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    不同檢測系統(tǒng)間部分實(shí)驗(yàn)室檢查項(xiàng)目測定結(jié)果的比對研究和偏倚評估

    2013-04-02 10:12:20李愛麗黃麗芳曾健兵盧建華廣東省韶關(guān)市第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科廣東韶關(guān)512000
    吉林醫(yī)學(xué) 2013年14期
    關(guān)鍵詞:全自動(dòng)分析儀試劑

    李愛麗,黃麗芳,曾健兵,盧建華 (廣東省韶關(guān)市第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科,廣東 韶關(guān) 512000)

    自動(dòng)生化分析儀是將實(shí)驗(yàn)室檢查分析過程中的取樣、加試劑、去干擾物、混合、保溫反應(yīng)、自動(dòng)檢測、數(shù)據(jù)處理、試驗(yàn)后的清洗等步驟進(jìn)行自動(dòng)化操作的儀器。自動(dòng)生化分析儀使臨床生物化學(xué)檢測實(shí)現(xiàn)了自動(dòng)化、機(jī)械化。隨著檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)的發(fā)展,各類全自動(dòng)生化分析儀廣泛應(yīng)用于臨床,往往同一醫(yī)院會(huì)采用不同儀器、試劑和方法檢測相同的項(xiàng)目,以滿足不同功能分區(qū)的需求。由不同儀器、試劑、校準(zhǔn)品和質(zhì)控品配套所構(gòu)成的檢測系統(tǒng)是不完全一致的,其結(jié)果勢必影響到臨床判斷和對患者病情變化的監(jiān)測。因此,如何進(jìn)行比對試驗(yàn)、如何評估不同檢測系統(tǒng)檢驗(yàn)結(jié)果的偏倚,以及如何判斷不同檢測系統(tǒng)結(jié)果的可比性,是目前檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)界關(guān)注和討論的熱點(diǎn)。本研究按照美國國家臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)(NCCLS)EP9-A2文件《用患者樣品進(jìn)行方法比對及偏倚評估》的要求[1],對我科室的兩臺(tái)全自動(dòng)生化儀邁瑞B(yǎng)S800和BeckmanAU-5811的檢測結(jié)果進(jìn)行比對分析和偏倚評估,以驗(yàn)證分析系統(tǒng)的有效性、可比性和檢測結(jié)果的一致性。

    1 材料與方法

    1.1 材料

    1.1.1 儀器、試劑:Beckman AU5811全自動(dòng)生化分析儀電極部分試劑和校準(zhǔn)品采用貝克曼原裝試劑及校準(zhǔn)品,其余檢測項(xiàng)目試劑采用寧波美康產(chǎn)品,實(shí)驗(yàn)參數(shù)按照說明書設(shè)定;邁瑞B(yǎng)S800全自動(dòng)生化分析儀,試劑和校準(zhǔn)品均采用深圳邁瑞公司生產(chǎn)的原裝試劑及校準(zhǔn)品,實(shí)驗(yàn)參數(shù)廠家工程師導(dǎo)入。兩臺(tái)儀器所用質(zhì)控品為美國伯樂公司的質(zhì)控品。

    1.1.2 檢測系統(tǒng):Beckman AU5811全自動(dòng)生化分析儀參加衛(wèi)生部室間質(zhì)評及廣東省臨檢中心室間質(zhì)評成績合格,且室內(nèi)質(zhì)控日間CV均小于CLIA’88規(guī)定的室間質(zhì)量評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)允許誤差范圍的1/2,因此以Beckman AU5811全自動(dòng)生化分析儀為比較系統(tǒng),邁瑞B(yǎng)S800全自動(dòng)生化分析儀作為實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)。

    1.2 比對項(xiàng)目:丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、尿素(BUN)、肌酐(CR)、尿酸(UA)、血糖(GLU、鉀(K+)、鈉(Na+)、氯(Cl-)。

    1.3 方法

    1.3.1 實(shí)驗(yàn)條件:嚴(yán)格按照我室的SOP文件對儀器進(jìn)行維護(hù)保養(yǎng),確定儀器處于良好狀態(tài)。實(shí)驗(yàn)前在兩臺(tái)儀器上分別測定高值和中值質(zhì)控血清,測定項(xiàng)目為本實(shí)驗(yàn)室所開展的生化檢測項(xiàng)目,對失控的項(xiàng)目校準(zhǔn)后重新測定,所有項(xiàng)目均在控再進(jìn)行樣本的測定。

    1.3.2 數(shù)據(jù)收集及處理:每天從我院門診、體檢及住院患者中隨機(jī)選取8份在線性范圍內(nèi)的高、中、低三個(gè)濃度的新鮮無溶血、無脂濁血清(可以減少因用標(biāo)準(zhǔn)品而可能造成的基質(zhì)效應(yīng)),且參考范圍以外的標(biāo)本在50%以上,在兩臺(tái)生化分析儀上同時(shí)進(jìn)行比對項(xiàng)目的測定,8份樣本都按照1~8的順序測定,再按照8~1的順序重復(fù)測定,連續(xù)進(jìn)行5天,記錄測定結(jié)果,不采用明確有人為誤差的結(jié)果。同時(shí)選用同一批號(hào)的伯樂公司的高值和中值質(zhì)控血清連續(xù)20次的檢測結(jié)果,計(jì)算出均值、標(biāo)準(zhǔn)差(s)和變異系數(shù)(cv)來評價(jià)兩個(gè)監(jiān)測系統(tǒng)的精密度。

    1.3.3 離群值檢驗(yàn):計(jì)算每個(gè)標(biāo)本重復(fù)測定值間的差值、每個(gè)標(biāo)本測定值的均值及兩種方法測定結(jié)果均值間的差值,按EP9-A2文件進(jìn)行離群值檢驗(yàn)。

    1.3.4 比較系統(tǒng)(X)測定范圍的檢驗(yàn):用相關(guān)系數(shù)(r)粗略估計(jì)X的分布范圍是否合適,若r>0.975或r2>0.95,則認(rèn)為X范圍合適,直線回歸統(tǒng)計(jì)的斜率和截距可靠。

    1.3.5 計(jì)算線性回歸方程:Y實(shí)驗(yàn)=bX比較+a

    1.3.6 計(jì)算方法間的系統(tǒng)誤差:根據(jù)臨床使用要求,將各個(gè)項(xiàng)目給定的醫(yī)學(xué)決定水平濃度(XC)代入回歸方程,計(jì)算Y與X之間的系統(tǒng)誤差(SE)。SE=|Y-X|;相對偏差(SE%)= (SE/XC)×100%。

    1.3.7 臨床可接受性能判斷:以方法學(xué)比較評估的SE%不大于1/2美國臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)部門修正法規(guī)(CLIA’88)允許總誤差屬臨床可接受水平[2],判斷比較系統(tǒng)與實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)檢驗(yàn)結(jié)果的可比性。

    2 結(jié)果

    2.1 兩種檢測系統(tǒng)精密度分析:根據(jù)質(zhì)控品連續(xù)20次的盲測結(jié)果,計(jì)算均值和變異系數(shù)以評價(jià)不同檢測系統(tǒng)的精密度,結(jié)果見表1。AST、ALT的單位為U/L,BUN、GLU、K、NA、CL為mmol/L,CR、UA為μmol/L。

    表1 儀器精密度分析

    2.2 兩種檢測系統(tǒng)的相關(guān)性和可接受性能的評價(jià):每天收集8份濃度各不相同的患者血清標(biāo)本,連續(xù)測定5 d,檢測系統(tǒng)Y與檢測系統(tǒng)X之間計(jì)算變異系數(shù),與允許誤差范圍比較以及相關(guān)分析、回歸分析(相關(guān)系數(shù)r>0.95,則認(rèn)為X的取值范圍合適,數(shù)據(jù)滿足統(tǒng)計(jì)要求,回歸統(tǒng)計(jì)的斜率和截距可靠),結(jié)果見表2。

    表2 兩種檢測系統(tǒng)檢測結(jié)果相關(guān)與回歸分析

    2.3 兩種檢測系統(tǒng)可接受性能的評價(jià):將各個(gè)檢測項(xiàng)目的醫(yī)學(xué)決定水平代入各自的回歸方程,計(jì)算SE和SE%,判斷可接受性,見表3。結(jié)果表明,由于GLU檢測的回歸統(tǒng)計(jì)斜率和截距不可靠,所以其醫(yī)學(xué)決定水平的可接受性因SE%>5%而判斷為“不可接受”,除此之外,其他比對項(xiàng)目的檢測結(jié)果符合臨床要求。

    表3 兩檢測系統(tǒng)可接受性能的評價(jià)

    3 討論

    檢測系統(tǒng)包括完成一個(gè)檢測項(xiàng)目所需要的儀器、試劑、校準(zhǔn)品、操作程序、質(zhì)量控制、保養(yǎng)計(jì)劃等的組合[3]。各個(gè)檢測系統(tǒng)對同一份標(biāo)本的同一項(xiàng)目檢測結(jié)果應(yīng)具有可比性。不同儀器之間,由于系統(tǒng)配置的不一致,如檢測方法、反應(yīng)杯體積、試劑的不同、反應(yīng)介質(zhì)、吸樣方式,以及檢測光路等都存在差別,常導(dǎo)致檢測結(jié)果的不一致,這種不同實(shí)驗(yàn)室之間,或同一實(shí)驗(yàn)室的不同儀器之間所存在的差別,常常被人們所忽略,從而導(dǎo)致檢驗(yàn)結(jié)果的不確定性,常會(huì)給臨床帶來混亂。如何使不同的檢測系統(tǒng)一,使檢測結(jié)果相一致,已成為當(dāng)今臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化和規(guī)范化必須解決的問題。

    本實(shí)驗(yàn)室目前有兩臺(tái)生化分析儀用于常規(guī)生化檢測,AU5811主要用于住院患者標(biāo)本的檢測,BS800主要用于門診患者和體檢標(biāo)本的檢測。為確保不同儀器檢測同一項(xiàng)目的結(jié)果一致性,目前不同生化分析儀間比對多采用NCCLS的EP9-A2文件進(jìn)行[4-8]。為確保不同儀器檢測同一項(xiàng)目的結(jié)果一致性,本研究參考NCCLS的EP9-A2文件,對不同檢測系統(tǒng)的九項(xiàng)生化結(jié)果進(jìn)行比對。從表1可以看出,兩臺(tái)儀器精密度均較高,且兩個(gè)水平質(zhì)控物測定結(jié)果非常接近。從表2可知,兩檢測系統(tǒng)相關(guān)性分析的相關(guān)系數(shù)除 GLU外均大于0.975,表明數(shù)據(jù)分布范圍較好,作回歸統(tǒng)計(jì)時(shí)其斜率和截距可靠,可以用醫(yī)學(xué)決定水平處的值來評估實(shí)驗(yàn)檢測系統(tǒng)的系統(tǒng)誤差能否為臨床所接受。同時(shí)我們也看到,兩臺(tái)儀器還是有一定的誤差,個(gè)別項(xiàng)目的斜率不是特別接近1,回歸方程的截距也較大,產(chǎn)生的原因可能是兩臺(tái)儀器的檢測系統(tǒng)不完全一樣。表3結(jié)果表明,所研究的九項(xiàng)實(shí)驗(yàn)室檢查測定值在兩系統(tǒng)間的誤差除GLU測定結(jié)果的預(yù)期偏差不能被接受外,其他幾項(xiàng)均小于CLIA’88規(guī)定的允許誤差的1/2,各檢測項(xiàng)目在兩儀器間的測量結(jié)果具有可比性,BS800全自動(dòng)生化分析儀的檢測結(jié)果能為臨床所接受。這兩個(gè)系統(tǒng)的結(jié)果具有很好的相關(guān)性原因可能是BS800使用的原廠的試劑及校準(zhǔn)品,他們在一起構(gòu)成一個(gè)完整的檢測系統(tǒng)。而血糖之所以不能被接受是因?yàn)锽S800生化分析儀在分析血糖時(shí)用的采光周期與AU5811不同,AU5811是 27點(diǎn),BS800采的是31-33點(diǎn),BS800的分析時(shí)間延后,這就使得BS800測定的血糖結(jié)果偏高。筆者校準(zhǔn)了斜率和截距后重新測定,該項(xiàng)目取得了良好的一致性。

    綜上所述,即使每臺(tái)儀器工作性能穩(wěn)定、室內(nèi)質(zhì)控正常,不同儀器間的檢測結(jié)果也存在一定的誤差,所以定期開展新鮮血的比對試驗(yàn),對儀器進(jìn)行校正和偏倚評估,建立統(tǒng)一的室內(nèi)質(zhì)控系統(tǒng),使系統(tǒng)間的相對偏差處于臨床可接受范圍是非常必要的。

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