囊腫顆粒薄層色譜鑒別方法研究

董 芳

囊腫顆粒薄層色譜鑒別方法研究

董 芳

（江西省鷹潭市中醫(yī)院，鷹潭335099）

目的 確立囊腫顆粒的定性鑒別方法。方法 采用薄層色譜法對(duì)囊腫顆粒部分藥味進(jìn)行定性鑒別。結(jié)果 確立了牡丹皮、赤芍、大黃的薄層定性鑒別方法。結(jié)論 所確立方法簡(jiǎn)單，專屬性好，操作性強(qiáng)，陰性無(wú)干擾，對(duì)囊腫顆粒的質(zhì)量控制具有非常重要意義。

囊腫顆粒；薄層色譜法

囊腫顆粒是我院根據(jù)中醫(yī)婦科方加減組方研制成的中藥內(nèi)服制劑．由牡丹皮、赤芍、大黃、三棱、莪術(shù)、路路通等十二味中藥組成，臨床上主要用于治療氣滯血瘀、痰濕凝滯所致的癥瘕痞塊、卵巢囊腫。為了控制產(chǎn)品質(zhì)量，對(duì)處方中主藥進(jìn)行了鑒別研究。

1 儀器與試藥

儀器：DHG-9023型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱（上海醫(yī)用恒溫設(shè)備廠），薄層自動(dòng)鋪板器（重慶南岸新力實(shí)驗(yàn)電器廠）。

試藥：囊腫顆粒（自制）；大黃對(duì)照藥材（批號(hào)902-89013）；丹皮酚（批號(hào)0708-9704）；芍藥苷（批號(hào)0736-200117）

以上對(duì)照品和對(duì)照藥材均由中國(guó)藥品生物制品檢定所提供。硅膠G（中國(guó)海洋化工集團(tuán)）、硅膠H（中國(guó)海洋化工集團(tuán)）；其他試劑為分析純。

2 實(shí)驗(yàn)方法及結(jié)果

2.1 牡丹皮的薄層鑒別 取本品內(nèi)容物5g，加乙醚30ml，超聲處理15分鐘，濾過(guò)，藥渣備用，濾液揮去乙醚，殘?jiān)颖?ml使溶解，作為供試品溶液。另取丹皮酚對(duì)照品，加丙酮制成每1ml含5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液．照薄層色譜法（中國(guó)藥典2005年版一部附錄VI B）實(shí)驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10微升，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-醋酸乙酯確鹽酸（15∶3∶0.04）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以20%三氯化鐵乙醇溶液。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的紫褐色斑點(diǎn)。結(jié)果見(jiàn)圖1。

2.2 赤芍的薄層鑒別 取2.1項(xiàng)下的藥渣，揮去乙醚，加乙醇30ml，超聲處理15分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)右掖?ml使溶解，作為供試品溶液。另取芍藥苷對(duì)照品，加乙醇制成1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品。照薄層色譜法（中國(guó)藥典2005年版一部附錄VI B）實(shí)驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5微升，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-甲酸（40∶5∶10∶0.2）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的藍(lán)紫色斑點(diǎn)。結(jié)果見(jiàn)圖2。

2.3 大黃的薄層鑒別 取本品1g，加甲醇20ml，超聲處理15分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，再加鹽酸1ml，至水浴中加熱30分鐘，立即冷卻。用乙醚分兩次提取，每次20ml，合并乙醚液，蒸干，殘?jiān)勇确?ml使溶解，作為供試品溶液。另取大黃對(duì)照藥材0.1g，同法制成對(duì)照藥材溶液，照薄層色譜法（中國(guó)藥典2005年版一部附錄VI B）試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各4微升，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉溶液為粘合劑的硅膠H薄層板上，以正己烷-醋酸乙酯-甲酸（30∶10∶0.5）為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈（365nm）下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。結(jié)果見(jiàn)圖3。

圖1 ［鑒別］（1）薄層色譜圖1.6丹皮酚對(duì)照品 2.7樣品（20121016）3.牡丹皮陰性對(duì)照4.赤芍陰性對(duì)照5.牡丹皮、赤芍陰性對(duì)照8.樣品（20121030）9.樣品（20121113）

圖2 ［鑒別］（2）薄層色譜圖1.6芍藥苷對(duì)照品 2.7樣品（20121016）3.牡丹皮陰性對(duì)照4.赤芍陰性對(duì)照5.牡丹皮、赤芍陰性對(duì)照8.樣品（20121030）9.樣品（20121113）

圖3 ［鑒別］（3）薄層色譜圖1.大黃對(duì)照藥材 2.樣品（20121016）4.樣品（20121113）3.樣品（20121030）5.大黃陰性對(duì)照

3 討論

三個(gè)薄層鑒別均在參考有關(guān)文獻(xiàn)基礎(chǔ)上建立。并考察了供試品的提取方法、展開劑和顯色劑。為了使供試品的處理簡(jiǎn)便快速，三個(gè)薄層鑒別均采用超聲提取，實(shí)驗(yàn)證明，該提取方法均能滿足制樣要求，且提取液的雜質(zhì)相對(duì)較少，減少了干擾。采用本標(biāo)準(zhǔn)的展開劑斑點(diǎn)集中，Rf值適宜，并與其他成分完全分離，陰性樣品無(wú)干擾。另外，采用正己烷-氯仿-無(wú)水乙醇（7∶3∶1）、氯仿-甲醇（5∶1）、石油醚（30～60℃）-甲酸乙酯-甲酸（15∶5∶1）的上層溶液三套展開系統(tǒng)分別對(duì)本標(biāo)準(zhǔn)鑒別（1）、（2）、（3）展開系統(tǒng)進(jìn)行驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)，對(duì)應(yīng)的展開系統(tǒng)均能檢出相應(yīng)的成分。驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)中，鑒別（1）的顯色方法采用鹽酸酸性5%三氯化鐵乙醇溶液顯色時(shí)，薄層板經(jīng)烘烤后顯出干擾的其他雜質(zhì)斑點(diǎn)，改用20%三氯化鐵乙醇溶液不經(jīng)烘烤直接顯色，雜質(zhì)斑點(diǎn)不顯色，色譜較單純，排除了干擾。按照本標(biāo)準(zhǔn)對(duì)三批供成品進(jìn)行實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，效果良好，結(jié)果見(jiàn)附圖。

牡丹皮和赤芍中均含有丹皮酚和芍藥苷，前者丹皮酚含量居多，后者芍藥苷含量居多，由于生產(chǎn)工藝中對(duì)兩種藥材處理方法不同，前者丹皮酚得以基本保留；后者芍藥苷提取基本完全，而丹皮酚保留甚少。從陰性樣品可以看出，鑒別（1）主要鑒別牡丹皮，由于牡丹皮為生藥原粉直接入藥，本標(biāo)準(zhǔn)提取方法提出牡丹皮中的芍藥苷甚少，加之其本身芍藥苷含量少，以致達(dá)不到檢測(cè)下限，故鑒別（2）主要鑒別赤芍。

10.3969／j.issn.1672-2779.2013.21.108

1672-2779（2013）-21-0149-02

吳義紅

2013-08-22）