、利尿作用實(shí)驗(yàn)研究[J]. 亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥,2009,5(12)：19-21.

[8] 國家藥典委員會. 中華人民共和國藥典(一部)[S]. 北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2010：附錄XD 63.