單花種蜂蜜植物源黃酮標(biāo)記物的研究進(jìn)展*

王錦梅，程妮，，豐凡，鄧建軍，高慧，曹煒，

1(西北大學(xué)分析科學(xué)研究所，陜西西安，710069)2(西北大學(xué)化工學(xué)院食品工程系，陜西西安，710069);3(陜西省蜂產(chǎn)品工程技術(shù)研究中心，陜西西安，710056)

蜂蜜是指蜜蜂采集植物的花蜜、分泌物或蜜露，與自身分泌物結(jié)合后，經(jīng)充分釀造而成的天然甜物質(zhì)［1］。蜂蜜中含有200多種化學(xué)成分，包括碳水化合物、蛋白質(zhì)、礦物質(zhì)、維生素、有機(jī)酸、黃酮、酚酸、酶和其它的植物化學(xué)物質(zhì)［2］。其中植物化學(xué)物質(zhì)是蜂蜜發(fā)揮保健功能的主要成分，其種類和含量不僅受氣候(陽(yáng)光，水分)、土壤及其它未知因素等的影響，而且與其植物源息息相關(guān)［3］。

黃酮是一類廣泛存在于植物中的次生代謝產(chǎn)物，包括黃酮、黃銅醇、二氫黃酮、異黃酮、花色素類及黃烷-3，4-二醇類等。蜂蜜中黃酮化合物的種類受植物源的影響。北半球采集的蜂蜜所含的黃酮化合物主要來(lái)自蜂膠，赤道地區(qū)和澳大利亞蜂蜜中的黃酮化合物則主要來(lái)自蜜源植物的花粉和花蜜［4］。目前，從蜂蜜中已經(jīng)鑒定出30多種黃酮化合物［5］。雖然蜂蜜中黃酮化合物含量較少，但它能反映蜂蜜的植物源種類。本文綜述了近年來(lái)國(guó)內(nèi)外關(guān)于黃酮化合物作為單花種蜂蜜植物源標(biāo)記物的研究進(jìn)展。

1 單花種蜂蜜中的植物源黃酮標(biāo)記物

1.1 桉樹蜜中的黃酮標(biāo)記物

桉樹是桃金娘科桉屬植物。在澳大利亞?wèn)|部沿海廣泛分布。桉樹枝繁葉茂，終年常綠。其花呈纓狀，為粉紅色。桉樹花期長(zhǎng)，泌蜜量大，是一種重要的蜜源植物。我國(guó)引種50多年，主要分布在廣東、廣西、海南、福建和臺(tái)灣，江西、云南、四川、湖南南部也有少量分布。桉樹蜜呈琥珀色，有特殊的桉樹花香味，口感酸中帶甜，酸甜之中略帶咸味和辣味，是澳大利亞的主要商品蜜。

Martos等人研究了澳大利亞的灌木凝膠蜜和桉樹蜜中的黃酮組分［6-7］，發(fā)現(xiàn)二者均含有槲皮素、毛地黃黃酮和山奈酚，而且灌木凝膠蜜中不含五羥基黃酮，因此，利用這一特點(diǎn)很容易將其從澳大利亞桉樹蜜中鑒定出來(lái)。Martos等人還發(fā)現(xiàn)，楊梅黃素、木樨草素和毛地黃黃酮可以做歐洲桉樹蜜的植物源標(biāo)記物。Yao等人研究了澳大利亞和歐洲桉樹蜜中的黃酮化合物［8］，發(fā)現(xiàn)所有澳大利亞桉樹蜜中均含有五羥基黃酮、槲皮素和木樨草素，該研究結(jié)果意味著這3種黃酮化合物可以作為澳大利亞桉樹蜜的植物源標(biāo)記物。Yao等人還發(fā)現(xiàn)，澳大利亞桉樹蜜和歐洲桉樹蜜的不同之處在于短葉松素、松屬素和白楊素的含量不同，它們?cè)跉W洲桉樹蜜中的含量較高，而在澳大利亞桉樹蜜中的含量很低。Iurlina等人研究了阿根廷的單花蜜［9］，發(fā)現(xiàn)槲皮素，楊梅酮和木樨草素可以作為這類蜜的植物源標(biāo)記物。

1.2 麥盧卡蜜中的黃酮標(biāo)記物

麥盧卡屬于桃金娘科灌木，主要分布在新西蘭和澳大利亞，多生長(zhǎng)于偏遠(yuǎn)無(wú)污染的原始森林。其樹葉曾被當(dāng)年發(fā)現(xiàn)新西蘭的庫(kù)克船長(zhǎng)用來(lái)當(dāng)作茶葉，因此被稱為“茶樹”。每逢初夏，麥盧卡植物開花時(shí)會(huì)吸引成群的蜜蜂來(lái)采集花蜜，釀造出獨(dú)具特色的麥盧卡蜂蜜。麥盧卡蜜中含有其它蜂蜜所沒(méi)有的活性抗菌成分——UMF獨(dú)麥素，其藥理活性甚至超過(guò)很多傳統(tǒng)的藥品，因而成為世界上最珍貴的蜂蜜之一，也是世界上2種藥品級(jí)蜂蜜之一，堪稱蜂蜜中的極品。

Kato等人分析了新西蘭和澳大利亞的麥盧卡蜜［10］，發(fā)現(xiàn)二者均含有金雞菊苷，而且在澳大利亞的麥盧卡蜂蜜(包括麥盧卡樹上的灌木凝膠蜜)中含量最豐富。因此，金雞菊苷可能是麥盧卡蜂蜜的一個(gè)很好的黃酮標(biāo)記物。Oelschlaegel等人［11］研究了新西蘭的40種麥盧卡蜜，第一次在麥盧卡蜜中鑒定出曲酸，光色素等物質(zhì)，同時(shí)也發(fā)現(xiàn)光色素是麥盧卡蜂蜜植物源標(biāo)記物的相關(guān)物質(zhì)。Yao等人研究了澳大利亞灌木凝膠蜜和新西蘭的麥盧卡蜜［12］，發(fā)現(xiàn)二者均含有槲皮素、毛地黃黃酮、3-甲氧基槲皮素和山奈酚，這兩類蜂蜜的主要差異是黃酮的含量不同，后者的含量相對(duì)較高，因此槲皮素、毛地黃黃酮、3-甲氧基槲皮素和山奈酚可以作為沿海地區(qū)麥盧卡蜂蜜的植物源標(biāo)記物。Stephens等人研究了新西蘭不同地區(qū)的麥盧卡蜜［13］，發(fā)現(xiàn)有較高含量的三甲氧基苯甲酸和丙酮醛，而且兩者的含量與其地理位置有一定的關(guān)系。

1.3 石楠蜜中的黃酮標(biāo)記物

歐石楠是指杜鵑花科歐石楠屬的植物。全球大約有700多種的歐石楠，其中大部分都產(chǎn)自南非，被稱為“南非特有的皇后”;另外尚有70多個(gè)物種大致分布于非洲其他地域、地中海地區(qū)及歐洲地區(qū)。在結(jié)晶前，石楠蜜的顏色由茶琥珀色變?yōu)殓晟蚣t琥珀色，隨后變?yōu)槌赛S色(有時(shí)甚至變?yōu)樽厣?，這有別于其他蜂蜜。

Ferreres等人分析了葡萄牙的石楠蜜［14］，發(fā)現(xiàn)石楠蜜中黃酮物質(zhì)的含量在60～500 μg/100 g(蜂蜜)，主要是楊梅黃酮、3-甲基楊梅黃銅、3'-甲氧基楊梅黃酮和五羥基黃酮。而且在當(dāng)?shù)氐钠渌涿蹣悠分袥](méi)有檢測(cè)到這4種物質(zhì)，因此，它們有可能作為石楠蜜植物源的標(biāo)記物。Jasicka-Misiak等人研究了波蘭的14種石楠蜜［15］，發(fā)現(xiàn)這14種石楠蜜中楊梅素的含量占總酚含量的0.5% ～8.5%，與其他黃酮類物質(zhì)相比它的含量較高，因此認(rèn)為楊梅素可能成為鑒別石楠蜜真假的化學(xué)標(biāo)記物。

1.4 洋槐蜜的黃酮標(biāo)記物

洋槐屬落葉喬木，本屬植物分布于歐洲的不同國(guó)家，如意大利、德國(guó)和克羅地亞等。我國(guó)主要分布在長(zhǎng)江以北，其中黃河中下游各省最多。樹皮呈褐色，有縱裂紋。花白色，花萼筒上有紅色斑紋?；ㄆ陂L(zhǎng)江以南為4月下旬，長(zhǎng)江以北為五月上旬到中旬，開花期短而集中，花期10 d左右。洋槐蜜呈水白色，透明狀，色澤清亮，口感清甜，有槐花特有的清香味，不易結(jié)晶。我國(guó)的洋槐蜜主要產(chǎn)自陜西、山東、河南及河北等地。

Truchado等人分析了意大利洋槐蜜［16］，發(fā)現(xiàn)含有8種黃酮苷，它們的共同特點(diǎn)是以山奈酚與鼠李糖和己糖結(jié)合，而意大利其他植物源的蜂蜜中都不含這類物質(zhì)，因此把這8種黃酮苷作為意大利洋槐蜜的植物源標(biāo)記物。Schievano等人［17］研究了意大利威尼托地區(qū)的洋槐蜜、椴樹蜜和栗子蜜。發(fā)現(xiàn)均含有白楊素，但洋槐蜜中白楊素的含量最高。因此，白楊素可能是洋槐蜜的植物源黃酮標(biāo)記物。

1.5 栗子蜜中的黃酮標(biāo)記物

板栗是歐洲居民栽培最早的果樹之一，約已有3 000多年的栽培歷史。屬落葉喬木，本屬植物分布于北半球的亞洲、歐洲 、美洲和非洲 。主要栽培種還有歐洲栗和日本栗。我國(guó)主要分布在遼寧、陜西、北京、河北、山東和河南等地。栗子花是由樹梢伸出的如白胡須一樣，似花非花，似葉非葉，雌雄同株，雄花為直立柔荑花序，雌花單獨(dú)或數(shù)朵生于總苞內(nèi)，花期為5～6月。栗子花蜜顏色較深，香味濃郁，是歐洲國(guó)家的主要商品蜜。

Truchado等人研究了7種意大利栗子蜜［18］，這些樣品分別采自艾米利亞-羅馬涅、錫耶納和阿雷佐。只有來(lái)自艾米利亞-羅馬涅的樣品中含有一種槲皮素衍生物，含量雖少，但可以作為這個(gè)地區(qū)蜂蜜的植物源標(biāo)記物。Daher等人研究了不同地區(qū)的單花蜜［19］，包括來(lái)自法國(guó)的栗子蜜、法國(guó)和匈牙利的洋槐蜜、西班牙和意大利的柑橘蜜、法國(guó)的薰衣草蜜、意大利和西班牙的桉樹蜜等，發(fā)現(xiàn)這些樣品都含有白楊素，松屬素、短葉松素等黃酮化合物，而且栗子蜜中松屬素的含量最低，但是Daher等人認(rèn)為這些黃酮化合物與蜂蜜的植物源沒(méi)有相關(guān)性。

1.6 椴樹蜜中的黃酮標(biāo)記物

椴樹是一種高大的喬木，屬于椴樹科。主產(chǎn)于熱帶和亞熱帶，中國(guó)有9屬，80余種。在我國(guó)南北均有分布，生長(zhǎng)在長(zhǎng)白山脈的主要是糠椴和紫椴，是我國(guó)極富經(jīng)濟(jì)價(jià)值的優(yōu)良樹種。其實(shí)最值得稱贊的還是椴樹花蜜，每年6～7月中旬是它的花期。椴樹蜜色澤晶瑩，醇厚甘甜，具有濃郁的薄荷香味，且較易結(jié)晶，結(jié)晶后呈細(xì)膩潔白的油脂狀。椴樹蜜是我國(guó)東北的主要商品蜜。

Truchado等人分析了意大利不同地區(qū)的椴樹蜜、桉樹蜜和蒲公英蜜等27種樣品［20］，發(fā)現(xiàn)意大利的所有椴樹蜜樣品中都含有異鼠李糖-3-O-新橙皮苷，且含量較高。因此，可以將這種黃酮苷作為意大利椴樹蜜的植物源標(biāo)記物。此外，蒲公英蜜中含有異鼠李糖-3-O-(戊糖基-己糖基)-7-O-己糖基，因此這種黃酮苷可以作為意大利蒲公英蜜的植物源標(biāo)記物。

1.7 荊芥蜜中的黃酮標(biāo)記物

荊芥是唇形科植物中的一個(gè)種，多年生草本，主要生長(zhǎng)于亞熱帶如臺(tái)灣地區(qū)之海拔800 m以下的開闊地及荒廢地。我國(guó)主要分布在新疆、甘肅、陜西、云南等地。荊芥蜜是蜜蜂在荊芥植物花上采集花蜜并釀制而成，荊芥蜜一般在秋天才有，花期2～3個(gè)月，產(chǎn)量較高，顏色呈淡綠色，口感細(xì)膩，氣味芳香，是阿根廷的主要產(chǎn)品蜜。

Truchado等人研究了阿根廷的荊芥蜂蜜［21］，在所分析的樣品中都檢測(cè)到了槲皮素、山奈酚、異鼠李糖和配糖體，因此，這4種黃酮化合物結(jié)合起來(lái)可以做阿根廷的荊芥蜂蜜的植物源標(biāo)記物。

1.8 柑橘蜜中的黃酮標(biāo)記物

柑橘屬蕓香科柑橘亞科，是熱帶、亞熱帶常綠果樹(除枳以外)，用作經(jīng)濟(jì)栽培的有3個(gè)屬:枳屬、柑橘屬和金柑屬。我國(guó)和世界其他國(guó)家栽培的柑橘主要是柑橘屬。柑橘在春季開花，花為黃白色。柑橘蜜是蜜蜂采集柑橘花釀制而成，色澤多種多樣，白色至淺琥珀色，味甜潤(rùn)而微酸，有柑橘香味，易結(jié)晶。柑橘蜜是巴西的主要產(chǎn)品蜜。

Tomás-Barberán等人用高效液相色譜法研究了52種歐洲單花蜜［22］，發(fā)現(xiàn)橙皮素可以作為柑橘的植物源標(biāo)記物。Escriche等人研究了西班牙的6種柑橘蜜［23］，這6種柑橘蜜是蜜蜂分別采集檸檬樹和橘子樹而得到的，研究結(jié)果表明有8種黃酮，2種酚酸和37種揮發(fā)性物質(zhì)的含量在檸檬蜜中相對(duì)要高，Escriche等人建議用這些物質(zhì)作為西班牙不同柑橘蜜的植物源標(biāo)記物。

此外，Tomás-Barberán等人還發(fā)現(xiàn)山奈酚可以作為迷迭香蜜的植物源標(biāo)記物;槲皮素可以作為向日葵蜜的植物源標(biāo)記物［21］。Tuberoso等人研究了來(lái)自意大利不同地區(qū)的23種薊蜂蜜［24］，發(fā)現(xiàn)光色素可以作為這種蜂蜜的植物源標(biāo)記物。

2 結(jié)語(yǔ)

從單花種蜂蜜中尋找植物源黃酮標(biāo)記物的研究越來(lái)越受到人們的關(guān)注。雖然蜂蜜中黃酮化合物含量較低，且受環(huán)境、土壤等條件的影響，目前的數(shù)據(jù)還不足以判斷蜂蜜的植物源，但隨著蜂蜜植物化學(xué)研究的不斷深入，有可能從蜂蜜中篩選出植物源標(biāo)示物。

我國(guó)擁有豐富的單花種蜂蜜，很多單花種蜂蜜具有極高的商品價(jià)值和保健功能，由于產(chǎn)量小，供求關(guān)系存在矛盾，因而一些商品價(jià)格較高的單花種蜂蜜成為造假的對(duì)象。然而，我國(guó)在蜂蜜的植化方面的研究非常薄弱，很多單花種蜂蜜中植物次生代謝物說(shuō)不清楚，因此，深入研究我國(guó)主產(chǎn)的特色單花種蜂蜜的植物源分類的研究迫在眉睫。研究結(jié)果將為蜂蜜的質(zhì)量控制、真?zhèn)舞b別及保健功能的開發(fā)提供參考。

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