肺經(jīng)草化學(xué)成分研究

李雪晶，李雪松，劉展元，吳澤宇，周小江

（湖南中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，湖南 長(zhǎng)沙410208）

肺經(jīng)草又名大肺筋草，收載于《四川省中草藥標(biāo)準(zhǔn)》（1979年版），為傘形科植物薄片變豆菜Sanicula lamelligera Hance的干燥全草[1]，在四川省乃至西南地區(qū)的民間都在使用，主要用于感冒咳嗽，尤其是流行性感冒，具有分布面廣、資源豐富的特點(diǎn)[2]。肺經(jīng)草主要含有機(jī)酸、三萜皂苷、倍半萜類成分[3]，前期研究表明：其乙酸乙酯提取部位和正丁醇提取部位具有較好的止咳化痰和抗甲型H1N1流感病毒作用[4-5]，為了開發(fā)利用這一藥用資源，尋找其抗甲型H1N1流感病毒的活性成分，作者采用硅膠、反相硅膠、Sephadex LH-20等柱色譜對(duì)肺經(jīng)草的化學(xué)成分進(jìn)行研究，從正丁醇提取部位中分離了6個(gè)化合物，分別為：daucosterol(Ⅰ)、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷 (Ⅱ)、5-羥基-7，3′，4′-三甲氧基黃酮 (Ⅲ)、n-Butyl-D-fructofuranoside(Ⅳ)、3-甲氧基-4-羥基苯甲醛(Ⅴ)、3，4-二羥基苯甲醛(Ⅵ)。所有的化合物均為首次從該植物中分離得到。

1 儀器與材料

Bruker AM-400和Bruker DRX-500核磁共振波譜儀(以TMS為內(nèi)標(biāo))；Büchi型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(瑞士Büchi公司)；XRC-1型顯微熔點(diǎn)儀(四川大學(xué)科儀廠)；Sephadex LH-20凝膠(Amersham Biosciences公司)；RP-18反相硅膠(40～63μm，Daiso公司)，柱色譜硅膠(200目～300目)、硅膠H和薄層色譜硅膠GF254(青島海洋化工廠)；所用試劑均為分析純。

肺經(jīng)草于2008年7月采自四川省峨眉山，經(jīng)周小江教授鑒定為傘形科植物薄片變豆菜Sanicula lamelligera Hance的干燥全草。

2 提取與分離

肺經(jīng)草10 kg，切碎后加甲醇回流提取2次（80 L×2），每次2 h，濾過(guò)，合并提取液，減壓回收甲醇，加水混懸，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，減壓回收相應(yīng)的溶媒得各部分流浸膏。正丁醇部分浸膏110 g，經(jīng)正相硅膠柱色譜、反相硅膠柱色譜、Sephadex LH-20凝膠柱色譜及重結(jié)晶等方法，從中分離得到化合物Ⅰ(12 mg)、Ⅱ(5 mg)、Ⅲ(26 mg)、Ⅳ(12 mg)、Ⅴ(11 mg)、Ⅵ(14 mg)。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物Ⅰ：白色粉末，易溶于甲醇、丙酮。1HNMR(400 MHz，CD3OD)δH：0.67(3H，s，H-18)，0.82(3H，m，H-27)，0.84(3H，m，H-29)，0.91(3H，m，H-26)，0.93(3H，s，H-19)，0.97(3H，m，H-21)，1.38(1H，m，H-14)，3.66(1H，m，H-3)，5.34(1H，m，H-6)，4.91(1H，d，J=5.2 Hz，Glc H-1)，3.14-3.54(6H，m，Glc H-2，Glc H-6)；13C-NMR(100 MHz，CD3OD)δC：37.5(C-1，t)，30.3(C-2，t)，78.0(C-3，d)，39.4(C-4，t)，140.9(C-5，s)，122.0(C-6，d)，32.2(C-7，t)，32.1(C-8，d)，50.4(C-9，d)，37.0(C-10，s)，21.3(C-11，t)，40.0(C-12，t)，42.5(C-13，s)，56.9(C-14，d)，24.7(C-15，t)，28.5(C-16，t)，56.3(C-17，d)，12.0(C-18，q)，19.1(C-19，q)，36.5(C-20，d)，19.3(C-21，q)，34.1(C-22，t)，26.4(C-23，t)，46.0(C-24，d)，29.5(C-25，d)，19.5(C-26，q)，20.0(C-27，q)，23.4(C-28，t)，12.2(C-29，q)，102.6(Glc-1)，75.4(Glc-2)，78.7(Glc-3)，71.7(Glc-4)，78.6(Glc-5)，62.8(Glc-6)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[6]基本一致，故確定為daucosterol。

化合物Ⅱ：黃色粉末，薄層色譜檢識(shí)：噴以AlCl3可見黃色熒光。1H-NMR(400 MHz，C5D5N)δH：15.59(1H，5-OH)，7.88(2H，d，J=8.2 Hz，H-2，H-6′)，7.18(2H，d，J=8.2 Hz，H-3′，H-5′)，7.09(1H，s，H-3)，6.90(1H，s，H-8)，6.84 (1H，s，H-6)，5.85 (1H，d，J=7.1 Hz，glc H-1)。13C-NMR(100 MHz，C5D5N)δC：165.0(C-2，s)，104.0(C-3，d)，182.9(C-4，s)，163.0(C-5，s)，101.8(C-6，d)，164.0(C-7，s)，95.4(C-8，d)，157.9(C-9，s)，106.6(C-10，s)，122.0(C-1′，s)，129.1(C-2′，d)，116.9(C-3′，d)，162.6(C-4′，s)，116.9(C-5′，d)，129.1(C-6′，d)，100.7(C-1″，glc-1)，74.9(C-2″，glc-2)，78.4(C-3″，glc-3)，71.1(C-4″，glc-4)，79.3(C-5″，glc-5)，62.4(C-6″，glc-6)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[7]基本一致，故確定為芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷。

化合物Ⅲ：黃色針狀結(jié)晶 (甲醇-三氯甲烷)，mp167～169℃。ESI-MS m/z：329[M+H]+。1HNMR(400 MHz，C5D5N)δH：7.07(1H，s，H-3)，6.60(1H，s，H-6)，6.73 (1H，s，H-8)，7.57 (1H，s，H-2')，7.06(1H，d，J=8.6 Hz，H-5')，7.66(1H，d，J=8.6 Hz，H-6')，13.60(1H，s，5-OH)，3.82(3H，s，-OCH3)，3.79(3H，s，-OCH3)，3.72(3H，s，-OCH3)。13C-NMR(100 MHz，C5D5N)δC：164.4(C-2，s)，104.9(C-3，d)，182.9(C-4，s)，162.7(C-5，s)，98.8(C-6，d)，166.0(C-7，s)，93.1(C-8，d)，158.2(C-9，s)，106.0(C-10，s)，123.2(C-1'，s)，110.0(C-2'，d)，149.6(C-3'，s)，153.2(C-4'，s)，112.20(C-5'，d)，120.7(C-6'，d)，56.5(-OCH3)，56.4(-OCH3)，56.2(-OCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[8]基本一致，故確定為5-羥基-7，3′，4′-三甲氧基黃酮。

化合物Ⅳ：白色粉末，溶于甲醇。1H-NMR(400 MHz，CDCl3)δH： 0.90 (3H，t，J=7.3 Hz，H-4)，1.47(2H，m，H-3)，1.53(2H，m，H-2)。13C-NMR(100 MHz，CDCl3)δC：60.6(C-1，t)，32.0(C-2，t)，19.2(C-3，t)，13.8(C-4，q)，61.3(C-1'，t)，107.7(C-2'，s)，81.4(C-3'，d)，77.3(C-4'，d)，82.8(C-5'，d)，64.4(C-6'，t)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[9]一致，故確定為n-Butyl-D-fructofuranoside。

化合物Ⅴ：白色固體，溶于氯仿、丙酮和甲醇。1H-NMR (500 MHz，CD3COCD3)δH：9.73 (1H，s，-CHO)，7.41 (1H，dd，J=1.9 Hz，7.7 Hz，H-6)，7.42(1H，d，J=2.1 Hz，H-2)，6.93(1H，d，J=7.7 Hz，H-5)，3.92(3H，s，-OCH3)。13C-NMR(125 MHz，CD3COCD3)δC：130.5 (C-1，s)，116.3 (C-2，d)，149.6(C-3，s)，154.7(C-4，s)，116.3(C-5，d)，127.9(C-6，d)，192.9(-CHO)，56.3(-CH3O)，以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[10]一致，故確定為3-甲氧基-4-羥基苯甲醛。

化合物Ⅵ：淡黃色固體，溶于氯仿、丙酮和甲醇。1H-NMR(500MHz，CD3OD)δH：7.30(1H，d，J=1.8Hz，H-2)，7.28 (1H，dd，J=1.8 Hz，4.1 Hz，H-6)，6.90(1H，d，J=8.2Hz，H-5)，9.68(1H，s，-CHO)，以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[11]基本一致，故確定為3，4-二羥基苯甲醛。

致謝：特別感謝中國(guó)科學(xué)院昆明植物研究所植物化學(xué)與西部植物資源持續(xù)性利用國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室程永現(xiàn)研究員在波譜測(cè)試和結(jié)構(gòu)鑒定中提供的幫助。

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