糞便鏡檢脂肪球與小兒輪狀病毒腸炎相關(guān)性探討

李杰，岳穎，李嬌，郭麗

(1.沈陽(yáng)市兒童醫(yī)院檢驗(yàn)科，遼寧 沈陽(yáng) 110032；2.沈陽(yáng)醫(yī)學(xué)院科學(xué)實(shí)驗(yàn)中心)

輪狀病毒(rotavirus，RV)是引起嬰幼兒嚴(yán)重腹瀉的最主要病原體，世界范圍內(nèi)有35%～52%的患兒腹瀉由它引起[1]。有研究認(rèn)為RV可以通過(guò)胃腸屏障而到達(dá)血液循環(huán)，引起各個(gè)臟器病變，導(dǎo)致多種并發(fā)癥，成為RV腹瀉致死的重要原因之一[2]。為了解本地區(qū)嬰幼兒糞便鏡檢脂肪球與RV腹瀉關(guān)系以及感染現(xiàn)狀，我們對(duì)2011年9月至2012年4月沈陽(yáng)市兒童醫(yī)院腹瀉嬰幼兒的糞便進(jìn)行糞便常規(guī)檢查，同時(shí)進(jìn)行RV抗原檢測(cè)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 2011年9月至2012年4 月到我院就診的腹瀉患兒5 187 例，其中男3 085例，女2 102例，年齡9 d～5歲。

1.2 方法

1.2.1 試劑與儀器 杭州艾康生物技術(shù)有限公司提供，采用膠體金法即膠體金免疫層析技術(shù)和雙抗體夾心原理檢測(cè)糞便中A群輪狀病毒抗原。日本Olympus C21顯微鏡。

1.2.2 試驗(yàn)方法 水樣便采用產(chǎn)品所配的一次性塑料吸管滴加2滴(大約50 μl)至裝有稀釋緩沖液的收集器中；固態(tài)糞便可用取樣棒(收集器自帶)挑取大約50 mg標(biāo)本的糞便加入裝有稀釋緩沖液的收集器中。充分搖勻，折斷收集器尖端，棄去頭2滴，垂直滴加2滴(約80 μl)無(wú)氣泡的樣品稀釋液于試劑的加樣孔(S)內(nèi)，10～20 min讀取測(cè)試結(jié)果。陽(yáng)性出現(xiàn)兩條紫紅色的條帶；陰性時(shí)質(zhì)控區(qū)內(nèi)(C)出現(xiàn)一條紫紅色的條帶；無(wú)效則質(zhì)控區(qū)內(nèi)(C)未出現(xiàn)紫紅色的條帶，需重新檢測(cè)。同時(shí)記錄糞便性狀并直接涂片鏡檢。鏡檢標(biāo)準(zhǔn)嚴(yán)格按照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 15.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)數(shù)資料采用Pearson Chisquare 檢驗(yàn)。P<0.05為差異有顯著性。

2 結(jié)果

2.1 RV陽(yáng)性嬰幼兒不同性別、不同年齡脂肪球檢測(cè)結(jié)果 5 187例腹瀉嬰幼兒糞便中RV感染1 287例，陽(yáng)性率為24.8%。RV陽(yáng)性男患兒脂肪球陽(yáng)性為70.0%，RV陽(yáng)性女患兒脂肪球陽(yáng)性為66.4%，差異無(wú)顯著性。RV陽(yáng)性年齡<6個(gè)月、6個(gè)月～2歲、>2歲患兒脂肪球陽(yáng)性分別為67.6%、69.0%和52.6%，差異無(wú)顯著性。見表1。

表1 RV陽(yáng)性嬰幼兒不同性別、不同年齡脂肪球檢測(cè)結(jié)果

2.2 RV陽(yáng)性組與陰性組糞便鏡檢脂肪球數(shù)量比較 0代表未見脂肪球，>0代表見到1個(gè)以上脂肪球。分析結(jié)果見表2。RV陽(yáng)性組中68.5%的糞便標(biāo)本鏡檢可見脂肪球，顯著高于RV檢測(cè)陰性組(32.0%)，差異有顯著性。

表2 RV陽(yáng)性組與陰性組糞便鏡檢脂肪球數(shù)量比較

注：兩者比較χ2=533.6，P<0.01

3 討論

RV是引起人類和動(dòng)物病毒性腹瀉的主要病原體，屬呼腸病毒科輪狀病毒屬，為雙鏈RNA病毒，分為A、B、C 3組，僅A、B組引起人類嚴(yán)重發(fā)病，A組致嬰幼兒腹瀉且最為常見，已成為世界范圍內(nèi)兒童急性腹瀉病最重要的病原之一。

通過(guò)對(duì)本院5 187例腹瀉嬰幼兒糞便進(jìn)行檢測(cè)結(jié)果分析可見，A 群RV陽(yáng)性標(biāo)本1 287例，陽(yáng)性率為24.8%，與其它報(bào)道一致[3]。由表1可見不同性別、不同年齡RV陽(yáng)性嬰幼兒脂肪球檢測(cè)結(jié)果差異無(wú)顯著性。A 群RV陽(yáng)性標(biāo)本中糞便鏡檢出脂肪球882例，檢出率68.5%，與張靜等[4]報(bào)道一致。由表2可見，RV陽(yáng)性組與陰性組糞便鏡檢脂肪球數(shù)量比較，差異有顯著性。分析其相關(guān)的原因可能是：RV的發(fā)病機(jī)制尚不完全清楚，認(rèn)為RV主要侵犯上部小腸的微絨毛上皮細(xì)胞，使其凋亡。腹瀉患兒小腸絨毛變短、萎縮，黏膜固有層單核細(xì)胞侵潤(rùn)，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)池膨脹，線粒體腫脹，微絨毛稀少，不規(guī)則、可見裸露的微絨毛?？赡苁菋胗變焊腥綬V后最先出現(xiàn)消化道黏膜免疫反應(yīng)，引起小腸黏膜破壞。由于新生的上皮細(xì)胞功能低下及吸收面積變小，造成腸吸收不良而出現(xiàn)脂肪球[5]。因缺乏脂肪酶而使脂肪水解不全，引起脂肪消化不良，腸黏膜上皮細(xì)胞刷狀緣受損，脂肪吸收障礙，導(dǎo)致糞便中的脂肪球增多。

小兒RV腸炎，起病急且常出現(xiàn)發(fā)熱、嘔吐和腹瀉等癥狀，持續(xù)時(shí)間較長(zhǎng)，可達(dá)3～9 d，同時(shí)還伴有脫水和電解質(zhì)平衡紊亂等癥狀。RV是嬰幼兒秋冬季腹瀉的主要病原體，不僅引起腸道內(nèi)感染，而且常可能發(fā)生病毒血癥，引起肝臟、心肌、神經(jīng)系統(tǒng)，甚至呼吸系統(tǒng)及泌尿系統(tǒng)等損害[6]。目前臨床檢測(cè)RV的方法有PCR、膠乳凝集法、ELISA雙抗體夾心法、病毒培養(yǎng)、電鏡檢查、膠體金法等。本實(shí)驗(yàn)所用的膠體金法，具有快速、特異、敏感、方法簡(jiǎn)單、結(jié)果準(zhǔn)確的特點(diǎn)[7]，適合一般基層實(shí)驗(yàn)室門急診的常規(guī)檢查。在高發(fā)流行季節(jié)建議把A 群RV抗原檢測(cè)作為急性腹瀉患兒糞便的常規(guī)檢查之一。

本研究發(fā)現(xiàn)糞便鏡檢脂肪球數(shù)量與RV陽(yáng)性呈正相關(guān)。根據(jù)腹瀉發(fā)生的季節(jié)，臨床癥狀，在尚未開展A 群RV抗原檢測(cè)的醫(yī)院，如果腹瀉嬰幼兒糞便常規(guī)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)脂肪球時(shí)，提示醫(yī)生高度懷疑RV感染，從而避免臨床誤診，及早確診RV感染有助于指導(dǎo)臨床有效治療和控制致死性并發(fā)癥。

參考文獻(xiàn)：

[1]李上淼，李紹錦．兒科輪狀病毒醫(yī)院感染的高危因素分析與處理對(duì)策[J]．中國(guó)初級(jí)衛(wèi)生保健，2012，26(2)：52-53.

[2]刁艷霞，陳蘭舉．輪狀病毒腸道外感染的研究進(jìn)展[J]．國(guó)際兒科學(xué)雜志，2010，37(2)：203-205．

[3]張巧紅，萬(wàn)汝根，李國(guó)鋼．腹瀉患兒輪狀病毒感染分析[J]．中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2011，21(6)：1139-1236．

[4]張靜，劉慶玲，熊德棟，等．A 群輪狀病毒的檢測(cè)對(duì)于嬰幼兒腹瀉的重要性研究[J]．國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2011，32(9)：1001-1002.

[5]魏靜芬，葉富法．嬰幼兒腹瀉輪狀病毒感染的檢測(cè)與分析[J]．中國(guó)婦幼保健，2009，24(12)：1640-1641.

[6]唐紅，汪青，鄭潔麗．嬰幼兒輪狀病毒腸炎并胃腸外損害的臨床分析[J]．中華全科醫(yī)學(xué)，2010，8(2)：196-197．

[7]高平．嬰幼兒腹瀉患者A 群輪狀病毒快速檢測(cè)分析及臨床意義[J]．檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2011，8(19)：2375-2376．