新輔助化療前后宮頸癌組織中MK、MVD的表達(dá)變化及其臨床意義

葉 芬

新輔助化療前后宮頸癌組織中MK、MVD的表達(dá)變化及其臨床意義

葉 芬

目的觀察新輔助化療(neoadjuvant chemotherapy，NACT)前后宮頸癌組織中中期因子(midkine，MK)、微血管密度(microvessel density，MVD)的表達(dá)變化。方法臨床納入宮頸鱗癌患者35例，患者均給予順鉑+平陽(yáng)霉素進(jìn)行NACT。采用免疫組化SP法檢測(cè)NACT前后腫瘤組織中MK以及CD34的表達(dá)。結(jié)果患者接受NACT治療后，臨床完全緩解(CR)4例，部分緩解(PR)25例，總有效率(CR+PR)82.86%。NACT前后，患者M(jìn)K表達(dá)分別為74.28%、31.43%；MVD水平分別為(24.63±9.15)、(16.55±7.58)。NACT前后MK及MVD表達(dá)差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；臨床有效組NACT前后，患者M(jìn)K表達(dá)分別為75.86%、31.03%，差異有顯著性(P<0.05)。臨床無(wú)效組NACT前后患者M(jìn)K表達(dá)分別為66.67%、33.33%，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。臨床無(wú)效組和有效組NACT前后，患者M(jìn)VD水平差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論NACT治療宮頸鱗癌的臨床有效率較高，其能夠降低MK與MVD水平。NACT發(fā)揮治療作用的機(jī)制可能與抑制腫瘤血管生成有關(guān)，而通過(guò)檢測(cè)MK在NACT前后的表達(dá)變化能夠協(xié)助預(yù)測(cè)NACT的臨床療效。

新輔助化療；宮頸癌；中期因子；微血管密度；表達(dá)

(ThePracticalJournalofCancer,2015,30:1609～1611)

目前，臨床上治療宮頸癌主要采用手術(shù)、放療以及新輔助化療(neoadjuvant chemotherapy，NACT)等方法[1]。NACT是指在患者接受主要治療前先進(jìn)行化療，然后再接受手術(shù)治療或放療[2]。研究顯示，NACT能夠有效對(duì)鏡下微轉(zhuǎn)移灶進(jìn)行消除，抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)，從而縮小腫瘤組織的體積，提高手術(shù)成功率等[3]。近年來(lái)的研究顯示，宮頸癌組織中中期因子(midkine，MK)以及微血管密度(microvessel density，MVD)的表達(dá)明顯升高[4-5]。為探討NACT前后宮頸癌組織中MK與MVD表達(dá)的變化，我們對(duì)35例宮頸鱗癌患者進(jìn)行了相關(guān)指標(biāo)的檢測(cè)與分析，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 一般資料

本研究共納入宮頸鱗癌患者35例，均為我院2010年1月-2014年1月收住入院的病例?；颊呷虢M前均已經(jīng)過(guò)活檢，病理診斷明確?；颊呔M(jìn)行1～2個(gè)療程的NACT，方案為順鉑+平陽(yáng)霉素?；颊吣挲g22～69歲，平均年齡(41.6±10.6)歲；FIGO分期：Ⅰb2期9例，Ⅱ期25例，Ⅲ期1例；中高分化9例，低分化26例；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移8例，無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移27例。

1.2 NACT療效評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)

采用直接觀察以及測(cè)量子宮頸病灶大小進(jìn)行，部分患者參照陰道B超或CT測(cè)量的子宮頸病灶大小變化進(jìn)行評(píng)估。近期療效評(píng)定：根據(jù)實(shí)體瘤療效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評(píng)估，患者每半月進(jìn)行一次復(fù)查。完全緩解(CR)：化療后，檢查顯示腫瘤部位外觀無(wú)明顯異常，周?chē)M織富有彈性，腫瘤100%消退，至少持續(xù)4周以上；部分緩解(PR)：腫瘤周?chē)M織彈性變差，腫瘤較前縮小1/2以上，至少持續(xù)4周以上；無(wú)變化或無(wú)效(SD)：腫瘤周?chē)M織增厚，同治療前相比，檢查腫瘤體積較前縮小低于1/2；進(jìn)展(PD)：腫瘤增大1/4以上或出現(xiàn)新病灶及轉(zhuǎn)移。其中，以CR+PR為化療有效，SD+PD為化療無(wú)效。

1.3 宮頸癌組織中MK與CD34表達(dá)檢測(cè)方法

腫瘤組織標(biāo)本先經(jīng)10%甲醛固定，常規(guī)石蠟包埋，4 μm厚連續(xù)切片。然后經(jīng)二甲苯脫蠟、梯度酒精脫水、滅活內(nèi)源性酶、熱抗原修復(fù)、滴加一抗(MK濃度1∶50，CD34濃度1∶150)后置于4 ℃冰箱內(nèi)過(guò)夜、二抗處理后滴加辣根酶標(biāo)記鏈親和素、DAB顯色、復(fù)染、脫水、透明、中性樹(shù)膠封片，并在顯微鏡下觀察結(jié)果。用已知陽(yáng)性切片作為陽(yáng)性對(duì)照，PBS代替一抗作為陰性對(duì)照。

1.4 結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)

①M(fèi)K表達(dá)：以腫瘤組織細(xì)胞質(zhì)或細(xì)胞膜出現(xiàn)清晰黃色顆粒作為陽(yáng)性結(jié)果，MK陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)<5%為陰性，≥5%～10%為弱陽(yáng)性，10%～15%為中陽(yáng)性，>15%為強(qiáng)陽(yáng)性；②MVD水平，以CD34免疫組化結(jié)果計(jì)數(shù)MVD值，血管內(nèi)皮細(xì)胞出現(xiàn)棕黃色或黃色顆粒判定為陽(yáng)性。在高倍視野(×400倍)下分別計(jì)數(shù)每個(gè)活躍區(qū)的微血管數(shù),取5個(gè)活躍區(qū)的平均值作為該組織的MVD值。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 NACT臨床療效分析

患者接受NACT治療后，臨床完全緩解(CR)4例，部分緩解(PR)25例，SD 6例，總有效率(CR+PR)為82.86%。

2.2 NACT治療前后患者宮頸癌組織中MK與MVD表達(dá)比較

NACT前后，患者M(jìn)K表達(dá)分別為74.28%(28/35)、31.43%(11/35)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=16.73，P<0.05)。MVD水平分別為(24.63±9.15)、(16.55±7.58)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=4.02，P<0.05)。

2.3 NACT不同臨床療效組治療前后MK、MVD表達(dá)比較

觀察不同臨床療效組可見(jiàn)，臨床有效組NACT前后，患者M(jìn)K表達(dá)分別為75.86%、31.03%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=9.78，P<0.05)；臨床無(wú)效組NACT前后，患者M(jìn)K表達(dá)分別為66.67%、33.33%，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.73，P>0.05)。臨床有效組NACT前后，患者M(jìn)VD水平分別為(24.15±8.53)、(16.25±7.47)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=4.12，P<0.05)；臨床無(wú)效組NACT前后，患者M(jìn)VD水平分別為(26.96±12.40)、(21.00±8.68)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=2.33，P<0.05)。

3 討論

宮頸癌是婦科中較為多見(jiàn)的一種惡性腫瘤，近年來(lái)其臨床發(fā)病呈現(xiàn)了年輕化的趨勢(shì)。NACT是近年來(lái)臨床興起的一種治療方法，其能夠?yàn)榕R床上較為年輕的宮頸癌患者提供手術(shù)機(jī)會(huì)。在手術(shù)過(guò)程中，進(jìn)行的卵巢移位能夠避免放射治療導(dǎo)致的卵巢功能損傷。此外，局部腫瘤灶縮小就能夠盡可能多地保留陰道，從而在較大程度上提高了患者術(shù)后的生活質(zhì)量[6]。美國(guó)曾進(jìn)行了5個(gè)大規(guī)模的臨床研究，發(fā)現(xiàn)以順鉑為主的化療方案能夠顯著改善宮頸癌患者的生存率以及無(wú)瘤生存率[7]。本研究共納入Ⅰb2～Ⅲ期宮頸癌患者35例，經(jīng)過(guò)NACT后進(jìn)行臨床療效評(píng)估，結(jié)果發(fā)現(xiàn)CR 4例，PR 25例，總治療有效率達(dá)到82.86%，這與目前現(xiàn)有的文獻(xiàn)報(bào)道一致[8]。但是，并不是所有的宮頸癌患者均對(duì)NACT治療敏感，因此對(duì)于此類(lèi)患者，進(jìn)行NACT反而會(huì)延誤患者的治療，導(dǎo)致病情的進(jìn)展。因此，臨床上如果通過(guò)檢測(cè)某些指標(biāo)，能夠準(zhǔn)確反映患者化療后對(duì)于NACT的敏感性，就能夠?yàn)榕R床合理選擇化療方案提供指導(dǎo)意見(jiàn)。

MK屬于分泌性肝素結(jié)合生長(zhǎng)因子，其在妊娠中期胎兒的腦組織中呈現(xiàn)高表達(dá)。出生時(shí)MK的表達(dá)逐漸減低，成年后，MK僅能夠在小腸、小腦、甲狀腺、腎臟、膀胱、肺泡、直腸、胃以及脾中見(jiàn)到少量的表達(dá)[9]。近年來(lái)，大量的文獻(xiàn)報(bào)道，MK與臨床上多種腫瘤的發(fā)生以及發(fā)展存在著較為密切的聯(lián)系，如食管癌、胃癌、直腸癌、胰腺癌、肝癌等。有學(xué)者甚至主張將MK檢測(cè)作為惡性腫瘤高危人群的篩查以及隨訪指標(biāo)[10]。徐秋霞等的研究表明[11]，在宮頸癌分期越大的患者中，MK與MVD表達(dá)越高。研究顯示，MK、MVD的表達(dá)程度與宮頸癌的發(fā)展有密切聯(lián)系。研究還發(fā)現(xiàn)，MK具有多種生物活性，可誘導(dǎo)細(xì)胞分化，修復(fù)組織以及促瘤作用等，而MVD與MK有關(guān)。其認(rèn)為宮頸癌的進(jìn)展可能與MK的生物活性有關(guān)，MK表達(dá)越高，宮頸癌發(fā)展越成熟。本研究發(fā)現(xiàn)，宮頸癌組織中MK明顯升高。研究顯示，微血管的形成在惡性腫瘤的生長(zhǎng)、浸潤(rùn)以及轉(zhuǎn)移中的作用已經(jīng)得到廣泛證實(shí)，MVD越高，腫瘤的生長(zhǎng)速度就越快，惡性程度就越高，并且很容易出現(xiàn)腫瘤的轉(zhuǎn)移。結(jié)果與徐秋霞等的研究一致。而孫晉瑞等對(duì)宮頸癌治療效果的研究顯示[12]，NACT治療后，大多數(shù)宮頸癌患者M(jìn)K、MVD均有大幅度下降，且也可明顯發(fā)現(xiàn)宮頸癌治療效果有顯著提升。其認(rèn)為NACT在腫瘤新生血管及分化作用中起到強(qiáng)力的抑制作用。本研究進(jìn)行了自身對(duì)照實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，對(duì)比NACT前后患者M(jìn)K、MVD的變化。結(jié)果顯示，患者接受NACT后，MK以及MVD表達(dá)均出現(xiàn)明顯的下降(P<0.05)。另外，臨床有效組患者接受NACT后，MK以及MVD表達(dá)均出現(xiàn)明顯的下降(P<0.05)。臨床無(wú)效組患者接受NACT后，MVD表達(dá)出現(xiàn)明顯的下降(P<0.05)。上述結(jié)果提示，NACT可降低患者體內(nèi)MK、MVD的表達(dá)，抑制其活性，從而減少了其促進(jìn)腫瘤分化的作用。這與孫晉瑞等的結(jié)論相符。

綜上所述，NACT治療宮頸鱗癌的臨床有效率較高，其能夠降低MK與MVD水平。NACT發(fā)揮治療作用的機(jī)制可能與抑制腫瘤血管生成有關(guān)，而通過(guò)檢測(cè)MK在NACT前后的表達(dá)變化能夠協(xié)助預(yù)測(cè)NACT的臨床療效。

[1] Hu T,Wu L,Xing H,et al.Development of criteria for ovar ian preservation in cervical cancer patients treated with radical surgery with or without neoadjuvant chemotherapy:A multicenter retrospective study and meta-analysis〔J〕.Ann Surg Oncol,2013,20(3):881-890.

[2] Yamaguchi S,Nishimura R,Yaegashi N,et al.Phase Ⅱ st- udy of neoadjuvant chemotherapy with irinotecan hydrochloride and nedaplatin followed by radical hysterectomy for bulky stage Ⅰb2 to Ⅱb,cervical squamous cell carcinoma:Japanese Gynecologic Oncology Group study (JGOG 1065)〔J〕.Oncol Rep,2012,28(2):487-493.

[3] 鄧克紅,崔金全,盧書(shū)芳,等.宮頸鱗癌組織中TS和 TopoⅡα的表達(dá)與新輔助化療效果的關(guān)系〔J〕.鄭州大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版),2014,49(3):400-402.

[4] 馬 珂,楊儀赫,楊 曦,等.ⅠB2～ⅡB期宮頸癌患者術(shù)后單純輔助化療與同步放化療的療效觀察〔J〕.北京大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版),2013,45(6):910-915.

[5] 蘭為順,胡道予,楊文忠,等.基于介入治療的兩種新輔助化療方案在局部晚期宮頸癌療效的比較〔J〕.放射學(xué)實(shí)踐,2013,28(6):678-681.

[6] Shoji T,Takatori E,Saito T,et al.Neoadjuvant chemotherapy using platinum-and taxane-based regimens for bulky stage Ⅰb2 to Ⅱb non-squamous cell carcinoma of the uterine cervix〔J〕.Cancer Chemother Pharmacol,2013,71(3):657-662.

[7] 楊琳琳,楊宏英,楊謝蘭,等.兩種新輔助化療治療老年局部晚期宮頸癌的回顧性分析〔J〕.中國(guó)老年學(xué)雜志,2013,33(23):6020-6021.

[8] 周 雯,關(guān) 婷.宮頸鱗狀細(xì)胞癌化療前后小分子RNA-96的表達(dá)變化及其與化療敏感性的關(guān)系〔J〕.中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院學(xué)報(bào),2014,36(2):140-144.

[9] Shoji T,Kumagai S,Yoshizaki A,et al.Efficacy of neoadjuvant chemotherapy followed by radical hysterectomy in locally advanced non-squamous carcinoma of the uterine cervix:A retrospective multicenter study of Tohoku Gynecologic Cancer Unit〔J〕.Eur J Gynaecol Oncol,2012,33(4):353-357.

[10] 葉再挺.介入治療前后宮頸癌組織內(nèi)腫瘤細(xì)胞VEGF、MVD表達(dá)的動(dòng)態(tài)變化〔J〕.放射免疫學(xué)雜志,2010,23(1):75-77.

[11] 徐秋霞,關(guān)紅瓊.中期因子在宮頸癌組織中表達(dá)的臨床意義〔J〕.中國(guó)全科醫(yī)學(xué),2010,13(15):1613-1614.

[12] 孫晉瑞,梁東霞,何潔華,等.新輔助化療對(duì)宮頸癌微血管和微淋巴管的影響及療效分析〔J〕.腫瘤,2011,31(12):1087-1092.

(編輯：甘 艷)

The Expression of MK and MVD in Cervical Cancer Treated with Neoadjuvant Chemotherapy and Its Clinical Significance

YEFen.

Objective To observe the expression change of midkine(MK) and microvessel density(MVD) in cervical cancer tissues before and after neoadjuvant chemotherapy (NACT).Methods 35 cases of cervical squamous cell carcinoma were treated with cisplatin and pingyang mycin NACT.Immunohistochemical SP method was used to detect MK and CD34 expression in cervical cancer tissues before and after NACT.Results After NACT therapy，there had 4 cases of complete remission (CR),25 cases of partial remission (PR),the total efficiency (CR+PR)was 82.86%.Before and after NACT,MK expression in patients were respectively 74.28%,31.43%,MVD levels were (24.63±9.15),(16.55±7.58),there was significant difference (P<0.05);MK expression in patients in clinical ineffective group before and after NACT were respectively 66.67% and 33.33%,the difference was not significant (P>0.05).Conclusion NACT for cervical squamous cell carcinoma is effective,it can reduce the level of MK and MVD.Mechanism of NACT may be related to the inhⅠBition of tumor angiogenesis.Detection of MK can help predict the clinical efficacy of NACT.

Neoadjuvant chemotherapy;Cervical carcinoma;Midkine;Microvessel density;Expression

432000 湖北省職業(yè)技術(shù)學(xué)院

10.3969/j.issn.1001-5930.2015.11.008

R737.33

A

1001-5930(2015)11-1609-03

2015-01-12

2015-05-21)

HubeiPolytechnicInstitute,Xiaogan,432000