槐果堿注射液的I期臨床耐受性研究

苗紅 葉龍彬 沈金芳 孫黎

（1.上海醫(yī)藥集團(tuán)股份有限公司中央研究院 上海 201203；2.上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬仁濟(jì)醫(yī)院 上海 200001）

槐果堿注射液為中藥注射劑，其活性成分槐果堿（sophocarpine）是從豆科槐屬植物苦參的干燥根及豆科槐屬植物苦豆子的種子中分離提取出的有效生物堿之一。本品在體內(nèi)外試驗(yàn)中，均顯示對(duì)柯薩奇B組病毒具有明顯的抑制作用，能對(duì)抗心律失常和調(diào)節(jié)免疫，改善心功能[1-2]。槐果堿注射液的擬臨床適應(yīng)證為急性成人型病毒性心肌炎的治療。本研究為槐果堿注射液的I期臨床研究，旨在考察槐果堿注射液在健康志愿者中的安全性和耐受性，為制定II期臨床試驗(yàn)給藥方案提供依據(jù)。

1 對(duì)象與方法

1.1 受試者選擇

1)入選標(biāo)準(zhǔn)：①年齡19～45歲，男女各半，身高體重指數(shù)為18～25；②無(wú)心、肝、腎、消化道、神經(jīng)系統(tǒng)、精神異常及代謝異常等病史；③經(jīng)全面體格檢查顯示心電圖、生命體征以及實(shí)驗(yàn)室檢查均無(wú)異常；④自愿簽署知情同意書(shū)。

2)排除標(biāo)準(zhǔn)：①妊娠期、哺乳期婦女；②明確的過(guò)敏性病史，對(duì)槐果堿注射液中各成分過(guò)敏者；③有神經(jīng)精神、心血管、肝臟、腎臟、血液學(xué)、代謝等系統(tǒng)的明確病史或其它顯著疾??；④實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果異常且有臨床意義者；⑤習(xí)慣性用藥，包括中草藥或入院前兩周內(nèi)服用過(guò)可能影響試驗(yàn)結(jié)果的藥物者；⑥試驗(yàn)前2個(gè)月內(nèi)失血或獻(xiàn)血超過(guò)200 ml者；⑦試驗(yàn)前2個(gè)月內(nèi)參加過(guò)其他臨床試驗(yàn)者；⑧嗜煙、嗜酒和藥物濫用者；⑨乙肝HBV或者丙肝HCV陽(yáng)性者。

3)終止試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)[3]：①在劑量遞增過(guò)程中出現(xiàn)了嚴(yán)重不良反應(yīng)；②半數(shù)受試者(如3/6)出現(xiàn)輕度不良反應(yīng)；③在達(dá)到最大劑量8 mg/kg時(shí)，雖未出現(xiàn)不良反應(yīng)，亦應(yīng)終止試驗(yàn)。

1.2 研究方法

1.2.1 試驗(yàn)藥物

槐果堿注射液，規(guī)格：200 mg/2 ml，批號(hào)：080402，由上海醫(yī)藥集團(tuán)股份有限公司提供。

1.2.2 給藥方法

將相應(yīng)劑量的藥物加于5%葡萄糖注射液500 ml內(nèi)靜脈滴注，滴速40～45滴/min，4 h滴注完畢，qd。單次給藥劑量組共1 d，多次給藥劑量組連續(xù)7 d。

1.2.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

本研究采用開(kāi)放性、劑量遞增試驗(yàn)設(shè)計(jì)，試驗(yàn)方案獲得上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬仁濟(jì)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)的批準(zhǔn)。

1）單次給藥耐受性試驗(yàn)——

根據(jù)槐果堿注射液前期動(dòng)物毒性試驗(yàn)結(jié)果及美國(guó)FDA建議的臨床試驗(yàn)起始劑量的計(jì)算方法，本研究起始劑量定為0.4 mg/kg。劑量遞增參照費(fèi)氏遞增法（改良Fibonacci法），試驗(yàn)設(shè)置9個(gè)劑量組（表1）。

表1 單次給藥試驗(yàn)劑量遞增方案

2）多次給藥耐受性試驗(yàn)——

多次給藥耐受性試驗(yàn)在單次給藥耐受性試驗(yàn)結(jié)束后進(jìn)行，預(yù)做2個(gè)劑量組。第1組劑量為單次給藥耐受性試驗(yàn)最大耐受量的基礎(chǔ)上下降1個(gè)劑量，如試驗(yàn)中出現(xiàn)明顯的不良反應(yīng)，則再下降1個(gè)劑量進(jìn)行第2組試驗(yàn)；如試驗(yàn)中未見(jiàn)明顯的不良反應(yīng)，則上升1個(gè)劑量進(jìn)行第2組試驗(yàn)。

1.3 觀(guān)察指標(biāo)

1)單次給藥：給藥前和給藥后1、4、5、12、24 h進(jìn)行心電圖和生命體征（血壓、心率、呼吸和體溫）檢查；給藥前和給藥后5、12、24 h進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢查（包括血、尿常規(guī)和血液生化等）。

2)多次給藥：每次給藥前、給藥后24 h進(jìn)行心電圖和生命體征（血壓、心率、呼吸和體溫）檢查；第1次給藥前、第4次給藥后及最后一次給藥后24 h進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢查（包括血、尿常規(guī)和血液生化等）；給藥前及最后一次給藥后24 h，男性受試者進(jìn)行精液常規(guī)檢查。

1.4 不良事件觀(guān)察

給藥后隨時(shí)觀(guān)察和記錄發(fā)生的不良事件。根據(jù)臨床前研究資料，本試驗(yàn)中重點(diǎn)觀(guān)測(cè)：神經(jīng)系統(tǒng)表現(xiàn)（如頭昏、驚厥）、心血管系統(tǒng)表現(xiàn)以及局部刺激，如試驗(yàn)過(guò)程中出現(xiàn)過(guò)敏、休克、呼吸循環(huán)衰竭等，按相應(yīng)的搶救方法進(jìn)行治療。藥物與不良事件間相關(guān)性分析，根據(jù)肯定有關(guān)、很可能有關(guān)、可能有關(guān)、可能無(wú)關(guān)、肯定無(wú)關(guān)進(jìn)行逐一判斷。

1.5 數(shù)據(jù)分析

采用SAS 8.2軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。各組計(jì)量指標(biāo)用（均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差）表示。各組組內(nèi)前后比較用配對(duì)t檢驗(yàn)，對(duì)各劑量組給藥前組間比較及前后差值組間比較采用方差分析。

2 結(jié)果

2.1 單次給藥耐受性試驗(yàn)

共42名受試者完成了0.4、0.8、1.5、2.5、4、5、6、7、8 mg/kg共9個(gè)劑量組的單次給藥耐受性試驗(yàn)。各組受試者的年齡、身高、體重、BMI等資料相近，各指標(biāo)組間的差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。給藥前各生命體征和實(shí)驗(yàn)室檢查指標(biāo)基本都在正常范圍內(nèi)。試驗(yàn)過(guò)程中發(fā)生3例不良事件：2.5 mg/kg劑量組有1例白細(xì)胞增多，程度為輕度，未采取措施，無(wú)合并用藥和合并治療，繼續(xù)試驗(yàn)，判斷與試驗(yàn)用藥的關(guān)系為很可能有關(guān)；7 mg/kg劑量組有2例尿酸升高，程度為輕度，未采取措施，無(wú)合并用藥和合并治療，繼續(xù)試驗(yàn)，判斷與試驗(yàn)用藥的關(guān)系為可能有關(guān)。其余受試者的生命體征（體溫、心率、血壓、呼吸）、心電圖、血尿常規(guī)、肝腎功能等各項(xiàng)檢查未見(jiàn)有臨床意義的改變。各組均未發(fā)生嚴(yán)重不良事件。

2.2 多次給藥耐受性試驗(yàn)

有17名受試者參加了7和8 mg/kg兩個(gè)劑量組的多次給藥耐受性試驗(yàn)，15人完成試驗(yàn)（其中7 mg/kg組完成7例，8 mg/kg組完成8例），退出2例。受試者的一般資料及基礎(chǔ)數(shù)據(jù)各組間的差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。給藥前各生命體征和實(shí)驗(yàn)室檢查指標(biāo)基本都在正常范圍內(nèi)。試驗(yàn)過(guò)程中發(fā)生2例不良事件：7 mg/kg劑量組有1例白細(xì)胞減少，程度為輕度，未采取措施，無(wú)合并用藥和合并治療，繼續(xù)試驗(yàn)，與試驗(yàn)用藥的關(guān)系為可能有關(guān)；8 mg/kg劑量組有1例精液檢查異常，程度為輕度，未采取措施，由于受試者的個(gè)人原因，沒(méi)能繼續(xù)隨訪(fǎng)至正常值。研究者判斷該不良事件和試驗(yàn)藥物可能無(wú)關(guān)。其余受試者的生命體征（體溫、心率、血壓、呼吸）、心電圖、血尿常規(guī)、肝腎功能等各項(xiàng)檢查未見(jiàn)有臨床意義的改變。未出現(xiàn)嚴(yán)重不良事件。

3 討論

槐果堿注射液曾經(jīng)作為院內(nèi)制劑用于病毒性心肌炎的治療，據(jù)報(bào)道其臨床給藥劑量為5～6 mg/kg，總有效率為93.73% ，未見(jiàn)肝腎功能及血液系統(tǒng)有損傷，少數(shù)患者出現(xiàn)惡心和蕁麻疹[2]。在本次槐果堿注射液的人體耐受性研究過(guò)程中，觀(guān)察到與試驗(yàn)藥物可能有關(guān)的不良事件主要為：白細(xì)胞增多（1例），血尿酸升高（2例），白細(xì)胞減少（1例），程度均為輕度，未采取措施，無(wú)合并用藥和合并治療，屬一過(guò)性。未發(fā)生試驗(yàn)方案中重點(diǎn)觀(guān)測(cè)的不良反應(yīng)，如神經(jīng)系統(tǒng)表現(xiàn)（頭昏、驚厥）、心血管系統(tǒng)表現(xiàn)以及局部刺激等，也未觀(guān)察到文獻(xiàn)報(bào)道的不良反應(yīng)。一方面這可能是藥品本身制備工藝的改進(jìn)，使得藥物的純度明顯提高，減少了有關(guān)物質(zhì)的不良反應(yīng)[4-5]。另一方面還與試驗(yàn)過(guò)程中嚴(yán)格控制靜脈滴注速度有關(guān)。事實(shí)上，臨床前通過(guò)Beagle犬的急性毒性試驗(yàn)已經(jīng)表明，降低滴速可以大幅提高槐果堿注射液的最大耐受劑量。本研究表明中國(guó)健康志愿者單次靜脈滴注0.4～8 mg/kg的槐果堿注射液，連續(xù)7 d靜脈滴注7～8 mg/kg槐果堿注射液是安全的，且人體可以耐受。因此，推薦II期臨床試驗(yàn)的擬用劑量為4～8 mg/kg，須嚴(yán)格控制靜脈滴速。

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