電針胃脘下俞對(duì)2型糖尿病模型大鼠血糖及血脂影響的實(shí)驗(yàn)研究

武燕 李瑞 田環(huán)環(huán) 高珊 裴恩實(shí) 楊萍 袁紅

胃脘下俞，別名胰俞，屬經(jīng)外奇穴，古稱(chēng)胃管下俞、胃下俞、內(nèi)胰俞等，位于第8胸椎棘突下旁開(kāi)1.5寸，具有和胃化痰、理氣止痛的作用，主治消渴、咽喉干等。在選穴方面，《千金翼方》就有消渴喉嚨干，灸胃管下俞的記載，把胃管下俞作為治療糖尿病的重要穴位。古代醫(yī)家選用針刺胃脘下俞或梅花針叩擊脊柱第8至第10胸椎兩側(cè)部位，以從陽(yáng)引陰，使陰陽(yáng)平衡，對(duì)陰虛內(nèi)熱的消渴有良好的治療作用[2-3]。

瘦素(Leptin)作為一種脂肪細(xì)胞產(chǎn)生的激素，被臨床用于反映肥胖、高血壓、糖尿病病程的一個(gè)指標(biāo)。瘦素的主要功能是引起食欲降低和能量消耗從而減輕體重[3]，這種功能是Leptin作用于下丘腦的體重調(diào)節(jié)中樞，與瘦素受體( Leptin receptor，Leptin R) 結(jié)合而發(fā)揮的。瘦素能調(diào)節(jié)機(jī)體脂肪的穩(wěn)定[4]，它被認(rèn)為向神經(jīng)中樞提供了營(yíng)養(yǎng)狀況和脂肪堆積信息，從而調(diào)整飲食、行為、食欲和能量消耗[5-6]。

針灸具有調(diào)節(jié)人整體生理功能，調(diào)節(jié)神經(jīng)-內(nèi)分泌-免疫網(wǎng)絡(luò)的作用，具體表現(xiàn)為機(jī)體接受針灸的刺激信號(hào)后促進(jìn)神經(jīng)肽類(lèi)、乙酰膽堿類(lèi)、氨基酸等多種神經(jīng)遞質(zhì)的釋放及調(diào)節(jié)腎上腺皮質(zhì)激素、胰島素、生長(zhǎng)激素等的分泌，通過(guò)針刺對(duì)胰島素分泌的影響從而可以調(diào)節(jié)胰腺功能[7]。為此，課題組選用電針大鼠“胃脘下俞”穴的方法，想進(jìn)一步探索驗(yàn)證“胃脘下俞”穴對(duì)2型糖尿病大鼠的降糖作用以及與瘦素的關(guān)系，以期為2型糖尿病的針灸臨床治療增加實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 糖尿病大鼠造模

選用體重為(100+10) g的4周齡雄性清潔級(jí)Wistar大鼠35只[購(gòu)于北京斯貝福公司，批號(hào)SCXK(京)2011-0004]，隨機(jī)分為空白對(duì)照組9只，2型糖尿病造模組26只。適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后，利用高脂高糖飼料(按1.5%膽固醇、0.25%膽酸鈉、10%豬油、5%蔗糖、83.25%基礎(chǔ)飼料配制，北京科澳協(xié)力飼料有限公司提供)連續(xù)喂養(yǎng)4周，于最末一天禁食12小時(shí)，將鏈脲佐菌素(STZ)溶于0.1 mmol/L檸檬酸鈉-檸檬酸緩沖液中(pH值=4.1,在冰浴中新鮮配制),按35 mg/kg劑量腹腔注射誘導(dǎo)2型糖尿病的大鼠模型，72小時(shí)后以空腹血糖值≥11.1 mmol/L[8-9]者為造模成功。造模過(guò)程中，其中5只血糖未達(dá)標(biāo)準(zhǔn)而剔除，1只由于血糖過(guò)高而死亡，共成模20只。

1.2 分組與治療

空白對(duì)照組9只，造模成功的大鼠隨機(jī)分為模型組和電針治療組各10只。電針治療組取雙側(cè)“胃脘下俞”(參照石學(xué)敏等[10]編訂的《實(shí)驗(yàn)針灸學(xué)》)，將大鼠固定于自制鼠袋中，將穴位用75%的酒精棉球消毒后用針灸針(中研太和牌，無(wú)錫佳健醫(yī)療器械有限公司生產(chǎn)，0.22×13 mm)直刺，進(jìn)針深度約4～6 mm。針柄接通英迪KWD-808型電針儀(單側(cè)胃脘下俞及臀部“非穴”各連一對(duì)電極)，連續(xù)波，頻率15 Hz，電流強(qiáng)度4～6 mA左右，以引起大鼠肌肉輕微抖動(dòng)而不嘶叫為宜，留針20分鐘/次，1次/日，5日/周，連續(xù)4周。

1.3 指標(biāo)的測(cè)定及方法

空腹血糖：治療前后禁食過(guò)夜12小時(shí)，將大鼠尾尖消毒后快速點(diǎn)刺，用羅氏快速血糖儀及配套試紙測(cè)血糖。

血清瘦素：末次治療后禁食過(guò)夜12小時(shí)，以1%戊巴比妥鈉按40 mg/kg麻醉后腹主動(dòng)脈取血，靜置20分鐘后離心，收集血清將其保存于-80℃冰箱中待測(cè)瘦素。采用Elisa試劑盒，按試劑盒使用說(shuō)明進(jìn)行操作。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1 治療前后各組大鼠空腹血糖值比較

治療前空白對(duì)照組與模型組、電針組的空腹血糖相比，差異顯著均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，說(shuō)明造模成功。模型組與電針組的空腹血糖值比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，說(shuō)明兩組來(lái)自同一大樣本。

治療4周后，電針組的空腹血糖值顯著下降，接近空白對(duì)照組水平，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，而與模型組相比(P<0.05)具有顯著差異，說(shuō)明電針組降糖效果明顯。見(jiàn)表1。

表1 針灸治療前后各組大鼠空腹血糖值

注：與空白對(duì)照組對(duì)比aP<0.05；與模型組對(duì)比bP<0.05(下同)

2.2 治療后各組大鼠血脂水平比較

治療4周后，電針組的血清瘦素值顯著降低，接近空白對(duì)照組水平，與空白對(duì)照組相比P=0.529(P>0.05)，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而與模型組相比，血清瘦素水平明顯降低P=0.029(P<0.05)具有顯著差異，說(shuō)明電針組通過(guò)電針對(duì)大鼠“胃脘下俞”的刺激后能有效改變血清瘦素含量。模型組與空白對(duì)照組相比，血清瘦素水平顯著升高，P=0.008(P<0.05),差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。這一結(jié)果提示，瘦素與2型糖尿病的發(fā)病可能有一定關(guān)聯(lián)，這與部分文獻(xiàn)報(bào)道一致[11-12]。電針組的甘油三酯(TG)顯著降低，接近空白對(duì)照組水平，但與空白對(duì)照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P=0.043(P<0.05)，而與模型組相比，TG水平明顯降低P=0.009(P<0.01)具有顯著差異；電針組高密度脂蛋白(HDL-C)有所升高，接近空白對(duì)照組水平(P>0.05)，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，模型組HDL-C與空白組比較有降低，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；電針治療后治療組LDL-C有所升高，但與模型組和空白組比較(P>0.05)，均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，模型組與空白組比較(P<0.05)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示電針治療后，大鼠的血脂發(fā)生變化，這一變化使大鼠的血脂水平朝著更好的方向發(fā)展，從而達(dá)到有效控制血糖的作用。見(jiàn)表2。

表2 針灸治療后各組大鼠血脂情況

3 討論

3.1 電針胃脘下俞對(duì)血糖的影響

本實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，電針“胃脘下俞”可以使糖尿病大鼠的空腹血糖值顯著降低，同時(shí)也可以明顯降低糖尿病大鼠血清瘦素的含量。目前國(guó)內(nèi)大部分學(xué)者認(rèn)為瘦素與胰島素之間存在雙向調(diào)節(jié)作用[13-14]。課題組通過(guò)電針大鼠“胃脘下俞”，使瘦素與其受體結(jié)合，調(diào)節(jié)下游參與血糖調(diào)節(jié)的神經(jīng)內(nèi)分泌遞質(zhì)的分泌(例如：神經(jīng)肽)，從而有效發(fā)揮瘦素調(diào)節(jié)能量代謝、改善胰島素敏感性和葡萄糖代謝的作用[15]。糖尿病大鼠體內(nèi)瘦素水平得到有效控制后，可顯著改善胰島素抵抗[16]，這可能是針刺調(diào)控糖尿病大鼠血糖的重要機(jī)制，同時(shí)也是瘦素—胰島素軸的體現(xiàn)。

3.2 電針胃脘下俞對(duì)血脂的影響

糖尿病是由于體內(nèi)胰島素絕對(duì)或相對(duì)不足而引起的以糖、脂肪、蛋白質(zhì)等代謝紊亂為主的一種內(nèi)分泌疾病[17]，因此2型糖尿病患者往往同時(shí)存在血脂代謝紊亂。

2型糖尿病因胰島功能不足,使脂肪細(xì)胞內(nèi)的激素敏感脂酶活性升高,脂肪組織釋放大量脂肪酸,因而增加總膽固醇(TC)、TG的合成；同時(shí),胰島素抵抗可通過(guò)抑制脂蛋白酯酶活性，使TG的脂蛋白清除時(shí)間延長(zhǎng)，進(jìn)一步促進(jìn)血脂異常[18]。另一方面，高脂血癥又會(huì)抑制胰島素分泌,加劇胰島素分泌障礙和胰島素抵抗，而且脂代謝紊亂尤其是LDL-C含量升高可導(dǎo)致內(nèi)皮下間隙LDL-C的氧化作用及其它修飾作用增強(qiáng)，促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化斑塊形成，對(duì)糖尿病患者發(fā)生心血管并發(fā)癥有顯著作用[19-20]。

HDL-C是一種抗動(dòng)脈粥樣硬化的血漿脂蛋白，HDL-C對(duì)判斷血脂是否異常具有重要臨床意義[21]。本課題研究發(fā)現(xiàn)電針胃脘下俞能有效改善2型糖尿病大鼠的胰島功能，從而影響胰島素的分泌，調(diào)節(jié)血糖；通過(guò)電針胃脘下俞調(diào)節(jié)2型糖尿病大鼠的瘦素、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白等的含量來(lái)改善脂代謝紊亂的狀況。關(guān)于電針胃脘下俞調(diào)節(jié)血糖血脂的進(jìn)一步機(jī)制將在今后的實(shí)驗(yàn)中深入探討。

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