podoplanin及重組人血管內(nèi)皮抑制素和胃癌侵襲轉(zhuǎn)移關(guān)系的研究進(jìn)展

龐凌坤 蔣志慶

(桂林醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院胃腸外科，桂林市 541001)

胃癌是一種高發(fā)腫瘤，往往較早出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。一旦轉(zhuǎn)移到淋巴結(jié)，胃癌患者就難以治愈。胃癌切除后，確診已轉(zhuǎn)移到淋巴結(jié)上的概率達(dá)到60%，因此胃癌的五年生存率低于20%。雖然對(duì)胃癌的研究越來(lái)越深入，但對(duì)胃癌如何轉(zhuǎn)移到淋巴道的機(jī)制很少有確切的研究結(jié)果。胃癌術(shù)后復(fù)發(fā)以及轉(zhuǎn)移的最主要方式是淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移［1］。淋巴管的生成極大地幫助了腫瘤實(shí)現(xiàn)淋巴道轉(zhuǎn)移。檢出的淋巴結(jié)癌轉(zhuǎn)移數(shù)量占檢出淋巴結(jié)的比例即淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率，與胃癌的預(yù)后有顯著的正相關(guān)關(guān)系，陽(yáng)性率越高，預(yù)后明顯越差［2］。podoplanin是一種小分子黏液樣跨膜糖蛋白，在淋巴管的內(nèi)皮上呈高表達(dá)，而在血管內(nèi)皮上幾乎不表達(dá)，被普遍地認(rèn)為是淋巴內(nèi)皮細(xì)胞和淋巴管生成的特異性標(biāo)志物［3］。有相關(guān)的研究表明，無(wú)論是在體內(nèi)還是體外，podoplanin都能介導(dǎo)集合細(xì)胞的侵襲和遷移［4］。本文就 podoplanin及重組人血管內(nèi)皮抑制素與腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移的一些新方式作一綜述，探討單細(xì)胞和集合細(xì)胞轉(zhuǎn)移方式的信號(hào)途徑，為微創(chuàng)治愈腫瘤提供依據(jù)和新的手段。

1 podoplanin的特性、表達(dá)和相關(guān)機(jī)制

1．1 podoplanin的生物學(xué)特性 podoplanin是一種Ⅰ型跨膜糖蛋白，相對(duì)分子大小為38×103［5］，有162個(gè)氨基酸，有1個(gè)單一高度保守的跨膜區(qū)域，胞內(nèi)域由9個(gè)氨基酸構(gòu)成，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的C端有2個(gè)潛在的磷酸化位點(diǎn)，胞外域在不同的物種間差異較大，但都有相對(duì)保守的6個(gè)潛在的氧連接型糖基化位點(diǎn)，唾液酸通過(guò)α2-3連接在半乳糖上，構(gòu)成其糖類(lèi)主要部分。

podoplanin廣泛分布于人體多種組織細(xì)胞中，如骨骼肌、唾液腺、胎盤(pán)、肺、成骨細(xì)胞、腎足突細(xì)胞、間皮細(xì)胞、心臟和乳腺上的肌成纖維細(xì)胞，以及鼠的肺器官中肺泡Ⅰ型上皮細(xì)胞膜。也有報(bào)道［6，7］人的表皮細(xì)胞基底層上也可見(jiàn)到podoplanin局部表達(dá)。podoplanin主要在淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞上呈現(xiàn)高表達(dá)，這種高表達(dá)的特異性是使得其成為淋巴內(nèi)皮細(xì)胞的標(biāo)記物。

1．2 生理功能 podoplanin的生理功能目前不是十分清楚 。但是有研究發(fā)現(xiàn)［3］，在小鼠出生時(shí)如果缺失podoplanin，會(huì)導(dǎo)致病理切片上呈現(xiàn)為淋巴管擴(kuò)張、淋巴管水腫等，從而表現(xiàn)為淋巴管功能異常，最后小鼠死于呼吸衰竭。podoplanin擁有一個(gè)誘導(dǎo)血小板聚集域(platelet aggregation inducing factor，PLAG)，此 PLAG 域可以誘導(dǎo)血小板聚集，該誘導(dǎo)作用中起到最重要作用的是其中的唾液酸化核心［8］。在正常組織的發(fā)生及修復(fù)中，以及癌癥的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中，podoplanin都起到重要作用。

1．3 podoplanin高表達(dá)于癌組織的外周單層腫瘤細(xì)胞 在人多種腫瘤組織中podoplanin呈高表達(dá)，比如包括肺癌、口腔鱗狀細(xì)胞癌、喉癌、皮膚癌、卵巢粒層細(xì)胞瘤、宮頸癌、食道癌、卵巢的無(wú)性生殖細(xì)胞瘤，以及部分中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的腫瘤也可存在podoplanin表達(dá)上調(diào)［9，10］。podoplanin 與表達(dá)在卵巢生殖細(xì)胞瘤癌胚的M2A抗原生物學(xué)特性類(lèi)似［11］。人們認(rèn)為腫瘤是純間變細(xì)胞群的無(wú)組織結(jié)構(gòu)［12］，最近很多研究的結(jié)果更傾向于證實(shí)實(shí)體瘤內(nèi)部和邊緣存在不同的分子表達(dá)模式。有報(bào)道稱［4］，在98%的鱗癌邊緣的單細(xì)胞層上可見(jiàn)podoplanin高表達(dá)，特別是肺癌、喉癌、宮頸癌、皮膚癌及食管癌發(fā)生的鱗癌中。Shibahara J等研究顯示［13］，在MCF27乳腺癌細(xì)胞中多種因子可誘導(dǎo)podoplanin的表達(dá)，比如成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、3T3成纖維細(xì)胞中的緩激肽、表皮生長(zhǎng)因子以及腫瘤壞死因子。周?chē)M織中的相關(guān)因子會(huì)影響或者調(diào)控podoplanin的表達(dá)，但是他們?nèi)绾斡绊憄odoplanin的機(jī)制尚不清楚。

1．4 podoplanin在癌發(fā)生的鼠模型上繞過(guò)EMT 以往對(duì)小鼠模型中癌發(fā)生過(guò)程的研究表明，EMT是在腫瘤惡性進(jìn)展中的關(guān)鍵事件。這方面的研究最深入的例子是有關(guān)胰島素β細(xì)胞瘤生成的Rip1Tag2鼠模型研究。這些鼠表達(dá)猿病毒大T抗原，受到胰島素啟動(dòng)子的調(diào)控，胰島細(xì)胞突變形成產(chǎn)胰島素的β細(xì)胞腫瘤;這些β細(xì)胞腫瘤表達(dá)N2鈣黏蛋白，而不是表達(dá)E2鈣黏蛋白。這種鈣黏蛋白轉(zhuǎn)換是EMT的一部分分子事件，為腺瘤發(fā)展為腺癌的關(guān)鍵限速過(guò)程。而podoplanin表達(dá)呈現(xiàn)基因型轉(zhuǎn)變，在沒(méi)有EMT過(guò)程包括沒(méi)有鈣黏蛋白轉(zhuǎn)換的情況，他仍能夠?qū)е履[瘤形成。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，在沒(méi)有誘導(dǎo)鈣黏蛋白轉(zhuǎn)換和EMT發(fā)生的情況下，podoplanin已經(jīng)在MCF7細(xì)胞中強(qiáng)烈表達(dá)，在這個(gè)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中podoplanin的轉(zhuǎn)換牽扯到單細(xì)胞侵襲(有EMT過(guò)程)和集合細(xì)胞侵襲(無(wú)EMT過(guò)程)兩種模式。發(fā)生這些分子過(guò)程的這類(lèi)細(xì)胞形成絲足，加強(qiáng)了其遷移的能力［4］。在有表達(dá)podoplanin和沒(méi)有表達(dá)podoplanin的 Rip1Tag2鼠β細(xì)胞瘤間的區(qū)別是，前者的大多數(shù)瘤細(xì)胞沒(méi)有發(fā)生鈣黏蛋白轉(zhuǎn)換，腫瘤亞型也沒(méi)有表達(dá)E2鈣黏蛋白。上述的一些實(shí)驗(yàn)結(jié)果沒(méi)有證明podoplanin可以抑制鈣黏蛋白轉(zhuǎn)換過(guò)程，也沒(méi)有證明他可以抑制EMT，但可以證明其能夠介導(dǎo)繞過(guò)EMT的腫瘤細(xì)胞侵襲機(jī)制。并且無(wú)論存在不存在EMT，兩種不同機(jī)制的腫瘤侵襲可以同時(shí)存在于一個(gè)腫瘤發(fā)生發(fā)展過(guò)程中。

1．5 podoplanin促使腫瘤細(xì)胞侵襲、遷移和擴(kuò)散 Wickia等［4］采用轉(zhuǎn)染法研究podoplanin在正常人角質(zhì)化細(xì)胞和MCF7乳腺癌細(xì)胞中的功能，podoplanin的表達(dá)增加可以使該細(xì)胞發(fā)生形態(tài)學(xué)的巨大變化，比如細(xì)胞彈性纖維合成減少，并生成絲足樣膜凸起，甚至在存在E2鈣黏蛋白表達(dá)的情況下依然可以起到這樣的作用;相應(yīng)地，podoplanin的表達(dá)使得細(xì)胞外基質(zhì)(extracellular matrix，ECM)中纖連蛋白的黏附和擴(kuò)散能力提高。抗整合素中和抗體可以阻斷細(xì)胞的擴(kuò)散，ECM和腫瘤細(xì)胞之間的互相作用，制造了腫瘤細(xì)胞侵襲遷移的條件。在E2鈣黏蛋白表達(dá)的情況下，podoplanin可以促進(jìn)MCF27細(xì)胞和HaCaT角質(zhì)細(xì)胞遷移 。另外，穿透基質(zhì)層能力強(qiáng)的細(xì)胞往往podoplanin呈高表達(dá)。相反，podoplanin不表達(dá)或表達(dá)下調(diào)的細(xì)胞穿透基質(zhì)層的能力顯著下降?；|(zhì)金屬蛋白酶(matrix metallo proteinases，MMP)影響細(xì)胞侵襲能力的過(guò)程能被TIMP2抑制。這些體外實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果顯示，癌組織中podoplanin在有沒(méi)有鈣黏蛋白和EMT的條件下也都可以致使癌細(xì)胞提高侵襲遷移能力。近來(lái)有研究報(bào)道［14］，Madin Dabby犬腎細(xì)胞 (Madin Dabby canine kidney cells，MDCK)中podoplanin的表達(dá)在沒(méi)有E2鈣黏蛋白表達(dá)情況下可以提高單細(xì)胞的遷移能力。我們以此可以猜測(cè)，podoplanin可以誘導(dǎo)集合細(xì)胞和單個(gè)細(xì)胞的遷移，但確切的促進(jìn)侵襲轉(zhuǎn)移的兩種機(jī)制還不十分清楚。

1．6 podoplanin調(diào)整肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架 癌細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移往往依靠調(diào)整改變肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架。一些研究采用免疫沉淀測(cè)定法提示，podoplanin本身與肌動(dòng)蛋白不直接相關(guān)。podoplanin調(diào)整細(xì)胞骨架的機(jī)制是:膜蛋白通過(guò) ERM蛋白(如 Ezrin、Radixin和Moesin)結(jié)合于肌動(dòng)蛋白的細(xì)胞骨架上，其中的一種Ezrin蛋白能介導(dǎo)絲足形成、誘導(dǎo)轉(zhuǎn)移 已經(jīng)得到證實(shí)［15］。除此之外，研究還發(fā)現(xiàn)［16］，在 MDCK細(xì)胞、MCF27細(xì)胞 以及 HaCaT角質(zhì)化細(xì)胞，podoplanin表達(dá)上調(diào)可以明顯提高ERM蛋白(比如Ezrin蛋白等)的磷酸化，卻沒(méi)有影響他們的(Ezrin或Moesin等)表達(dá)水平。就是通過(guò)這樣的過(guò)程，ERM蛋白磷酸化就使podoplanin表達(dá)和肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架的重排密切相關(guān)。除了通過(guò)ERM蛋白功能，podoplanin也可以調(diào)節(jié)Rho家族特別是RhoA的GTP酶活性。在MCF27細(xì)胞中，podoplanin表達(dá)上調(diào)影響到RhoA，后者調(diào)低內(nèi)在活性，這個(gè)過(guò)程的詳細(xì)分子機(jī)制尚不明確，猜測(cè)在不同類(lèi)型的細(xì)胞骨架組織中會(huì)發(fā)生不同的反應(yīng)［16］。這些研究結(jié)果表明，podoplanin表達(dá)變化可以抑制RhoA活性，可以降低細(xì)胞的移動(dòng)性，RhoA活性的變化往往會(huì)涉及遷移相關(guān)表型的表達(dá)。

2 重組人血管內(nèi)皮抑制素與胃癌

對(duì)腫瘤病理研究的深入，分子靶向藥物已作為腫瘤治療的重要工具之一。大量實(shí)驗(yàn)表明，腫瘤發(fā)生侵襲轉(zhuǎn)移在相當(dāng)程度上需要依靠其血管的生成，所以研究調(diào)控血管生長(zhǎng)的分子靶向藥物有重要意義。血管生成因子和抗血管生成因子之間互相調(diào)節(jié)，調(diào)節(jié)的結(jié)果決定了血管生長(zhǎng)或者抑制，其中的機(jī)制涉及到細(xì)胞凋亡、細(xì)胞增殖、整合、基底膜和細(xì)胞外基質(zhì)的重生與分解，分子靶向藥物作用于上述過(guò)程的每一環(huán)節(jié)均可起到調(diào)控腫瘤血管生成。

2．1 內(nèi)皮抑制素特性 內(nèi)皮抑制素(endostatin，ES)是一種廣譜調(diào)控血管形成的抑制因子，其分子大小為20 kDa。其氨基排列的順序與膠原XⅧ C末端的非膠原結(jié)構(gòu)域氨基酸順序一致。XⅧ C末端的一個(gè)裂解片段，其中包含16個(gè)酸性氨基酸、29個(gè)堿性氨基酸。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示［17］，NO-環(huán)鳥(niǎo)苷酸信號(hào)途徑可以調(diào)節(jié)內(nèi)皮抑制素表達(dá)，一些因素比如應(yīng)激、缺氧和γ-干擾素的刺激能促進(jìn)ES釋放。需要特別提出的是，賦予ES發(fā)揮抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)作用的關(guān)鍵結(jié)構(gòu)區(qū)域可能就是其結(jié)構(gòu)中包含的一個(gè)特殊的堿性區(qū)域。由我國(guó)羅永章博士自主創(chuàng)新研發(fā)的重組人血管內(nèi)皮抑制素(recombinanthuman endostatin，rh-es)(商品名:恩度)已通過(guò)Ⅲ期臨床試驗(yàn)。我國(guó)用恩度治療的消化系統(tǒng)腫瘤主要有胃癌和肝癌。腫瘤需要豐富的血供才能快速的生長(zhǎng)，豐富的血供是大體積實(shí)性瘤體增大及腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移的必要基礎(chǔ)條件。已經(jīng)成為共識(shí)的是，ES抑制腫瘤血管形成涉及到腫瘤細(xì)胞、成纖維細(xì)胞等多種成分，最主要的作用“靶點(diǎn)”是血管內(nèi)皮細(xì)胞。恩度抑制新生血管生長(zhǎng)的作用機(jī)制如下。

2．1．1 通過(guò)結(jié)合內(nèi)皮細(xì)胞表面多種受體，干擾血管生成促進(jìn)因子的信號(hào)傳導(dǎo) 腫瘤豐富血管的形成與否決定于促血管因子和抑血管因子之間的強(qiáng)弱改變。主要的促血管因子包括血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)和堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)兩種。通過(guò)競(jìng)爭(zhēng)的方式，恩度結(jié)合硫酸黏蛋白類(lèi)受體，抑制VEGF和bFGF，使血管內(nèi)皮細(xì)胞的生長(zhǎng)受到阻礙，達(dá)到減慢腫瘤新生血管生長(zhǎng)速度的作用［18］。

2．1．2 調(diào)節(jié)多種血管形成相關(guān)基因的表達(dá)，改變信號(hào)傳導(dǎo)通路中蛋白質(zhì)的磷酸化狀態(tài) Shichiri等［19］研究發(fā)現(xiàn)，恩度可調(diào)控血管內(nèi)皮細(xì)胞中相關(guān)基因的表達(dá)現(xiàn)象，主要涉及到一些管家基因的表達(dá)改變，最終加速細(xì)胞凋亡和減慢增殖內(nèi)皮細(xì)胞。

2．1．3 抑制多種腫瘤相關(guān)基質(zhì)金屬蛋白酶原的激活和水解活性 研究證實(shí)［20］，ES可抑制如 proMMP-2、proMMP-9、proMMP-13等多種腫瘤相關(guān)基質(zhì)金屬蛋白酶原的激活和水解活性，ES還可與MMP-2的活性部位結(jié)合而形成較為穩(wěn)定的復(fù)合物，從而產(chǎn)生抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞遷徙的作用。

2．1．4 減少內(nèi)皮細(xì)胞增生及其基質(zhì)蛋白表達(dá)，誘導(dǎo)凋亡 恩度可以使血管內(nèi)皮細(xì)胞中的抗凋亡蛋白表達(dá)下降，這樣就可以加速血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡［21］。ES在血管里能直接進(jìn)入內(nèi)皮細(xì)胞胞漿誘發(fā)Shb發(fā)生磷酸化，減少S期細(xì)胞所占的比例，從而加快內(nèi)皮細(xì)胞凋亡［22］。

2．2 恩度的臨床研究現(xiàn)狀 研究表明［23，24］，恩度化療藥物聯(lián)合用藥具有互補(bǔ)作用，因?yàn)閮烧邔?duì)腫瘤細(xì)胞殺傷的機(jī)制不相同，聯(lián)合應(yīng)用提高抗腫瘤效果，療效提高明顯;并且在腫瘤抑制率方面兩者聯(lián)合給藥與兩者單獨(dú)先后給藥有提高。由此推測(cè)這可能跟藥物分別作用于不同的細(xì)胞周期有聯(lián)系，也可能誘導(dǎo)凋亡的機(jī)制不同。

2．2．1 恩度聯(lián)合化療藥應(yīng)用于胃癌術(shù)后的治療 廖成文［25］以FOLFOX方案+恩度治療晚期胃癌60例，隨機(jī)分為FOLFOX方案組和FOLFOX方案+恩度組，實(shí)驗(yàn)的有效情況(RR)分別為40%和60%(P＞0．05);胃癌的控制率(DCR)分別為70%和83．13%(P＞0．05)。在同一實(shí)驗(yàn)研究中還發(fā)現(xiàn)［26］，F(xiàn)OLFOX方案的療效為40%，與國(guó)外隨機(jī)研究結(jié)果非常接近。實(shí)驗(yàn)表明，F(xiàn)OLFOX方案聯(lián)合恩度組總的客觀有效率為60%，與對(duì)照組相比，統(tǒng)計(jì)學(xué)上無(wú)顯著差異，但是恩度聯(lián)合FOLFOX方案對(duì)提高晚期胃癌近期療效還是有優(yōu)勢(shì)的。徐建忠等［27］用FOLFOX4方案+恩度治療晚期胃癌32例，參與可評(píng)估患者31例，其中完全和部分病情緩解有17例，治療有效率為 54．8%，1年、3年生存率分別為 51．6%和16．1%。研究表明，F(xiàn)OLFOX4方案+恩度治療晚期胃癌是有效的，對(duì)晚期胃癌患者的病情緩解有一定的作用。陳映霞等［28］使用恩度聯(lián)合不同化療藥物治療晚期胃癌患者9例，其中FOLFOX4方案應(yīng)用4例，喜樹(shù)堿類(lèi)化療藥物4例，紫杉醇化療藥物1例，總有效率37．5%，疾病控制率87．5%?？梢钥闯龆鞫嚷?lián)合不同化療藥物有一定的效果，特別對(duì)晚期胃癌患者證明是有效的。

2．2．2 恩度在除胃癌以外的其他腫瘤中的聯(lián)合化療運(yùn)用 目前恩度主要是與胃癌的FOLFOX方案聯(lián)合運(yùn)用于臨床治療。有必要探索恩度在不同腫瘤中聯(lián)合不同化療藥物的療效。從臨床研究來(lái)看，研究的病例數(shù)目較小，有待進(jìn)行臨床大樣本的研究。恩度的Ⅰ～Ⅲ期臨床試驗(yàn)結(jié)論已經(jīng)提示其最適劑量為7．5 mg/m2，并且明確的推薦可以與化療聯(lián)合使用［29］。但是在許多方面比如最佳用法、應(yīng)用時(shí)機(jī)、是否持續(xù)用藥和療程等仍未得到完全肯定。Mancuso等［30］實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，在進(jìn)行腫瘤化療之前，先使用恩度注射治療，恩度能使雜亂的腫瘤血管排列有序化，這就有利于化療藥物順利通過(guò)血管進(jìn)入腫瘤組織內(nèi)充分發(fā)揮作用，對(duì)殺死腫瘤細(xì)胞有很大促進(jìn)作用，從而可以提高療效。因而推測(cè)如果恩度停用7 d以上，腫瘤組織內(nèi)新生血管可能已再生許多，對(duì)下次化療藥物進(jìn)入腫瘤血管可能有影響。因此，在臨床應(yīng)用中注意:恩度應(yīng)盡早在腫瘤早期使用，發(fā)揮恩度抑制血管快速生長(zhǎng)的作用;在抗腫瘤藥物應(yīng)用之前使用恩度，以便更好地加強(qiáng)抗腫瘤藥物的殺傷力;維持恩度穩(wěn)定的藥物濃度，前后兩次使用藥物的時(shí)間不應(yīng)該相差較長(zhǎng)，一般不超過(guò)7 d。

雖然既往對(duì)恩度的研究主要是對(duì)腫瘤血管生成的影響，但是實(shí)驗(yàn)和臨床效果證明其對(duì)胃癌特別是晚期胃癌的治療的確起到重要作用，其具體理論基礎(chǔ)需要進(jìn)一步研究。我們知道胃癌的轉(zhuǎn)移多為淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，現(xiàn)已知podoplanin與胃癌的淋巴轉(zhuǎn)移有密切關(guān)系，故兩方面是否有一定的關(guān)聯(lián)，值得我們進(jìn)一步深入探索。加強(qiáng)這兩方面的研究可能為未來(lái)生產(chǎn)出更好的靶向藥物帶來(lái)極大的幫助，有望明顯提高胃癌晚期患者的生存期。

3 結(jié)語(yǔ)

大量的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，細(xì)胞間的黏附模式改變不是腫瘤細(xì)胞侵襲的唯一方式，其他的侵襲方式也在研究之中。在β胰島素瘤和鱗狀細(xì)胞癌動(dòng)物模型上的研究顯示，podoplanin能獨(dú)立于EMT之外誘導(dǎo)集合細(xì)胞的侵襲和遷移。同時(shí)，podoplanin可以提高口腔鱗癌單細(xì)胞和MDCK細(xì)胞的侵襲能力，促進(jìn)EMT介導(dǎo)的細(xì)胞遷移。很多課題關(guān)注癌癥研究進(jìn)展，越來(lái)越多的人開(kāi)始研究單細(xì)胞和集合細(xì)胞侵襲分子機(jī)制，嘗試研究這兩種途徑在胚胎發(fā)育期間的差別。近年來(lái)，腫瘤的血管生成及抑制理論進(jìn)展很快，最重要的一部分就是關(guān)于內(nèi)皮抑制素起到的作用越來(lái)越受到重視并得到證實(shí)，以此為理論基礎(chǔ)的以抑制腫瘤新生血管為出發(fā)點(diǎn)的靶向治療逐漸成為腫瘤治療研究中又一個(gè)新的熱點(diǎn)。podoplanin在胃癌中的表達(dá)情況，癌組織及癌旁的高LMVD是否增加癌的淋巴轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)，以及重組人血管內(nèi)皮抑制素與胃部podoplanin作用效果如何，都有待于我們進(jìn)一步進(jìn)行探討，以便為恩度更好地應(yīng)用于腫瘤的靶向治療提供更多的證據(jù)支持。

［1］ 王 昭，詹文華，何裕隆，等．胃癌患者N2淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和腹膜擴(kuò)散的相關(guān)因素和預(yù)后分析［J］．中國(guó)普通外科雜志，2006，15(9):645 －649．

［2］ Nitti D，Marchet A，Olivieri M，et al．Ratio between metastatic and examined lymph nodes is an independent prognostic factor after D2 resection for gastric cancer:analysis of a large European monoinstitutional experience［J］．Ann Surg Oncol，2003，10(9):1077 －1085．

［3］ Schacht V，Dadras SS，Johnson LA，et al．Upregulation of the lymphatic marker podoplanin，a mucin-type transmembrane glycoprotein，in human squamous cell carcinomas and germ cell tumors［J］．Am JPathol，2005，166(3):913 －921．

［4］ Wicki A，Lehembre F，Wick N，et al．Tumor invasion in the absence of epithelial-mesenchymal transition:podoplaninmediated remodeling of the actin cytoskeleton［J］．Cancer Cell，2006，9(4):261 －272．

［5］ Breiteneder-Geleffs，Soleiman A，Kowalski H，et al．Angiosarcomas express mixed endothelial phenotypes of blood and lymphatic capillaries:podoplanin as a specific marker for lymphatic endothelium ［J］．Am J Pathol，1999，154(2):385－394．

［6］ Martin-Villar E，Scholl FG，Gamallo C，et al．Characterization of human PA2．26 antigen(T1 alpha-2，podoplanin)，a small membrane mucin induced in oral squamous cell carcinomas［J］．Int JCancer，2005，113(6):899 －910．

［7］ Ordonez NG．The diagnostic utility of immunohistochemistry and distinguishing between epithelioid mesotheliomas and squamous carcinomas of the lung:a comparative study［J］．Mod Pathol，2006，19(1):417 －428．

［8］ Kaneko M，Kato Y，Kitano T，et al．Conservation of a platelet activating domain of Aggrus/podoplanin as a platelet aggregation-inducing factor［J］．Gene，2006，378(2):52 －57．

［9］ Kato Y，Kaneko M，Sata M，et al．Enhanced expression of Aggrus(T1alpha/podoplanin)，a platelet-aggregation-inducing factor in lung squamous cell carcinoma［J］．Tumour Biol，2005，26(4):195 －200．

［10］ Kimura N，Kimura I．Podoplanin as a marker for mesothelioma［J］．Pathol Int，2005，55(2):83 － 86．

［11］ Dumoff KL，Chu C，Xu-X，et al．Low D2-40 immunoreactivity correlates with lymphatic invasion and nodal metastasis in early-stage squamous cell carcinoma of the uterine cervix［J］．Mod Pathol，2005，18(1):97 －104．

［12］ Gavert N，Conacci-Sorrell M，Gast D，et al．L1，a novel target of beta-catenin signaling，transforms cells and is expressed at the invasive front of colon cancers［J］．JCell Biol，2005，168(4):633－642．

［13］ Shibahara J，Kashima T，Kikuchi Y，et al．Podoplanin is expressed in subsets of tumors of the central nervous system［J］．Virchows Arch，2006，448(4):493 －499．

［14］ Martin-Villar E，Megias D，Castel S，et al．Podoplanin binds ERM proteins to activate RhoA and promote epithelial-mesenchymal transition ［J］．J Cell Sci，2006，119(21):4541－4553．

［15］ Yu Y，Khan J，Khanna C，et al．Expression profiling identifies the cytoskeletal organizer ezrin and the developmental homeoprotein six-1 as key metastatic regulators［J］．Nat Med，2004，10(2):175 －181．

［16］ Martin Villare，Megia SD，Castel S，et al．Podoplanin binds ERM proteins to activate RhoA and promote epithelial mesenchymal transition ［J］．J Cell Sci，2006，119(21):4541－4553．

［17］ Felbor U，Dreier L，Bryant RA，et al．Secreted cathepsin L generates edostatin from collagen［J］．EMBO J，2000，19(6):1187－1194．

［18］ Kim YM，Hwang S，Kim YM，et al．Endostatin blocks vascular endothelial growth factor-mediated signaling via direct interaction with KDR/Flk-1［J］．J Biol Chem，2002，277(31):27872－27879．

［19］ Shichiri M，Hirata Y．Antiangiogenesis signals by endostatin［J］．FASEB J，2001，15(6):1044 －1053．

［20］ Nyberg P，Heikkila P，Sorsa T，et al．Endostatin inhibits human tongue carcinoma cell invasion and intravasation and blocks the activation of matrix metalloprotease-2，-9，and-13［J］．JBiol Chem，2003，278(25):22404 －22411．

［21］ Dhanabal M，Ramchandran R，Waterman MJ，et al．Endostatin induces endothelial cell apoptosis［J］．J Biol Chem，1999，274(17):11721 －11726．

［22］ Dixelius J，Larsson H，Sasaki T，et al．Endostatin-induced tyrosine kinase signaling through the Shb adaptor protein regulates endothelial cell apoptosis［J］．Blood，2000，95(11):3403－3411．

［23］顧 穎，盧慧宇，江愛(ài)桂，等．重組人血管內(nèi)皮抑制素聯(lián)合GP方案治療晚期非小細(xì)胞肺癌臨床研究［J］．實(shí)用臨床醫(yī)學(xué)雜志，2010，14(9):86 －87．

［24］ Folkman J．Antiangiogenesis in cancer therapy-endostatin and its mechanisms of action ［J］．Expt Cell Res，2006，312(5):594－607．

［25］廖成文．恩度聯(lián)合FOLFOX方案治療晚期胃癌的臨床研究［J］．長(zhǎng)江大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)，2011，8(2):147 －148．

［26］ Cavanna L，Artioli F，Codignola C，et al．Oxaliplatin in combination with 5-fluorouracil(5-Fu)and leueovorin(LV)in patients with metastastic gastric cancer(MGC)［J］．Am J Clin Oncol，2006，29(4):371 －3751．

［27］徐建忠，徐 珍，凌 揚(yáng)．重組人血管內(nèi)皮抑制素聯(lián)合FOLFOX4方案治療晚期胃癌［J］．成都醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2012，7(2):198 －199．

［28］陳映霞，秦叔逵，劉秀峰，等．重組人血管內(nèi)皮抑制素聯(lián)合化療治療晚期胃癌的臨床觀察［J］．臨床腫瘤學(xué)雜志，2009，14(4):328 －330．

［29］劉秀峰，秦叔逵．重組人血管內(nèi)皮抑素臨床應(yīng)用和研究的新進(jìn)展［J］．臨床腫瘤學(xué)雜志，2009，14(10):951－957．

［30］ Mancuso MR，Davis R，Norberg SM，et al．Rapid vascular regrowth in tumors after reversal of VEGF inhibition［J］．J Clin Invest，2006，116(10):2610 －2621．