酵母樣真菌引起慢性腹瀉經(jīng)甲硝唑治療后的糞便標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果分析

付素蘭 劉景武 任天紅 張 榮 孫文澤

(河北省石家莊市第三醫(yī)院檢驗(yàn)科，河北 石家莊 050011)

酵母樣真菌為腸道寄生菌，屬于正常菌群，在正常人的糞便中很少，涂片鏡檢偶見，培養(yǎng)一般為陰性，通常不致病。而廣譜抗生素的長(zhǎng)期和不合理應(yīng)用，很容易造成酵母樣真菌大量繁殖，腸道內(nèi)菌群嚴(yán)重失調(diào)，引起腹瀉[1]。甲硝唑?qū)傧趸溥蝾惪股兀R床上主要用于抗滴蟲、抗阿米巴原蟲和抗厭氧菌感染的治療。目前，有些研究表明甲硝唑可以用于治療慢性腹瀉。本研究對(duì)在我院治療的由酵母樣真菌引起的慢性腹瀉患者給予甲硝唑治療有效的患者，通過糞便檢查，確定治療前后腸道菌群的變化，探討其機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 研究對(duì)象 對(duì)我院2006-07—2007-08共120例經(jīng)實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)證實(shí)為酵母樣真菌引起的慢性腹瀉患者，年齡12～76歲。研究對(duì)象在診斷為酵母樣真菌引起的慢性腹瀉前曾因其他病因使用抗生素治療過一段時(shí)間。

1.2 試劑和儀器 TTC-沙保羅瓊脂培養(yǎng)基、伊紅美蘭瓊脂培養(yǎng)基、SS瓊脂培養(yǎng)基購(gòu)自北京陸橋技術(shù)有限責(zé)任公司；酵母樣真菌鑒定、藥敏試劑盒購(gòu)自珠海迪爾生物工程有限公司；玉米粉吐溫80瓊脂購(gòu)自杭州天和微生物試劑有限公司；DL-96細(xì)菌自動(dòng)鑒定儀購(gòu)自珠海迪爾生物工程有限公司。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 標(biāo)本采集 取糞便標(biāo)本1 g左右，放在專用無菌標(biāo)本盒中，連續(xù)送檢3次。

1.3.2 取0.9%氯化鈉注射液1滴，涂取糞便，蓋上蓋玻片，在放大15 000倍相差超高倍顯微鏡下觀察是否有酵母樣真菌，取少許糞便涂片，做革蘭染色計(jì)算球菌、桿菌比例[2]。

1.3.3 培養(yǎng) 取一環(huán)糞便分區(qū)劃線，接種到TTC-沙保羅培養(yǎng)基上，28 ℃培養(yǎng)48～72 h，觀察菌落生長(zhǎng)情況，一旦發(fā)現(xiàn)可疑菌落即挑取可疑菌落進(jìn)行鑒定。

1.3.4 鑒定 將分離的菌株進(jìn)行純化后，使用酵母樣真菌鑒定試劑盒進(jìn)行鑒定，同時(shí)進(jìn)行芽管實(shí)驗(yàn)和小培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)[3-4]。

2 結(jié) 果

120例慢性腹瀉患者用藥前經(jīng)超高倍鏡檢查，糞便中發(fā)現(xiàn)大量酵母樣真菌，且酵母菌數(shù)量超過10%，球菌∶桿菌大于3∶1菌群比例嚴(yán)重失調(diào)。對(duì)其糞便進(jìn)行培養(yǎng)，有酵母樣真菌生長(zhǎng)。而使用甲硝唑治療后，菌群比例恢復(fù)正常，球菌∶桿菌基本為3∶1，真菌培養(yǎng)結(jié)果為真菌未檢出。

3 討 論

3.1 酵母樣真菌為腸道寄生菌，屬于正常菌群，在正常人的糞便中很少，涂片鏡檢偶見，培養(yǎng)一般為陰性，通常不致病。但由于抗生素不合理應(yīng)用，使酵母菌成為條件致病菌，腸內(nèi)菌群嚴(yán)重失調(diào)。這些患者雖無其他嚴(yán)重危害癥狀，但由于大便次數(shù)增多、腹脹等癥狀影響生活質(zhì)量，所以應(yīng)引起足夠的重視[5-8]。在培養(yǎng)中老人和兒童培養(yǎng)陽性率高，可能是與其免疫力低下，機(jī)體抵抗力弱有關(guān)，對(duì)這些人群尤其要加以關(guān)注[9-11]。

3.2 甲硝唑主要用于抗滴蟲、抗阿米巴原蟲和抗厭氧菌感染的治療。可以抑制腸內(nèi)厭氧菌，并有免疫抑制、影響白細(xì)胞化作用。近些年報(bào)道，在臨床應(yīng)用過程中，又發(fā)現(xiàn)其一些新用途，如治療感染性腹瀉、慢性潰瘍性結(jié)腸炎、偽膜性腸炎等，分析其原因可能是因?yàn)橥ㄟ^調(diào)節(jié)腸道菌群變化，使其恢復(fù)正常，從而達(dá)到治愈的目的[12-13]。

[1] 王興鵬.腸道菌群失調(diào)診斷治療建議[J].中華消化雜志，2009，29(5)：335-337.

[2] 李志清，魏瑞全，李彤，等.多媒體超高倍顯微分析儀在診斷泌尿生殖系感染中的應(yīng)用[J].現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2007，22(3)：89-90.

[3] 王端禮.醫(yī)學(xué)真菌學(xué)：實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)指南[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2005：20-36.

[4] 周貴民，謝靈.國(guó)內(nèi)酵母菌感染和實(shí)驗(yàn)室診斷的現(xiàn)狀及建議[J].中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志，1996，19(5)：301-303.

[5] Ford AC，Chey WD，Talley NJ,et al.Yield of diagnostic tests for celiac disease in individuals with symptoms suggestive of irritable bowel syndrome：systematic review and meta-analysis[J].Arch Intern Med，2009，169(7)：651-658.

[6] 方玉才，邱炳峰.惡性腫瘤患者真菌感染種類分布及耐藥性分析[J].中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2010，20(11)：2940-2941.

[7] 鐘志戎，徐家新.惡性腫瘤晚期并發(fā)真菌感染種類分布及其藥敏分析[J].吉林醫(yī)學(xué)，2010，31(20)：3232-3232.

[8] 朱波，陳艷華，陸一平，等.惡性腫瘤患者并發(fā)醫(yī)院真菌感染及耐藥分析[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2011，32(1)：122-123.

[9] Santelmann H，Howard JM.Yeast metabolic products，yeast antigens and yeasts as possible triggers for irritable bowel syndrome[J].Eur J Gastroenterol Hepatol，2005，17(1)：21-26.

[10] Parm U，Metsvaht T，Sepp E，et al.Risk factors associated with gut and nasopharyngeal colonization by common Gram-negative species and yeasts in neonatal intensive care units patients[J].Early Hum Dev，2011，87(6)：391-399.

[11] Schulze J，Sonnenborn U.Yeasts in the gut：from commensals to infectious agents[J].Dtsch Arztebl Int，2009，106(51-52)：837-842.

[12] 劉明成.思密達(dá)聯(lián)合甲硝唑治療重癥腹瀉40例療效觀察[J].青海醫(yī)藥雜志，2012，42(5)：25-26.

[13] 張璟.甲硝唑治療小兒遷延性腹瀉50例療效觀察[J].中國(guó)醫(yī)師雜志，2003，(S1)：253.