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    類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎滑液MMPs表達(dá)與血清免疫球蛋白的相關(guān)性研究

    2013-04-02 10:12:22湖北省武漢市普仁醫(yī)院風(fēng)濕免疫科湖北武漢430080
    吉林醫(yī)學(xué) 2013年14期
    關(guān)鍵詞:滑膜類風(fēng)濕軟骨

    周 濤 (湖北省武漢市普仁醫(yī)院風(fēng)濕免疫科,湖北 武漢 430080)

    類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(RA)的病因和發(fā)病機(jī)制目前尚不明確,RA是一種免疫介導(dǎo)以滑膜炎為病理特征的自身免疫病,關(guān)節(jié)破壞是RA最主要的表現(xiàn),體液免疫參與RA的發(fā)?。?]。近些年研究表明,基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)可降解軟骨和骨質(zhì),在關(guān)節(jié)的破壞中占有極重要地位。筆者通過檢測RA患者和健康者血清免疫球蛋白及滑膜液MMP-1、MMP-3水平,探討體液免疫與MMPs在RA發(fā)病過程中的變化和兩者之間的關(guān)系。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料:42例RA患者為2010年10月~2012年5月在武漢市普仁醫(yī)院風(fēng)濕免疫科住院患者,男13例,女29例,年齡27~62歲,平均(47.91±13.79)歲;平均病程(5.3± 3.28)年;正常對照組27例,男10例,女17例,平均(45.64± 11.27)歲。兩組年齡、性別、職業(yè)構(gòu)成等方面比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。RA患者均符合美國風(fēng)濕病學(xué)會2010年(ACR)修訂的RA診斷標(biāo)準(zhǔn),排除其他風(fēng)濕性疾病、感染、腫瘤、嚴(yán)重肝腎損害及心腦血管疾病等;根據(jù)RA疾病活動度積分(DAS28)將RA患者分為兩組:DAS28評分≥3.2為RA活動組(男7例,女15例),DAS28評分≤2.6為RA緩解組(男6例,女14例),兩組一般資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),具有可比性。

    1.2 方法

    1.2.1 取樣:①空腹取肘中靜脈血3 ml,3 000 r/min,離心15 min,分離血清,用1.5 ml Eppendorf管分裝,置-20℃保存待測。②抽取膝關(guān)節(jié)滑液1~2 ml,抽取前做關(guān)節(jié)屈伸運動,保障關(guān)節(jié)內(nèi)滑液混合均勻,并無血液混入。

    1.2.2 檢測:采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測滑液組織中MMP-1及MMP-3的表達(dá)(MMP-1,MMP-3檢測試劑盒購自上海西唐生物科技有限公司);采用免疫散射比濁法測定滑膜液中免疫球蛋白IgG及IgM水平,兔抗人IgG、IgM血清由上海長征醫(yī)學(xué)科學(xué)有限公司提供.采用日立7600~020全自動生化分析儀進(jìn)行檢測。

    1.3 統(tǒng)計學(xué)方法:所有數(shù)據(jù)用SPSS17.0軟件處理,試驗數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示,采用ANOVA進(jìn)行組間差異比較,MMPs與免疫球蛋白的相關(guān)性采用線性回歸分析,P<0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1 滑膜液中MMP-1及MMP-3的表達(dá)情況:MMP-1及MMP-3在RA活動組中的表達(dá)均顯著高于RA緩解組和正常對照組(P<0.05)。詳見表1。

    表1 滑膜液中MMP-1及MMP-3的表達(dá)情況比較(±s)

    表1 滑膜液中MMP-1及MMP-3的表達(dá)情況比較(±s)

    注:與正常對照組比較,①P<0.05;RA活動組與緩解組比較,②P<0.05

    組別 例數(shù) MMP-1(ng/ml) MMP-3(ng/ml) RA活動組 22 179.54±53.82② 243.79±78.56①②RA緩解組 20 118.41±35.74① 165.34±50.27①正常對照組27 47.6±25.93 76.61±36.50

    2.2 血清中IgG及IgM表達(dá)情況:IgG及IgM在RA活動組中的表達(dá)均顯著高于RA緩解組(P<0.05)。詳見表2。

    表2 血清中IgG及IgM表達(dá)情況(±s)

    表2 血清中IgG及IgM表達(dá)情況(±s)

    注:與正常對照組比較,①②P<0.05;RA活動組與緩解組比較,③P<0.05

    組別 例數(shù) IgG(μg/ml) IgM(μg/ml) RA活動組 22 19.47±3.72①③ 6.18±0.46①③RA緩解組 20 14.62±2.59② 2.75±0.38正常對照組27 10.71±5.22 2.23±3.15

    2.3 RA患者滑膜液中MMP-1及MMP-3與血清中IgG及IgM的相關(guān)性:RA患者滑膜液中MMP-1、MMP-3與血清中IgG及IgM均呈現(xiàn)直線正相關(guān)關(guān)系(P<0.05)。詳見表3。

    表3 RA患者滑膜液中MMP-1及MMP-3與血清中IgG及IgM的相關(guān)性

    3 討論

    目前RA被認(rèn)為是一種病因不明的、以反復(fù)發(fā)作滑膜炎為主要病理表現(xiàn)的自身免疫病。近些年來研究表明,體液免疫在RA發(fā)病過程中發(fā)揮著重要作用,免疫球蛋白是一組具有抗體活性的蛋白質(zhì),血清IgG、IgM水平可作為RA病情、療效評價的客觀指標(biāo);本試驗研究結(jié)果顯示,RA患者隨著病情的緩解,血清IgG、IgM的表達(dá)水平顯著下降,與上述結(jié)論一致。RA致病因子通過活化Th細(xì)胞,激活B細(xì)胞分泌大量免疫球蛋白,形成大量免疫復(fù)合物,沉積于關(guān)節(jié)滑膜處,誘導(dǎo)滑膜炎性反應(yīng)的產(chǎn)生;另外活化的Th細(xì)胞分泌多種細(xì)胞因子及炎性反應(yīng)介質(zhì),亦會進(jìn)一步加劇免疫聯(lián)級反應(yīng),加重關(guān)節(jié)滑膜組織損傷[2]。影像學(xué)研究顯示,RA患者在發(fā)病早期就會表現(xiàn)出顯著的軟骨侵蝕及骨髓內(nèi)水腫,隨病情發(fā)展軟骨及骨質(zhì)破壞進(jìn)一步加劇,這與RA患者滑膜液中大量表達(dá)基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)有著密切聯(lián)系;研究發(fā)現(xiàn),MMPs的異常表達(dá)可降解關(guān)節(jié)軟骨及骨質(zhì),從而造成關(guān)節(jié)破壞,參與RA發(fā)?。?]; MMP-3被認(rèn)為是導(dǎo)致軟骨降解的最重要的蛋白酶,不僅能直接降解軟骨和骨質(zhì)對RA患者關(guān)節(jié)產(chǎn)生破壞,還能激活間質(zhì)膠原酶MMP-1發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)破壞關(guān)節(jié),而蛋白水解酶的釋放和其后在基質(zhì)中的活化破壞了基質(zhì)屏障,導(dǎo)致膠原崩解和蛋白多糖的分裂,從而導(dǎo)致軟骨細(xì)胞生存的微環(huán)境惡化。釋放的炎性細(xì)胞因子參加關(guān)節(jié)炎性反應(yīng),軟骨細(xì)胞無法從基質(zhì)中獲得充分的營養(yǎng)而致功能受損,形成基質(zhì)-軟骨細(xì)胞之間惡性循環(huán),導(dǎo)致關(guān)節(jié)軟骨結(jié)構(gòu)可溶性增加。同時血管增生形成血管翳-軟骨結(jié)合區(qū)纖維增生,造成關(guān)節(jié)變形畸形強(qiáng)直致殘[4]。本文試驗結(jié)果顯示,RA患者滑膜液MMP-1、MMP-3均顯著升高,當(dāng)RA病情緩解時,MMP-1、MMP-3表達(dá)亦降低,這與文獻(xiàn)報道一致。本試驗對RA患者血清免疫球蛋白IgG、IgM與滑膜液MMP-1、MMP-3的相關(guān)性分析表明,MMPs與免疫球蛋白呈直線相關(guān),提示RA致病過程中免疫球蛋白的異常表達(dá)會促進(jìn)局部MMP-1、MMP-3水平的上調(diào),這可能是加劇軟骨和骨質(zhì)破壞的重要過程。筆者認(rèn)為,抑制RA體液免疫反應(yīng),下調(diào)MMPs表達(dá)可能是緩解RA骨質(zhì)破壞的有效治療方法。

    [1] 潘繼承,倪黎剛,朱 建.聯(lián)合檢測RA患者血清IG、C、ESR、RF和CRP的臨床意義[J].江蘇醫(yī)藥,2011,7(5):598.

    [2] 徐 雯,陶 娟.血清免疫球蛋白、補體水平與初診類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎活動度的相關(guān)性[J].臨床醫(yī)藥實踐雜志,2008,17(10):815.

    [3] 盧 潔,魏國忠,戴利亞.IL-17、MMP-3在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者滑膜液及血漿中的表達(dá)及意義[J].放射免疫學(xué)雜志,2011,24(2):205.

    [4] 周沈賢,金忠棋,陳 健.基質(zhì)金屬蛋白酶及活性酶在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎上表達(dá)研究[J].浙江創(chuàng)傷外科,2006,11(1):12.

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