旋毛蟲抗腫瘤研究進展

常紅敏，李 丹，杜孌英

(承德醫(yī)學院，河北承德 067000)

綜述講座

旋毛蟲抗腫瘤研究進展

常紅敏，李 丹，杜孌英△

(承德醫(yī)學院，河北承德 067000)

腫瘤;旋毛蟲;生物治療

腫瘤的生物免疫治療是繼手術、放療、化療之后的第四大新型治療方法,是對傳統(tǒng)治療方法的有力補充。生物免疫治療突破了傳統(tǒng)治療腫瘤不徹底、易復發(fā)、副作用大的三大瓶頸,治療效果好,毒副作用小。目前，腫瘤抗原及其與抗原基因相關的過繼免疫治療、腫瘤核酸疫苗已成為腫瘤生物治療的研究方向之一，而抗腫瘤活性物質(zhì)及其基因的獲取是該研究成功的前提。國內(nèi)外研究發(fā)現(xiàn)，多種抗腫瘤活性物質(zhì)存在于多種生物中，除了許多動植物及海洋生物外，一些寄生蟲也具有明顯的抗腫瘤作用，目前文獻主要報道的有旋毛蟲[1]、瘧原蟲[2]、棘阿米巴滋養(yǎng)體[3、4]等。

旋毛蟲(Trichinella spiralis)是毛形科毛形屬的一種,成蟲和幼蟲分別寄生于哺乳動物腸道和肌肉組織中,是嚴重危害人類健康的人獸共患寄生蟲。研究發(fā)現(xiàn)，旋毛蟲感染人或動物后，除了引起不同程度的旋毛蟲病外，還能增強機體對腫瘤的防疫功能。自1977年以來，陸續(xù)有旋毛蟲抗腫瘤的文獻報道。隨著腫瘤的發(fā)病率及死亡率不斷升高，研發(fā)高效抗腫瘤制劑已迫在眉睫，具有抗腫瘤作用的旋毛蟲或許能成為抗腫瘤的新寵。本文就腫瘤的流行現(xiàn)狀、治療現(xiàn)狀、旋毛蟲抗腫瘤作用及其作用方式的研究進展進行綜合論述。

1 惡性腫瘤發(fā)病現(xiàn)狀

腫瘤具有復發(fā)性,主要原因在于腫瘤細胞有足夠的營養(yǎng)供應,而其營養(yǎng)在于它有自己新生的血管直接和循環(huán)系統(tǒng)相連,直接攝取營養(yǎng)，并且為腫瘤細胞的轉(zhuǎn)移提供了通道[5-10]。根據(jù)國際癌癥研究中心(IARC)的報告，1990年，全部癌癥新發(fā)病例810萬，死亡病例520萬;2000年，新發(fā)病例1010萬，死亡病例620萬。兩個時期相比，癌癥發(fā)病和死亡例數(shù)呈明顯上升趨勢，新發(fā)病例增加了24.7%，死亡病例增加了19.2%。據(jù)推測，2020年，全球惡性腫瘤新發(fā)病例將達2 000萬，死亡病例將達到1200萬。

在惡性腫瘤中，肺癌發(fā)病一直高居首位。1995年，全世界有60萬人死于肺癌，而且每年都在上升。2003年，世界衛(wèi)生組織(WHO)公布的死亡率是110萬/年，發(fā)病率是120萬/年。尤其是女性，肺癌的發(fā)生率有上升的趨勢。本病多在40歲以上發(fā)病，發(fā)病年齡高峰在60-79歲之間,男女患病率為2.3:1。近年來，雖然肺癌的診斷水平有了很大的提高，治療手段飛速發(fā)展，但5年生存率仍不超過15%，甚至低于10%[11]。肺癌年齡調(diào)整，死亡率呈上升趨勢，尤以農(nóng)村明顯[12]。另外，據(jù)北美2005年放射學年會報告的“國際早期肺癌行動計劃篩查”結(jié)果，在沒有癥狀的高危人群篩查中發(fā)現(xiàn)了458例肺癌，其中80%為I期，篩查后行手術治療的肺癌患者5年生存率為95.98%[13]。癌癥將成為人類健康的第一殺手，并成為全球最大的公共衛(wèi)生問題。

2 惡性腫瘤治療現(xiàn)狀

2.1 內(nèi)科治療在臨床上多采用放化療的方法來延長患者的生命,然而各種放化療針對性差,療效一般,毒副作用又大。

2.2 外科治療惡性腫瘤的治療方法中，除Ⅲb及Ⅳ期外，應以手術治療或爭取手術治療為主,其它則依據(jù)分期不同及病理組織類型加用放化療及中醫(yī)中藥等綜合治療。手術固然能切除腫瘤,但還有殘癌、區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移或血管中癌栓存在等現(xiàn)象,故復發(fā)轉(zhuǎn)移率非常高。手術后的生存期,國內(nèi)報道3年生存率約為40%-60%，5年生存率約為22%-44%，手術死亡率在3%以下。因此,生物治療備受關注,被腫瘤界認為是抗腫瘤的第四療法,并被認為是最有希望徹底治愈腫瘤的方法。

2.3 生物免疫治療應用疫苗或基因工程進行免疫接種，可激發(fā)或增強患者特異性抗腫瘤免疫應答，阻止腫瘤生長、擴散和復發(fā)。腫瘤特異性或相關抗原、獨特型表位、某些細胞因子受體均可作為腫瘤相關或特異性靶分子，針對這些靶分子的抗體是藥物、毒素、放射性核素、酶或其它效應分子的良好載體，可用于腫瘤的靶向治療。另外，多種細胞因子、腫瘤基因治療、細菌疫苗治療也具有直接或間接殺傷腫瘤細胞的作用。還有過繼性細胞免疫治療，向腫瘤患者轉(zhuǎn)輸具有抗腫瘤活性的免疫細胞，直接殺傷腫瘤細胞或激發(fā)機體抗腫瘤免疫效應，從而達到治療腫瘤的目的。該療法可單獨用于治療腫瘤患者，但更適宜作為手術、放療和化療后的輔助療法，以提高療效和改善患者生存質(zhì)量。

綜上所述，生物免疫治療已成為抗腫瘤綜合治療的重要組成部分，對提高化療、放療敏感性及減少腫瘤復發(fā)和轉(zhuǎn)移具有一定作用。但是由于理論和方法學的限制，尚不能取代傳統(tǒng)的抗腫瘤治療，所以，生物治療用于臨床還需要大量的研究工作。

3 旋毛蟲抗腫瘤研究進展

近年研究發(fā)現(xiàn),旋毛蟲感染人或動物除了引起一定程度的旋毛蟲病外,還能增強機體對腫瘤的防御機能。旋毛蟲的抗腫瘤[1]作用,國內(nèi)外均有報道。研究表明，旋毛蟲在不同發(fā)育階段的蟲體及其分泌物作為抗原均有不同程度的抗腫瘤作用[1、14]。日本學者Boonmars在研究旋毛蟲囊包形成機制過程中發(fā)現(xiàn)，囊包形成與P53及BCL-2(凋亡相關基因)有關[15]。旋毛蟲抗腫瘤主要是提取旋毛蟲活性物質(zhì)蟲體蛋白，不僅能有效殺死腫瘤細胞,而且還能清除體內(nèi)不同部位的微小殘留病灶,有效防止腫瘤的復發(fā)與轉(zhuǎn)移,產(chǎn)生“1+1＞2”的治療效果，此外，再聯(lián)合手術、化療和放療等綜合治療方法，能收到良好的臨床療效。

3.1 國外旋毛蟲抗腫瘤的研究進展Weatherly發(fā)現(xiàn)，長期感染低于致死量的旋毛蟲肌肉幼蟲的雌性Swiss鼠,乳腺腫瘤發(fā)生率低于正常Swiss鼠[16]。還有資料顯示，在旋毛蟲保姆細胞形成期間，TNF-α、TNFR-1、TNF受體相關死亡結(jié)構(gòu)域,caspase3,caspase8,TNF-2和受體相互作用，蛋白參與了TNF-α/TNFR-1介導的細胞凋亡途徑[17-18]。Boonmars發(fā)現(xiàn)，在旋毛蟲囊包形成期間，線粒體表達相關凋亡基因bax、Apaf-1、caspase9和絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶升高[15]。Molinari等[19]研究發(fā)現(xiàn),經(jīng)口感染旋毛蟲肌幼蟲的小鼠和對照組比較,體內(nèi)S180腫瘤的體積更小。

3.2 國內(nèi)旋毛蟲抗腫瘤研究進展目前國內(nèi)報道的旋毛蟲抗腫瘤作用主要是抗黑色素瘤、結(jié)腸癌、白血病等。吉林大學吳濤等[1]研究發(fā)現(xiàn)，旋毛蟲感染對BALB/c小鼠體內(nèi)的SP2/0瘤細胞生長有抑制作用。Wang等[20]研究發(fā)現(xiàn),ICR小鼠經(jīng)口感染旋毛蟲7天后,接種小鼠肝腫瘤細胞株H22、小鼠前胃腫瘤細胞株MFC和小鼠肉瘤細胞株S180,平均瘤重量顯著低于未感染旋毛蟲對照組。小鼠感染旋毛蟲后立即或7天后皮下接種乳腺癌細胞或移植腫瘤塊,30天后，小鼠體內(nèi)的腫瘤生長緩慢或不生長[14]。張媛媛等[21]以旋毛蟲經(jīng)口感染C57BL/6小鼠,接種前7天左右，腹股溝皮下注射肝癌細胞Hepal-6,30天后發(fā)現(xiàn)腫瘤重量和體積明顯低于未感染旋毛蟲的對照組。

3.3 旋毛蟲抗肺癌的研究進展國內(nèi)報道旋毛蟲抗肺癌的文獻不多。宮鵬濤等[22]通過提取旋毛蟲活性蛋白作用于肺腺癌A549細胞，采用TUNEL試劑盒檢測肺癌細胞的凋亡情況及MTT檢測肺癌細胞的增殖情況。研究發(fā)現(xiàn)，旋毛蟲接種11天后，荷瘤組抗A549肺腺癌細胞效果好于旋毛蟲接種7天前荷瘤組。

4 旋毛蟲抗腫瘤和細胞凋亡的關系

大量研究證明，旋毛蟲抗腫瘤是通過促進癌細胞凋亡來實現(xiàn)的。腫瘤的發(fā)生，一方面是由于細胞周期發(fā)生紊亂，細胞分裂失控，引起細胞無限期的增殖，另一方面則是由于細胞凋亡不足所致。細胞凋亡異常，在大多數(shù)惡性腫瘤的發(fā)病學上占有重要地位，細胞凋亡與腫瘤的發(fā)生密切相關。由于癌基因激活或抑癌基因失活導致的細胞周期失控，細胞凋亡不足，是許多腫瘤發(fā)生的重要機制。因此，越來越多的研究者試圖通過誘導腫瘤細胞凋亡治療癌癥，并取得了初步成效。

5 結(jié)語

國內(nèi)外研究發(fā)現(xiàn)，旋毛蟲在體內(nèi)、體外對多種腫瘤有抑制作用,所以，提取旋毛蟲蟲體蛋白，并提供制備蟲體蛋白功能基因，對腫瘤生物防治具有重要意義。在構(gòu)建旋毛蟲CDNA文庫的前提下，獲取旋毛蟲抗腫瘤基因。從目前文獻報道來看,仍需要大量研究，以便闡明旋毛蟲與腫瘤的量化關系、時間及對實體腫瘤及血液腫瘤的效果。

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1004-6879(2013)04-0324-03

2013-02-25)

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