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    花生紅衣白藜蘆醇的研究進展

    2013-04-09 01:26:39姜燕鮑慧娟張海悅
    食品研究與開發(fā) 2013年18期
    關(guān)鍵詞:提取鑒定白藜蘆醇

    姜燕,鮑慧娟,張海悅

    (長春工業(yè)大學(xué)化學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院,吉林長春 130012)

    花生紅衣白藜蘆醇的研究進展

    姜燕,鮑慧娟,張海悅

    (長春工業(yè)大學(xué)化學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院,吉林長春 130012)

    摘 要:介紹花生紅衣中白藜蘆醇的性質(zhì)、提取和鑒定方法及應(yīng)用,并對其今后的發(fā)展做了概述。

    關(guān)鍵詞:花生紅衣;白藜蘆醇;提??;鑒定;應(yīng)用

    花生又稱落花生、番果、長壽果等,屬豆科,一年生草本植物。花生紅衣為花生的種皮,具有抗氧化作用,但在花生產(chǎn)品加工中通常被除去,我國對花生紅衣的綜合利用水平較低,有必要充分開發(fā)花生紅衣中的活性成分,并將其用于食品、醫(yī)藥和保健品等行業(yè)。

    1 花生紅衣的活性成分

    花生紅衣又稱長果衣、落花生衣、紅薄衣。主要成分包括:碳水化合物(12%~28%)、脂肪(10%~14%)、蛋白質(zhì)(11%~18%)、水分(5%~9%)、灰分(8%~12%)、粗纖維(37%~42%)、當(dāng)寧(7%)和多種色素等[1-2]?;ㄉt衣中含有豐富的多酚類物質(zhì),如阿魏酸、原花色素、兒茶素等,還含有一些生物堿,這些物質(zhì)都具有很強的抗氧化活性[1-2]。

    另外,花生紅衣還有一定的藥理作用,它對多種出血具有良好的療效,如能治血友病、類血友病、術(shù)后出血、肝病出血癥、原發(fā)性及繼發(fā)性血小板減少性紫癜、胃、腸、肺、子宮等出血,它含有豐富的甘油酯和甾醇酯,具有抑制纖維蛋白的溶解,促進骨髓制造血小板從而縮短出血時間,并且有提高血小板的質(zhì)量,加強毛細血管的吸收性,調(diào)節(jié)凝血因子缺陷等功能[1-3]。

    2 白藜蘆醇

    白藜蘆醇是花生紅衣中的非黃酮類多酚化合物,它是一種天然抗氧化劑,又稱芪三酚,逆轉(zhuǎn)醇,(E)-5-[2-(4-羥苯基)-乙烯基]-1,3-苯二酚,3,5,4-三羥基芪,化學(xué)式為C14H12O3。1939年,日本人從植物白藜蘆的根中提取,直至上世紀(jì)90年代才備受關(guān)注。目前已在21科,31屬,72種植物中被發(fā)現(xiàn),如豆科的落花生屬,決明屬,槐屬,百合科的蘆醇屬,桃金娘科的桉屬,葡萄科的葡萄屬等[4]。它廣泛存在于虎杖、葡萄、花生和桑葚等植物中。不同植物中白藜蘆醇的含量不同,且在一種植物中因品種的不同含量也有差異,如葡萄中葡萄皮是主要合成部位,白藜蘆醇的含量高,花生皮中白藜蘆醇的含量多于花生仁[5]。Sanders等[6]報道了成熟的可食用花生種子中白藜蘆醇含量僅為0.03 mg/g~0.14 mg/g,而花生紅衣中的含量0.65 mg/g。用反相高效液相色譜法測定4個品種(珠江1號、花育20、花育22、花育31)花生中白藜蘆醇的含量,得到珠江1號花生根、種皮、殼、莖、葉和仁中的白藜蘆醇平均含量分別是 90.37、86.20、78.01、58.56、38.21 μg/g 和 11.10 μg/g,其他各品種中均以根部最高,仁部最低,與花育20,花育22和花育31號相比,珠江1號的白藜蘆醇含量最高,花育31號白藜蘆醇含量最低[7]。

    2.1 白藜蘆醇的性質(zhì)

    2.1.1 藥用價值

    已有研究證明限制熱量攝取(caloric restriction,CR)能夠延長壽命,CR引起的壽命延長與上調(diào)去乙?;窼ir2(silence information regulator2)分不開。在哺乳動物中Sir2的類似物是SIRT1,CR是SIRT1強誘導(dǎo)劑,CR能增加SIRT1在這些哺乳動物的腦、心、腎等器官和組織中表達,增加SIRT1的基因表達則可模擬CR所引起的生理變化,包括延長壽命,這表明CR所引起的壽命改變是通過SIRT1起作用的,而白藜蘆醇可以作為SIRT1的激活劑,因而具有延長壽命的作用[8]。

    姚煜等[9]通過建立小鼠的衰老模型,加入白藜蘆醇干預(yù),觀測小鼠的抗衰老情況,實驗結(jié)果是白藜蘆醇干預(yù)組中小鼠的血清超氧化物歧化酶(SOD)含量升高;血清的丙二醛(MDA)含量降低;CD4+細胞數(shù)量不變,CD8+細胞數(shù)量升高;血清中IL-6,IL-8含量降低。SOD是清除體內(nèi)自由基的關(guān)鍵酶,而自由基及代謝產(chǎn)物引起的脂質(zhì)過氧化可導(dǎo)致老化和老年性疾??;MDA是自由基攻擊生物體降解的產(chǎn)物,MAD的多少可以間接反映組織損傷程度;隨著年齡的增長,胸腺細胞減少,分化出的T細胞數(shù)目也減少,吞噬和分泌干擾素能力下降,免疫功能也下下降,CD4+與CD8+比值降低說明白藜蘆醇可以延緩胸腺萎縮;血清中的IL-6和IL-8也可反映組織損傷程度。這些結(jié)果均表明白藜蘆醇具有一定的抗衰老作用。

    另外,白藜蘆醇還有抗癌和抗腫瘤的作用,白藜蘆醇不僅可以抑制細胞腫瘤的活性,還能通過抑制細胞的分泌物質(zhì)來抑制細胞增殖,從某種意義上來講是通過加速細胞分化來控制細胞增殖和癌變[10-11]。另有研究報道,白藜蘆醇對卵巢癌,結(jié)腸癌,乳腺癌,前列腺癌,胃癌,鼠肝細胞癌,白血病等多種癌細胞均有顯著的抑制作用[12-18]。但目前為止,尚未對抗腫瘤活性的機制達成一致,從眾多結(jié)果來看,白藜蘆醇主要是通過抑制環(huán)氧合酶、細胞色素酶,誘導(dǎo)解毒酶,促進腫瘤細胞分化、凋亡等途徑來達到抗腫瘤效果[19]。

    2.1.2 熱穩(wěn)定性和光穩(wěn)定性

    用分光光度計和高效液相色譜法分別對不同條件下的白藜蘆醇穩(wěn)定性進行了測量,結(jié)果為反式白藜蘆醇具有熱不穩(wěn)定性和光不穩(wěn)定性,對光照非常敏感,在加熱或光照下有一部分轉(zhuǎn)化成順式白藜蘆醇,但加熱并不影響白藜蘆醇的清除自由基的能力,反而清除自由基能力增強,所以可以利用白藜蘆醇這種性質(zhì),將其添加到化妝品中[20]。

    2.1.3 其他作用

    白藜蘆醇還有抗炎癥、抗過敏、調(diào)節(jié)新陳代謝、保肝、利肝等功效。在皮膚彈性和厚度的維持方面,有促進膠原蛋白分泌的功效[4]??梢詫⑵渥鳛樘砑觿┯糜诨瘖y品和保健品中,成為一種新型的美容保健品,以延緩人的衰老,保持肌膚水分[21-22]。作為植物性雌性激素添加劑,可以防止女性在絕經(jīng)后由于體內(nèi)雌激素分泌不足而引起的一系列疾病,如骨質(zhì)疏松,乳腺癌,子宮癌等[21]。

    3 花生紅衣中白藜蘆醇的提取和鑒定

    3.1 提取方法

    提取花生紅衣中白藜蘆醇的方法很多,目前常用的提取方法有纖維素酶提取法、堿提取法、溶劑提取法、微波和超聲波輔助提取法。

    3.1.1 纖維素酶法提取

    纖維素酶能夠水解纖維,促使植物細胞壁破裂,細胞的內(nèi)含物充分釋放出,有利于提取有效成分[23]。用纖維素酶法提取花生紅衣中的白藜蘆醇,最佳工藝條件是纖維素酶與紅衣粗粉的比例1∶500,酶解溫度50℃,pH為5.0,時間90 min,提取溶劑所用乙醇的體積分數(shù)為60%,與傳統(tǒng)提取工藝相比,提取率提高4.43 倍[24]。

    纖維素酶結(jié)合超聲波輔助有機溶劑提取白藜蘆醇,測得山葡萄渣中白藜蘆醇含量為1.187 mg/g,最佳工藝條件是酶解溫度55℃,超聲處理時間5 min,料液比 1∶30,提取時間 4 h[25]。

    3.1.2 堿法提取

    楊偉強等[26]首次研究堿法提取花生紅衣中白藜蘆醇的工藝條件,其提取工藝為:花生紅衣粉碎→稱量→堿液→浸泡→勻速攪拌→過濾→反復(fù)浸提→合并濾液→紫外分光光度法測定吸光值→計算白藜蘆醇得率。得出最佳的提取工藝條件為:pH為10,溫度40℃,提取時間2 h,提取4次,在此條件下白藜蘆醇的得率為0.196%。

    3.1.3 溶劑提取法

    溶劑提取法是一種最廣泛的提取方法,常用的溶劑有乙醇、乙醚、水、甲醇和乙酸乙酯等。常用的方法有浸漬法、滲漉法、煎煮法和回流提取法。目前,用溶劑法從虎杖、葡萄等中提取白藜蘆醇的研究較多,用80%乙醇和丙酮溶液按照1∶1的體積提取桑葚中白藜蘆醇,而從花生紅衣中用溶劑法提取白藜蘆醇的研究較少[27]。用乙醇溶液作為提取劑,對葡萄中白藜蘆醇進行提取,得到最佳提取提取工藝為溫度70℃,料液比 1∶20,提取時間 5 h,溶劑的濃度 80%[28]。

    3.1.4 微波和超聲波輔助法提取

    Ballard等[29]用微波輔助法提取花生紅衣中的多酚類物質(zhì),提取最佳工藝條件為微波功率855 W、輻照時間30 s、花生紅衣1.5 g,最佳料液比1∶25,以沒食子酸作為標(biāo)準(zhǔn),得到多酚的最大量為143.6 mg/g花生皮。與傳統(tǒng)方法相比,微波輔助法具有節(jié)時、效率高、提取率高等優(yōu)點。

    采用超聲波輔助乙醇提取花生紅衣中的多酚類物質(zhì),最佳料液比1∶16(g/mL),乙醇溶液體積分數(shù)80%,提取時間10 min,提取功率240 W?;ㄉt衣中多酚類物質(zhì)對豬油的抗氧化活性最優(yōu)質(zhì)量濃度為150 mg/L,在同等條件下,配制相同質(zhì)量濃度的VC、沒食子酸,對豬油的抗氧化性進行對比,結(jié)果是花生紅衣中多酚類物質(zhì)的還原性大于相同濃度下VC和沒食子酸的還原性[30]。通過超聲波輔助提取花生紅衣中白藜蘆醇,乙醇作為提取劑,在最佳工藝條件下白藜蘆醇的得率為0.036%,與傳統(tǒng)熱浸提取相比具有較高的效率,20 min就可以將有效成分提取完全[31]。

    3.2 鑒定方法

    常用的鑒定方法有熒光光度法、紫外分光光度法、高效液相色譜法、反相高效液相色譜法、氣相色譜法和顏色反應(yīng)等。

    3.2.1 熒光光度法、紫外分光光度法

    熒光光度法檢測白藜蘆醇含量的最佳條件為:激發(fā)波長324.06 nm,發(fā)射波長400.00 nm,白藜蘆醇在0~1.68×10-5mol/L范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系,此法的檢出限為8.14×10-10mol/L[32]。該方法成本低、操作簡單,準(zhǔn)確率高,檢測結(jié)果可靠,可用于生產(chǎn)和實驗研究中白藜蘆醇的測定。

    紫外分光光度法測定虎杖中白藜蘆醇的含量,在波長305 nm下,結(jié)果檢測濃度在3 μg/mL~16 μg/mL范圍內(nèi)與吸光度線性關(guān)系良好(r2=0.999 0)[33]。

    3.2.2 液相色譜法

    采用反相高效液相色譜法,色譜柱為Ultimate-C18,流動相為乙晴∶水(0∶70),流速為 1 mL/min,在 306 nm的波長下進行檢測,并用外標(biāo)法定量。測得白藜蘆醇在 1.22×10-5g/L~0.1 g/L范圍內(nèi)的檢出限為 3.6×10-7g/L。這種方法具有靈敏度高、分析速度快、線性范圍寬和重現(xiàn)性好的優(yōu)點[34]。用同種方法測定4種花生(珍珠紅1號、花育20、花育22、花育31號)中白藜蘆醇含量,流動相為乙晴∶水(20∶80),在303 nm波長、30℃柱溫、1 mL/min流速下進行色譜分析[7]。

    朱祥瑞等[27]用高效液相色譜法測得桑葚果皮、桑葚的韌皮和木質(zhì)部中白藜蘆醇的含量,結(jié)果顯示新鮮的桑樹果皮中白藜蘆醇的含量(0.128 mg/g)低于干燥的桑葚果皮中白藜蘆醇的含量(0.144 mg/g),而在木質(zhì)部中未檢測到白藜蘆醇。

    3.2.3 薄層掃描法

    利用熒光光譜層板上暗斑的熒光淬滅程度或者利用薄層色譜斑點(組分)發(fā)出的熒光強度進行定量分析[35]。陳敏等[36]用薄層掃描法測定了葡萄酒中順、反白藜蘆醇,樣品用C18固相柱提取,固體相是聚酰胺薄膜,展開劑用苯-甲酸-苯(體積比為 10∶5∶1),先進行分離;再用熒光掃描法進行定量,所得的4組分呈較好的線性關(guān)系,相關(guān)系數(shù)為0.997 2~0.999 6,平均回收率為97.1%~98.5%,白藜蘆醇測得率為2.0%~3.2%。

    3.2.4 氣相色譜法

    氣相色譜法對葡萄酒中的反式白藜蘆醇進行分析測定,該法簡便、樣品用量少、損失小,適合實際樣品的測定。實驗測得市售的7種葡萄酒中白藜蘆醇的含量,其中4種干紅葡萄酒中的反式白藜蘆醇的含量分別是 1.262、1.815、0.676、0.733 mg/L,而另外 3 種未檢測到反式白藜蘆醇的是紅葡萄酒。由于干紅葡萄酒是以紅葡萄為原料直接發(fā)酵完全后制得的,而紅葡萄酒是以干紅葡萄酒為原料直接稀釋得到的,所以干紅葡萄酒中的白藜蘆醇多于紅葡萄酒中的白藜蘆醇[37]。

    3.2.5 顏色反應(yīng)

    白藜蘆醇等黃酮類有些特征的顏色反應(yīng),將白藜蘆醇用不同的試劑或者進行光照實驗結(jié)果所得的顏色反應(yīng)也不同,它的紅外圖譜在3 250 cm-1處有酚羥基吸收峰,在 1 620 cm-1、1 540 cm-1、1 500 cm-1處有苯環(huán)吸收峰,在965 cm-1處有反式—C C—的特征吸收,700 cm-1處是順式—C C—的特征吸收[38]。

    4 應(yīng)用前景

    白藜蘆醇具有抗炎、抗過敏、保肝、利肝等多種有益于人體的生理功能,所以在保健食品中得以應(yīng)用,在國外已有白藜蘆醇相關(guān)的保健品上市,有膠囊、片劑和口服液等類型。白藜蘆醇是一種多酚類的抗氧化劑,將其用于化妝品中,可使皮膚延緩衰老且防止紫外線從而保護皮膚。無論是在食品、醫(yī)藥,還是在保健品行業(yè),白藜蘆醇都有著廣闊的應(yīng)用前景。而從通常會被廢棄的副產(chǎn)品資源——花生紅衣中提取,不僅可以充分利用資源,還能節(jié)約成本,為今后白藜蘆醇的提供一種可靠的來源。另外,開發(fā)花生紅衣中的白藜蘆醇,不會像“藥食同源”的虎杖那樣,造成“與藥爭源”的矛盾。

    5 結(jié)語

    目前,我國生產(chǎn)白藜蘆醇主要從虎杖、葡萄皮等中提取進行研究,對花生紅衣中白藜蘆醇的研究較少,而從虎杖中提取的白藜蘆醇受到工藝水平的限制,大多是使用粗產(chǎn)品,所以開發(fā)高純度的白藜蘆醇需要進一步的研究?;ㄉt衣中白藜蘆醇的提取方式較多,檢測方法也較為成熟,但是真正純化和分離出白藜蘆醇低聚物的報道卻較少,這有待于進一步的研究。大力開發(fā)白藜蘆醇及含白藜蘆醇的天然植物資源,可以促進種植業(yè)的發(fā)展并使資源得以充分利用,還可以促動農(nóng)業(yè)發(fā)展,提高當(dāng)?shù)亟?jīng)濟水平,具有良好的經(jīng)濟效益和社會效益。未來在低成本的花生紅衣中提取出高含量的白藜蘆醇,將在食品、保健品和醫(yī)藥等行業(yè)中得到更加廣泛的應(yīng)用。

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    Review on Resveratrol from Peanut Skin

    JIANG Yan,BAO Hui-juan,ZHANG Hai-yue
    (SchoolofChemicalandLifeScience,ChangchunUniversityofTechnology,Changchun130012,Jilin,China)

    Abstract:The extraction methods, identification, and applications of resveratrol from peanut skin were summarized.Research trends were also predicted.

    Key words:peanut skin;resveratrol;extraction;identification;applications

    DOI:10.3969/j.issn.1005-6521.2013.18.032

    吉林省科技發(fā)展計劃項目(YYZX201130-1)

    姜燕(1981—),女(漢),講師,博士,研究方向:食品包裝材料,果蔬貯藏保鮮技術(shù),天然產(chǎn)物開發(fā)。

    2012-12-04

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