蔡曉云
(上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬新華醫(yī)院<崇明>,上海202150)
蛋白尿是許多腎病的主要檢測標(biāo)志,尿蛋白檢驗便是用來篩選和粗略估計尿蛋白含量的一種方法,其操作簡單、成本低廉、標(biāo)本采集方便,一直作為常規(guī)的檢查項目之一。當(dāng)腎小球和腎小管同時受損時,大、中、小相對分子質(zhì)量的蛋白均可排出[1]。但是,由于尿蛋白的檢測試驗只是對單次尿進(jìn)行檢測,所以檢測結(jié)果容易受到藥物、尿液濃縮以及稀釋程度的影響,常常不能準(zhǔn)確的反映人體內(nèi)蛋白尿的程度。尤其某些藥物不但可使檢驗結(jié)果出現(xiàn)錯誤解釋與誤診,并且可導(dǎo)致患者承受進(jìn)一步的不必要檢查,為患者增加醫(yī)療負(fù)擔(dān)。本文對影響尿蛋白檢驗結(jié)果原因進(jìn)行分析并提出改進(jìn)的措施。
1.1 一般資料:本院2011年1月至12月進(jìn)行尿蛋白檢驗的30000例患者,其中男17235例,女12765例,年齡18~89歲。全部患者均在本院接受尿蛋白檢驗。
1.2 方法
1.2.1 檢驗方法:由病房留取患者晨尿及24 h尿并送檢,日尿由患者日間留取送檢。使用全自動尿有形成分分析儀,采取10 g/L磺基水楊酸試劑及Vrine-H-11試紙帶,依據(jù)操作規(guī)程檢測[2]。
1.2.2 分析方法:根據(jù)檢驗結(jié)果分類匯總其中受到藥物因素、分泌物因素以及其他因素影響的患者例數(shù),并分析受影響標(biāo)本總數(shù)占總標(biāo)本數(shù)的百分比,以及各因素占受影響標(biāo)本總數(shù)的比例,結(jié)果以百分比形式表示。
1.3 統(tǒng)計學(xué)處理:分類匯總采取Excel軟件,以影響因素為分類字段,進(jìn)行分類匯總數(shù)據(jù)處理。
尿蛋白檢驗結(jié)果受影響的共計1258例,占受檢患者的4.19%。其中藥物因素472例,占總受影響患者例數(shù)的37.52%;分泌物因素對尿液污染的645例,占總受影響患者例數(shù)的51.27%;其他因素對尿液標(biāo)本污染的141例,占總受影響患者例數(shù)的11.21%。
3.1 影響尿蛋白檢驗結(jié)果原因:其機(jī)制多被認(rèn)為是因為干擾物質(zhì)可對尿蛋白的顏色反應(yīng)產(chǎn)生抑制或者可引起背景的增加,或者可提高蛋白質(zhì)顏色反應(yīng)程度,最終導(dǎo)致結(jié)果誤差的發(fā)生[3]。
3.1.1 生理因素:尿蛋白檢測易受一些因素的影響,可能導(dǎo)致假性結(jié)果。同時,當(dāng)尿蛋白僅為一些特殊的蛋白質(zhì)時,蛋白試紙法和磺基柳酸法均不敏感。
3.1.2 藥物因素:研究發(fā)現(xiàn),用一種藥時,檢測結(jié)果受藥物干擾的試驗占2%;服用兩種藥時占16%;同時服用三種或者四種藥物時可達(dá)66.8%;若患者同時服用5種藥,則試驗受干擾的可能性為100%[4]。某些藥物的結(jié)構(gòu)與被測定分析物質(zhì)的結(jié)構(gòu)比較相似,所以對被分析物的檢驗構(gòu)成了干擾。藥物可與分析物產(chǎn)生近似的成色反應(yīng),或者藥物本身就屬于有色物質(zhì),可對分光光度檢查法造成影響。還有一些藥物本身可產(chǎn)生熒光,對于分析物所產(chǎn)生的熒光反應(yīng)具有抑制或干擾作用。
3.1.3 標(biāo)本濃度的改變:患者的長期靜脈滴注會使提取的標(biāo)本稀釋,造成檢查的很多項目結(jié)果出現(xiàn)誤差。同時,也會出現(xiàn)標(biāo)本中因摻入高濃度的藥物,進(jìn)而造成許多檢驗結(jié)果發(fā)生變化,很多離子可以高出幾倍,甚至十幾倍。
3.1.4 標(biāo)準(zhǔn)品問題:臨床上所有蛋白質(zhì)測定所選擇標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)的品質(zhì)等因素都會對待測蛋白質(zhì)有很大影響。標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)與待測蛋白質(zhì)同屬于一種類型,以尿蛋白作為標(biāo)準(zhǔn),而不以血清蛋白作為標(biāo)準(zhǔn),可有效減少試劑對于不同蛋白間的敏感度差異性。
3.1.5 不同相對分子質(zhì)量蛋白對測定方法的影響:有研究表明,不同相對分子質(zhì)量的尿蛋白對乙醇磷鎢酸-雙縮脲法和考馬斯亮藍(lán)法影響較?。?]。低相對分子質(zhì)量蛋白尿容易出現(xiàn)假性低的檢驗結(jié)果,特別是在使用三氯乙酸(TCA)雙縮脲法以及麗春紅法進(jìn)行分析時。高相對分子質(zhì)量蛋白尿則較少出現(xiàn)假性低的檢驗結(jié)果,其結(jié)果差異多與TCA對于低相對分子質(zhì)量蛋白的不完全沉淀具有一定關(guān)系。
3.2 改進(jìn)措施
3.2.1 預(yù)防措施:出現(xiàn)異常時,檢驗工作者須主動與臨床醫(yī)師進(jìn)行聯(lián)系溝通,詳細(xì)詢問患者的全部用藥史。檢驗前須確認(rèn)試劑是否出現(xiàn)污染、變質(zhì)、過期等情況,標(biāo)本的新鮮程度、血液標(biāo)本是否出現(xiàn)溶血、采取哪種方法、與質(zhì)控物試驗的結(jié)果是否相符,使用試劑的配制過程是否符合相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)要求,采取分光光度儀進(jìn)行測定時是否有顏色干擾問題,試劑盒的品質(zhì)及清潔狀態(tài),甚至分析儀器性能等[6]。如有必要可采取健康人的標(biāo)本進(jìn)行對照試驗,如果對照結(jié)果也出現(xiàn)異常,則應(yīng)考慮到檢驗技術(shù)環(huán)節(jié)的問題,可基本排除藥物對于試驗結(jié)果的干擾。反之,若檢驗結(jié)果異常,而對照試驗的結(jié)果正常,則可排除檢驗技術(shù)環(huán)節(jié)的干擾,應(yīng)考慮到藥物干擾環(huán)節(jié)[7]。
3.2.2 標(biāo)本的處理:可對樣本給予稀釋,使干擾物質(zhì)的濃度降低到一事實(shí)上水平,從而使其產(chǎn)生的影響降低到最小;沉淀蛋白質(zhì)樣品,去掉游離干擾物質(zhì);凝膠濾過層蛋白質(zhì)樣品,一般可采用的沉淀試劑有醋酸、三氯乙酸、芐烷氯銨、磺基水楊酸、鎢酸、芐乙氯銨等[8]。
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