• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    羧甲基殼聚糖超小超順磁氧化鐵納米粒在大鼠體內(nèi)的藥動學(xué)特點及組織分布

    2013-03-06 08:29:05范彩霞陳志喜高文慧賴水招鄭錦坤
    關(guān)鍵詞:藥動學(xué)低濃度血漿

    范彩霞,陳志喜,高文慧,賴水招,鄭錦坤

    (1.汕頭大學(xué)附屬粵北人民醫(yī)院,廣東 韶關(guān) 512026;2.廣州醫(yī)學(xué)院附屬腫瘤醫(yī)院,廣州 510005)

    羧甲基殼聚糖超小超順磁氧化鐵納米粒在大鼠體內(nèi)的藥動學(xué)特點及組織分布

    范彩霞1,陳志喜1,高文慧2,賴水招1,鄭錦坤1

    (1.汕頭大學(xué)附屬粵北人民醫(yī)院,廣東 韶關(guān) 512026;2.廣州醫(yī)學(xué)院附屬腫瘤醫(yī)院,廣州 510005)

    目的 考察羧甲基殼聚糖超小超順磁氧化鐵納米粒(O-carboxymethyl chitosans ultrasmall superparamagnetic iron oxide nanoparticles,OCMCS-USPIO-NPs)在SD大鼠體內(nèi)的藥動學(xué)特征及組織分布,為其臨床應(yīng)用提供依據(jù)。方法 SD大鼠隨機(jī)分為生理鹽水組、OCMCS-USPIO-NPs組和葡聚糖超順磁氧化鐵納米粒組(dextran-SPIO-NPs),原子分光光度法測定血漿和心、肝、脾、肺和腎等組織的鐵含量,DAS 藥動學(xué)軟件對血藥濃度-時間數(shù)據(jù)處理,求得OCMCS-USPIO-NPs組和dextran-SPIO-NPs組在大鼠體內(nèi)的主要藥動學(xué)參數(shù);繪制組織內(nèi)鐵含量-時間曲線結(jié)合普魯士藍(lán)染色,比較OCMCS-USPIO- NPs和Dextran-SPIO-NPs在大鼠體內(nèi)組織分布特點。結(jié)果 OCMCS-USPIO-NPs組和dextran-SPIO-NPs組的主要藥動學(xué)參數(shù)(AUC,MRT,t1/2,CL,V2,差異顯著(P<0.05),且OCMCS-USPIO-NPs組t1/2>7 h;OCMCS-USPIO-NPs組在肝、脾和肺的組織分布濃度顯著低于dextran-SPIO-NPs組。結(jié)論 OCMCS-USPIO-NPs能逃避網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)吞噬,具有長循環(huán)作用。

    超小超順磁氧化鐵納米粒;原子分光光度法;藥動學(xué);組織分布

    超順磁氧化鐵納米粒(superparamagnetic oxide iron nanoparticles,SPIO-NPs)具有超順磁性、細(xì)胞毒性低、包被的高分子物質(zhì)表面有特異性功能基團(tuán),可以與其他藥物、對比劑結(jié)合等理化特性使其常作為MRI對比劑、靶向給藥系統(tǒng)載體、熱療劑,在醫(yī)學(xué)研究及臨床上廣泛應(yīng)用,是目前醫(yī)學(xué)研究的熱點和前沿[1-2]。根據(jù)粒徑不同,SPIO-NPs可以分為2類:普通的SPIO-NPs(粒徑>50 nm)和超小的超順磁氧化鐵納米粒(USPIO-NPs、粒徑<50 nm)[3],普通SPIO-NPs主要用于巨噬細(xì)胞豐富的組織臟器疾病(如肝臟、脾臟、淋巴結(jié)和骨髓等器官疾病)的診斷。由于USPIO-NPs顆粒較小而且表面包有較厚的高分子物質(zhì),能逃避血管網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的吞噬,而具有長循環(huán)作用,可以用于腫瘤的淋巴轉(zhuǎn)移、炎癥和退行性疾病的診斷。臨床試驗證明USPIO粒子對淋巴結(jié)網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)具有親和性,可通過淋巴管輸送到淋巴結(jié)而被淋巴結(jié)內(nèi)的巨噬細(xì)胞攝取,腫瘤淋巴轉(zhuǎn)移部位由于淋巴細(xì)胞被腫瘤細(xì)胞取代對USPIO的攝取下降,淋巴結(jié)腫瘤轉(zhuǎn)移部位與正常淋巴結(jié)的對比度得以增強,可用于頭、頸部、盆腔腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的評價,對癌癥患者的治療和預(yù)后具有重要的臨床價值[4-6]。

    本課題組已采用“二步法”成功完成羧甲基殼聚糖超小超順磁氧化鐵納米粒(O-carboxymethyl chitosans ultrasmall superparamagnetic iron oxide nanoparticles,OCMCS-USPIO-NPs)制備工藝優(yōu)化篩選,理化性質(zhì)表征、細(xì)胞毒性評價及體外抗吞噬細(xì)胞吞噬作用考察[7]。在此基礎(chǔ)上,本實驗以SD大鼠為模型動物,自制葡聚糖超順磁氧化鐵納米粒(dextran-SPIO-NPs)(粒徑>220 nm)為陽性對照,原子分光光度法測定OCMCS-USPIO-NPs血漿及心、肝、脾、腎、肺等組織的鐵含量,考察其體內(nèi)藥動學(xué)特點及組織分布情況,進(jìn)一步證實其抗網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)吞噬的特性,為進(jìn)一步研究其在腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移,血管造影等應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。

    1 材料與儀器

    1.1 試劑與試藥

    OCMCS-USPIO-NPs(批號:2012-08-10,透射電鏡粒徑為9.5 nm,流體粒徑為36.7 nm,鐵含量為5.67 mg·mL-1)和dextran-SPIO-NPs(批號:20120809,透射電鏡粒徑為11.2 nm,流體粒徑為223.4 nm,鐵含量為5.82 mg·mL-1)均由本課題組研制;NH4Fe(SO4)2·12H2O、鹽酸、硝酸、高氯酸、高純乙炔(分析純,均購自廣州化學(xué)試劑有限公司)。Milli-Q超純水。

    1.2 儀器

    平板加熱器(上海昌安電子科技有限公司);AA6300C原子吸收光譜儀(日本島津);TMP電子天平(德國Satorius公司);xw-80A型漩渦振蕩器(江蘇海門林貝儀器有限公司);低溫離心機(jī)(美國THERMO LEGEND公司)。

    1.3 動物

    SPF級SD大鼠,♂,體質(zhì)量(300±10)g,購自南方醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心,合格證號:SCXK(粵)2006-0015。

    2 方法

    2.1 方法學(xué)考察

    2.1.1 標(biāo)準(zhǔn)工作曲線的制備 精密稱取NH4Fe(SO4)2·12H2O配制100 μg·mL-1的鐵對照品溶液。精密量取該鐵對照品溶液0,0.05,0.1,0.2,0.4,0.6,0.8,0.9,1.0,1.5,2.0,2.5 mL至西林瓶中,加入蒸餾水,空白血漿或含有20%組織的組織懸液0.25 mL和1 mL混酸(硝酸-高氯酸體積比3∶1),室溫下消化24 h后用平板加熱器蒸干,待冷卻后加入3%的鹽酸溶液1 mL溶解西林瓶中的Fe3+離子,并轉(zhuǎn)入50 mL量瓶,用水稀釋至刻度,搖勻,配制成濃度為0,0.1,0.2,0.4,0.8,1.2,1.6,1.8,2.0,3.0,4.0和5.0 μg·mL-1的系列鐵對照品溶液。在波長248.3 nm;燈電流:8.0 mA;光譜通帶:2 nm;空氣流量:15.0 L·min-1;乙炔流量:2.1 L·min-1;燃燒器高度:7.5 mm的條件下測定吸光度,以吸光度為縱坐標(biāo),樣品濃度為橫坐標(biāo),繪制鐵吸光度-濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線。

    2.1.2 樣品的處理 用移液器精密量取0.2 mL血漿或各組織50 mg于西林瓶中,加入1 mL混酸(硝酸-高氯酸體積比3∶1),室溫下消化24 h后用平板加熱器蒸干,待冷卻后加入3%的鹽酸溶液1 mL溶解西林瓶中的Fe3+離子,轉(zhuǎn)入100 mL量瓶,用超純水稀釋,取適量注入原子分光光度計中,空氣-乙炔火焰,在248.3 nm波長處測定吸光度(A),代入標(biāo)準(zhǔn)曲線方程求出鐵含量,再按照稀釋比例求算血漿內(nèi)的鐵含量[8]。

    2.1.3 回收率測定 分別配制0.1,1.4,3.2 μg·mL-1的鐵對照品溶液及含有空白血漿或各組織20%的勻漿液,每個濃度3份,分別精密量取1 mL加入0.2 mL 0.1 mol·L-1鹽酸溶液中,加入1 mL混酸(硝酸-高氯酸體積比3∶1),室溫下消化24 h后用平板加熱器蒸干,待冷卻后加入3%的鹽酸溶液1 mL溶解西林瓶中的Fe3+離子,轉(zhuǎn)入100 mL量瓶,用超純水稀釋,取適量注入原子分光光度計中,空氣-乙炔火焰,在248.3 nm波長處測定吸光度(A),代入標(biāo)準(zhǔn)曲線方程求出鐵含量,計算回收率,回收率=(C測定值/C實際加入濃度)×100%。

    2.1.4 日間精密度考察 分別配制高、中、低濃度(3.2,1.4和0.1 μg·mL-1)的鐵對照品溶液,精密量取1 mL加入0.2 mL 0.1 mol·L-1鹽酸溶液、血漿或心、肝、脾、肺和腎的組織溶液中,按“2.1.3”項下方法處理,每個濃度 6 份樣品,分別在同一天內(nèi)不同時間點連續(xù)測定5次和連續(xù)測定 5 d,每天1次,計算日內(nèi)與日間精密度。

    2.2 藥動學(xué)實驗

    取SD大鼠,♂,30只,隨機(jī)分成空白組(6只)、OCMCS-USPIO-NPs組(12只)和dextran-SPIO-NPs組(12只),2組給藥組內(nèi)部隨機(jī)平均分成:鹽水及Fe 5.87 mg·kg-1和13.27 mg·kg-1的2種納米粒,并于0,0.25,0.5,1,2,4,6,8,12,24 h后眼底靜脈叢采血0.5 mL,置于肝素鈉化的EP管中,5 000 r·min-1離心10 min,取0.2 mL上清液測定鐵含量。

    2.3 組織分布考察

    取SPF級SD大鼠100只,隨機(jī)分成空白對照組(4只)、dextran-SPIO-NPs組(高、低濃度組各24只)、OCMCS-USPIO-NPs組(高、低濃度組各24只)。禁食12 h后(自由飲水),空白對照組尾靜脈一次給予1.2 mL生理鹽水,給藥組分別尾靜脈一次給予5.90 mg·kg-1或13.27 mg·kg-1的dextran-SPIO-NPs或OCMCS-USPIO-NPs,并于給藥后的2,4,6,8,10,12,14,16 h處死動物(每個時間點3只),取心、肝、脾、肺、腎并用生理鹽水洗凈殘血,濾紙吸干水分后準(zhǔn)確稱取50 mg各組織,測定各時間點的組織鐵含量。

    普魯士藍(lán)染色評價組織分布情況:取空白組和16 h時高濃度兩給藥組大鼠的心、肝、脾、肺、腎,于10%福爾馬林溶液中固定24 h。取出固定后的標(biāo)本,修成4 mm3小塊,流水沖洗4 h,依次加入75%,80%,90%,95%的乙醇溶液各1 h,再用100%乙醇脫水3次,每次20 min;二甲苯透明2次,每次10 min;58 ℃石蠟浸泡1 h,62 ℃軟蠟浸透 30 min,硬蠟包埋后常溫保存。切片前30 min,蠟塊置于4 ℃預(yù)凍,載玻片采用多聚賴氨酸處理后37 ℃烘干,常規(guī)石蠟4 μm切片,組織切片常規(guī)脫蠟至水,2%亞鐵氰化鉀、2%鹽酸水溶液混合液(1∶1)染色5~30 min,蒸餾水充分水洗,0.5%伊紅水溶液復(fù)染30~60 s。經(jīng)各梯度乙醇脫水,二甲苯透明,樹膠封固。三價鐵呈藍(lán)色,其他組織淺紅色,光學(xué)顯微鏡觀察并拍照。

    2.4 數(shù)據(jù)處理

    血鐵濃度以各時間點血漿鐵濃度均值減去各時間點空白血漿鐵濃度的均值表示,繪制血藥濃度(C)-時間(t)曲線(±s ),將血藥濃度時間數(shù)據(jù)經(jīng)DAS 2.1.1藥動學(xué)統(tǒng)計軟件處理,并進(jìn)行方差分析,雙單側(cè)t檢驗及(1-2α)%置信區(qū)間法評價OCMCSSPIO-NPs組與dextran-SPIO-NPs組的生物等效性,由于考察指標(biāo)數(shù)據(jù)有方差不齊的情況,故將AUC(0-∞)經(jīng)對數(shù)轉(zhuǎn)換后進(jìn)行方差分析,用雙單側(cè)t檢驗進(jìn)行生物等效性判斷,MRT采用非參數(shù)法秩和檢驗統(tǒng)計分析,P<0.05為有顯著性差異。

    3 結(jié)果

    3.1 藥動學(xué)考察

    3.1.1 方法學(xué)考察結(jié)果 在0.1~5 μg·mL-1內(nèi),在規(guī)定的測定條件下,鐵對照品酸處理溶液、含鐵對照品的血漿和各組織勻漿液中,鐵對照品酸處理液的原子吸收光度值與鐵濃度線性相關(guān),其標(biāo)準(zhǔn)曲線,線性范圍及相關(guān)系數(shù)見表1;高、中、低濃度鐵對照品溶液(3.2,1.4,0.1 μg·mL-1)在水溶液、血漿溶液及心、肝、脾、肺和腎等組織的日間、日內(nèi)精密度見表2,回收率測定結(jié)果見表3。由表2、表3可見日內(nèi)、日間精密度RSD均<10%(n=5),各濃度的回收率均在80%~120%,證實該測定方法是可靠的。

    表1 含鐵標(biāo)準(zhǔn)品各組織樣品的標(biāo)準(zhǔn)曲線、濃度范圍和相關(guān)系數(shù)(n=6)Tab 1 Standard curves, linear ranges and correlation coefficient of iron standard in organ samples (n=6)

    表2 精密度實驗結(jié)果(n=5)Tab 2 Results of precision test (n=5)

    ?

    表3 回收實驗結(jié)果(n=6)Tab 3 Results of recovery tests(n=6)

    ?

    3.1.2 藥動學(xué)結(jié)果 2組大鼠分別尾靜脈給予高、低濃度的dextran-SPIO-NPs、OCMCS-USPIO-NPs,血藥濃度隨時間變化的情況見圖1。圖中血鐵濃度低于空白血漿鐵濃度的點均以血鐵濃度為0表示,虛線表示本底血漿的波動,實線是給予高、低濃度的納米粒后,扣除本底鐵波動得到的藥時曲線圖。經(jīng)DAS2.1.1軟件處理,分別求出統(tǒng)計矩參數(shù),OCMCS-USPIO-NPs組與dextran-SPIO-NPs組做兩樣本t檢驗,結(jié)果見表4。

    圖1 尾靜脈給予生理鹽水及高、低濃度的OCMCS -USPIO-NPs(A)、dextran-SPIO-NPs(B)后測得的大鼠血漿鐵濃度藥時曲線(n=6,x±s )Fig 1 Concentration-time curve of iron in rats plasma following high or low dose of OCMCS-USPIO-NPs(A), dextran-SPIONPs(B) or physiological saline injected through tail vein(n=6,x±s )

    表4 尾靜脈分別給予高、低濃度的OCMCS-USPIO-NPs或dextran-SPIO-NPs后測得的大鼠血漿鐵濃度的主要藥動學(xué)參數(shù)(n=6,±s )Tab 4 Main pharmacokinetic parameters of iron in rats’ plasma following high or low dose of OCMCS-USPIO-NPs or dextran-SPIO-NPs injected through tail vein(n=6,±s )

    表4 尾靜脈分別給予高、低濃度的OCMCS-USPIO-NPs或dextran-SPIO-NPs后測得的大鼠血漿鐵濃度的主要藥動學(xué)參數(shù)(n=6,±s )Tab 4 Main pharmacokinetic parameters of iron in rats’ plasma following high or low dose of OCMCS-USPIO-NPs or dextran-SPIO-NPs injected through tail vein(n=6,±s )

    ?

    ?

    3.2 組織分布考察

    dextran-SPIO-NPs組、OCMCS-USPIO-NPs組的組織分布圖見圖2。組織分布考察將0 h內(nèi)各大鼠組織內(nèi)鐵含量為基數(shù),將(各個時間點鐵含量-0 h組織內(nèi)鐵含量)/0 h組織內(nèi)鐵含量,求得組織相對鐵含量,消除背景干擾,對組織情況進(jìn)行評價。其中組織鐵中含量與組織本身鐵含量差低于1%記做1%,表示臟器內(nèi)沒有磁性納米粒滯留,給藥組與空白組鐵含量相近;數(shù)值>1%時,納米粒在該臟器內(nèi)蓄積,>100%時有大量蓄積。

    圖2 尾靜脈給予不同劑量dextran-SPIO-NPs(A)和OCMCS-USPIO-NPs(B)后各時間點大鼠心、肝、脾、肺和腎內(nèi)的鐵含量(n=3,±s ) A-低濃度(5.90 mg·kg-1);B-高濃度(13.27 mg·kg-1)Fig 2 Retention of iron in rats’hearts, livers, spleens lungs and kinneys versus time after one intravenous injection of different dosage of dextran-SPIO-NPs (A) or OCMCS-USPIO- NPs(n=3,±s ) A-low concentration(5.90 mg·kg-1); B-high (13.27 mg·kg-1) concentration

    粒徑是決定USPIO-NPs體內(nèi)分布的重要因素,粒徑<50 nm的OCMCS-USPIO-NPs理論上具有部分逃避肝、脾吞噬的特性,而粒徑>100 nm的dextran-SPIO-NPs很可能被肝、脾吞噬。組織分布結(jié)果表明,2組主要分布于肝、脾部位。就dextran-SPIO-NPs組而言,低濃度組在2~8 h肝、脾吞噬了大量的納米粒(>150%),16 h肝臟內(nèi)仍有少量納米粒(約37%),但脾臟鐵含量降至正常水平(約5%);其高濃度組2~16 h肝、脾內(nèi)始終存在大量的納米粒(200%左右)。對于OCMCS-USPIO-NPs組,低濃度時肝、脾吞噬量分別在100%(2~8 h)和30%(2~4 h)左右,16 h鐵含量降至正常水平(1%左右),其他臟器未見明顯的吞噬;高濃度時肝、脾對納米粒的吞噬量上升至110%~190%(2~16 h)和60%~120%(2~16 h),心臟發(fā)現(xiàn)有少量吞噬(14%左右),這可能是由于藥物主要集中于血液中,導(dǎo)致心臟內(nèi)殘留血液中鐵含量上升,其他臟器未見明顯的吞噬。

    此外,可以從數(shù)據(jù)中分析出肝、脾累積吞噬量的變化規(guī)律:dextran-SPIO-NPs組肝臟累積吞噬量的均值隨劑量的倍增而成倍的增加,從501%上升至1 004%,而脾臟的累積吞噬量均值的增加遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于劑量的倍增,從364%上升至1 013%,OCMCS-USPIO-NPs組遵從同樣的規(guī)律,肝臟的從276%上升至585%,脾臟的從56.1%上升至315.4%。這說明低濃度時納米粒大多是由肝臟吞噬的,并且高濃度下仍然未達(dá)到吞噬的飽和狀態(tài),而脾臟在低濃度時僅僅吞噬少量的納米粒,卻在高濃度時被調(diào)動起來,參與吞噬更多的納米粒,導(dǎo)致總吞噬量隨劑量的倍增更快的增加(dextran-SPIO-NPs組從865%上升至2018%;OCMCS-USPIO-NPs組從332%上升至900%)。

    空白組大鼠和高濃度2組給藥組大鼠16 h的各組織普魯士藍(lán)染色切片圖見圖3??瞻捉M(1~5組)大鼠心、肝、脾、肺和腎組織普魯士藍(lán)染色均為陰性;dextran-SPIO-NPs組(6~10組),大鼠肝、脾組織可見大量的普魯士藍(lán)鐵染色,呈深藍(lán)色。而心、腎和肺組織普魯士藍(lán)染色呈陰性,可能是由于dextran-SPIO-NPs粒徑大,被血管網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的枯否細(xì)胞大量吞噬,導(dǎo)致在肝、脾等含枯否豐富的組織大量富集,使致其體內(nèi)半衰期短,表觀分布容積??;在OCMCS-SPIO-NPs組(11~15組),心、肝、脾、肺和腎組織普魯士藍(lán)染色后,肝、脾存在少量藍(lán)色的普魯士藍(lán)鐵染色散點,其顏色較淺,呈淡藍(lán)色,說明有少量OCMCS-SPIONPs被含枯否細(xì)胞豐富的肝、脾攝取;大鼠肺切片普魯士藍(lán)染色后,只有極少量的普魯士藍(lán)染色的藍(lán)色散點,可能由于OCMCS- USPIO-NPs粒徑小,半衰期長,分布廣。而dextran-SPIO-NPs由于粒徑較大,易被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)攝取,在含枯否豐富的血管網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)如肝、脾等組織普魯士藍(lán)染色深于OCMCS-USPIO-NPs,其結(jié)果與原子分光光度法測定組織內(nèi)鐵含量測定結(jié)果一致也與我們前期體外抗吞噬細(xì)胞吞噬結(jié)果相一致[6]。

    圖3 空白組、dextran-SPIO-NPs組、OCMCS-USPIO-NPs組和dextran-SP10-NPs組大鼠的心、肝、脾、肺和腎的普魯士藍(lán)染色圖(200×,標(biāo)尺為5 μm) 1~5-空白組的心、肝、脾、肺和腎;6~10-dextran-SPIO-NPs組的各臟器;11~15-OCMCS-USPIO-NPs組的各臟器Fig 3 Prussian blue staining of SD rats’ heart, liver, spleen, lung and kidney in control, dextran-SPIO-NPs, OCMCS-USPIO-NPs and dextran-SP10-NPs groups 1-5-heart, liver, spleen, lung and kidney of control group; 6-10-the same organs of dextran-SPIO-NPs group; 11-15-the same organs of OCMCSUSPIO-NPs group(200×, the scale bars are 5 μm)

    4 討論

    由圖1可知,基礎(chǔ)血漿鐵濃度(空白組血漿鐵濃度)隨時間變化而波動,1 h時基礎(chǔ)鐵濃度出現(xiàn)釋放峰,之后緩慢下降,4 h以后在5 mg·L-1左右波動,24 h時恢復(fù)初始水平。6只空白鼠基礎(chǔ)血漿鐵濃度各時間點間具有顯著性差異(P<0.05),說明空白基底隨時間變化存在波動。動物體內(nèi)本身含有鐵,自體對鐵的調(diào)節(jié)以及個體差異、飲水對鐵的補充都會影響藥動學(xué)特征。從實驗結(jié)果可知,大鼠基礎(chǔ)血漿濃度1 h有釋放峰,這可能是由于失血過多引起的體內(nèi)鐵調(diào)節(jié):機(jī)體調(diào)動了儲備的鐵,造成了暫時的鐵濃度激增。為了消除自體鐵濃度的波動,測定血漿中鐵含量采用空白鼠(注射了生理鹽水的大鼠)在每個時間點與實驗鼠同步采血,用同一時間點的實驗鼠血鐵濃度減去空白鼠血鐵濃度的方法,將因本底波動帶來的血漿鐵濃度波動扣除。消除本底的干擾后,藥時曲線仍具有一定的趨勢,從圖1可以看出,低濃度組2種納米粒的藥時曲線變化與鐵本底的波動接近,由藥動學(xué)數(shù)據(jù)的統(tǒng)計結(jié)果可知:相對于dextran-SPIO-NPs (t1/2=2.2 h),無論是高濃度還是低濃度組,OCMCSUSPIO-NPs表現(xiàn)出長循環(huán)的特征,半衰期(t1/2)顯著延長(P<0.05),藥時曲線下面積(AUC)顯著性增加(P<0.05),體內(nèi)滯留時間(MRT)顯著性延長,這可能是dextran-SPIO-NPs粒徑>100 nm,進(jìn)入體內(nèi)后迅速被肝、脾吞噬,體內(nèi)半衰期短和AUC小,而粒徑<50 nm的OCMCS-USPIO- NPs部分逃避了肝、脾的吞噬,在血液中維持了較長的時間和較高的濃度,因此半衰期延長,肝、脾等網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)普魯士藍(lán)顏色變淺,可通過被動靶向機(jī)制,實現(xiàn)腫瘤淋巴造影,該結(jié)果與文獻(xiàn)報道一致[3]。

    REFERENCES

    [1] GUPTA A K, GUPTA M. Synthesis and surface engineering of iron oxide nanoparticles for biomedical applications [J]. Biomaterials, 2005, 26(6): 3995-4021.

    [2] SUN C, LEE J S H, ZHANG M Q. Magnetic nanoparticles in MR imaging and drug delivery [J]. Adv Drug Deliv Rev, 2008, 60(4): 1252-1265.

    [3] CHATTERJEE J, HAIK Y, CHEN C J. Size dependent magnetic properties of iron oxide nanoparticles [J]. J Magn Magn Mater, 2003, 257(1): 113-118.

    [4] COROT C, ROBERT P, IDEE J M, et al. Recent advances in iron oxide nanocrystal technology for medical imaging J]. Adv Drug Deliv Rev, 2006, 58(14): 1471-1504.

    [5] MOGHIIMI S M, HUNTER A C, MURRAY J C. Longcirculating and target-specific nanoparticles: theory to practice [J]. Pharmacol Rev, 2001, 53(2): 283-318.

    [6] PLASSAT V, MARTINA M.S, BARRATT G, et al. Sterically stabilized superparamagnetic liposomes for MR imaging and cancer therapy: Pharmacokinetics and biodistribution [J]. Int J Pharm, 2007, 344(1/2): 118-127.

    [7] FAN C X, GAO W H, CHEN Z L, et al. The synthesis and characterization of O-carboxymethyl-chitosan ultra-small superparamagnetic iron oxide nanoparticles [J]. Chin J Mod Appl Pharm (中國現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué)), 2010, 27(9): 825-831.

    [8] LIU J Y, ZHANG Y, WANG K P. The relationship between the pharmacokinetic parameters and dose of Angelica sinensis polusaccharide-iron complex in rats [J]. Chin Hosp Pharm J(中國醫(yī)院藥學(xué)雜志), 2012, 303(3): 183-185.

    Pharmacokinetics, Tissue Distribution of O-Carboxymethyl Chitosans Ultrasmall Superparamagnetic Iron Oxide Nanoparticles in Rats

    FAN Caixia1, CHEN Zhixi1, GAO Wenhui2, LAI Shuizhao1, ZHENG Jinkun1
    (1.Affiliated Yuebei People’s Hospital, Shantou University, Medical College, Shaoguan 512026, China; 2.Affiliated Cancer Hospital of Guangzhou Medical College, Guangzhou 510005, China)

    OBJECTIVE To study pharmacokinetics features and tissue distribution of OCMCS-USPIO-NPs in SD rats in vivo to provide evidence for their clinical use in future. METHODS SD rats were divided into three groups: blank group, OCMCMS-USPIO-NPs group and dextran-SPIO-NPs group, then iron content in plasma and different tissue including heart, liver, spleen, lung and kidney were determined by atomic absorption spectroscopy. The iron concentration-time in plasma and tissues was drawn. The plasma concentration-time data of iron were analyzed by DAS 2.1.1 statistical software and the main pharmacokinetics parameters was caculated. Statistics analysis combined with Prussian blue staining were used to demonstrate OCMCS-USPIO-NPs and dextran-SPIO-NPs tissue distribution difference in rats. RESULTS There was significant difference between OCMCS-USPIO-NPs group and dextran-SPIO-NPs group in the main pharmacokinetics parameters of iron, including AUC, MRT, t1/2, CL, V2(P<0.05), the t1/2in OCMCS-USPIO-NPs group were longer than 7 h in high or low dose group. Compared with dextran-SPIO-NPs group, not only statistical analysis but also Prussian blue staining results indicated the iron content in liver, spleen and lung in OCMCS-USPIO-NPs group were significant lower than dextran-SPIO-NPs. CONCLUSION OCMCS-USPIO-NPs can escape the RES capture to gain longer-circulation time.

    ultrasmall superparamagnetic iron oxide nanoparticles; atomic absorption spectroscopy; pharmacokinetics; tissue distribution

    R969.1

    A

    1007-7693(2013)10-1088-07

    2012-12-14

    廣東省自然科學(xué)基金博士啟動項目(S2011040003279);韶關(guān)市科學(xué)計劃項目[韶科(衛(wèi))2011-20];韶關(guān)市衛(wèi)生局項目(Y11029)

    范彩霞,女,博士,主管藥師 Tel: (0751)8101272 E-mail: mydream0509@qq.com

    猜你喜歡
    藥動學(xué)低濃度血漿
    糖尿病早期認(rèn)知功能障礙與血漿P-tau217相關(guān)性研究進(jìn)展
    水環(huán)境中低濃度POPs的控制技術(shù)研究進(jìn)展
    血漿置換加雙重血漿分子吸附對自身免疫性肝炎合并肝衰竭的細(xì)胞因子的影響
    愛眼有道系列之三十二 用低濃度阿托品治療兒童近視,您了解多少
    大黃酸磷脂復(fù)合物及其固體分散體的制備和體內(nèi)藥動學(xué)研究
    中成藥(2019年12期)2020-01-04 02:02:24
    鳶尾苷元在兔體內(nèi)的藥動學(xué)
    中成藥(2017年10期)2017-11-16 00:49:54
    白楊素磷脂復(fù)合物的制備及其藥動學(xué)行為
    中成藥(2017年5期)2017-06-13 13:01:12
    CHF患者血漿NT-proBNP、UA和hs-CRP的變化及其臨床意義
    呼替奇在雞體內(nèi)的藥動學(xué)研究
    腦卒中后中樞性疼痛相關(guān)血漿氨基酸篩選
    91精品三级在线观看| 精品久久久久久电影网| 久久久久久人人人人人| 韩国av一区二区三区四区| 黑人欧美特级aaaaaa片| 国产精品亚洲av一区麻豆| 人人妻人人澡人人看| 欧美精品一区二区免费开放| 午夜精品在线福利| 欧美成狂野欧美在线观看| 欧美日韩成人在线一区二区| 亚洲一区二区三区欧美精品| 日本a在线网址| 久久人妻熟女aⅴ| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 国产日韩欧美亚洲二区| 身体一侧抽搐| 一二三四在线观看免费中文在| 黄色丝袜av网址大全| 黄色片一级片一级黄色片| 一夜夜www| 成人亚洲精品一区在线观看| 一个人免费在线观看的高清视频| 深夜精品福利| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 免费在线观看完整版高清| 成年动漫av网址| 两个人免费观看高清视频| 他把我摸到了高潮在线观看| 两个人免费观看高清视频| 午夜免费观看网址| 一区二区日韩欧美中文字幕| 久久亚洲精品不卡| 91麻豆精品激情在线观看国产 | 欧美精品亚洲一区二区| 精品福利观看| 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 曰老女人黄片| 少妇 在线观看| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 激情在线观看视频在线高清 | 久久人妻熟女aⅴ| 亚洲av熟女| 香蕉丝袜av| 久久久久久久精品吃奶| av超薄肉色丝袜交足视频| 久久久久久久久久久久大奶| 免费看十八禁软件| 久久精品91无色码中文字幕| 亚洲人成电影观看| 久99久视频精品免费| 亚洲一区二区三区欧美精品| 国产有黄有色有爽视频| 自线自在国产av| 精品国产一区二区久久| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 在线看a的网站| 俄罗斯特黄特色一大片| 俄罗斯特黄特色一大片| 精品国产乱码久久久久久男人| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| а√天堂www在线а√下载 | 无限看片的www在线观看| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 国产精品免费视频内射| 在线观看www视频免费| 三上悠亚av全集在线观看| 极品少妇高潮喷水抽搐| 亚洲第一av免费看| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 丰满的人妻完整版| 日韩欧美一区二区三区在线观看 | 国产精品偷伦视频观看了| 99精品久久久久人妻精品| 久久久国产成人精品二区 | 成年人黄色毛片网站| 满18在线观看网站| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 国产欧美日韩一区二区精品| x7x7x7水蜜桃| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 精品一区二区三区av网在线观看| 亚洲专区字幕在线| 国产亚洲精品久久久久久毛片 | 成人黄色视频免费在线看| 视频区图区小说| 欧美黄色淫秽网站| 女人被狂操c到高潮| 一级片'在线观看视频| 看免费av毛片| 黄色毛片三级朝国网站| 不卡av一区二区三区| 女同久久另类99精品国产91| 精品一区二区三区视频在线观看免费 | 好男人电影高清在线观看| 精品视频人人做人人爽| 啦啦啦 在线观看视频| 亚洲九九香蕉| 又大又爽又粗| 女人被狂操c到高潮| 黑人欧美特级aaaaaa片| 国产免费男女视频| 一区二区三区激情视频| 纯流量卡能插随身wifi吗| 丁香欧美五月| 日韩三级视频一区二区三区| 性色av乱码一区二区三区2| 99riav亚洲国产免费| 国产国语露脸激情在线看| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 欧美精品av麻豆av| 久久国产亚洲av麻豆专区| 不卡av一区二区三区| 动漫黄色视频在线观看| 日本五十路高清| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 天天添夜夜摸| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 国产av又大| 男女高潮啪啪啪动态图| 91在线观看av| 亚洲中文字幕日韩| 国产精品综合久久久久久久免费 | 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 久久精品国产99精品国产亚洲性色 | 欧美日韩一级在线毛片| 人妻久久中文字幕网| 午夜免费鲁丝| 无限看片的www在线观看| 午夜视频精品福利| 精品人妻在线不人妻| 老汉色av国产亚洲站长工具| 国产精品.久久久| 亚洲av第一区精品v没综合| 亚洲熟女精品中文字幕| 久久久久国产一级毛片高清牌| 国产人伦9x9x在线观看| 一区二区三区国产精品乱码| 一本大道久久a久久精品| 欧美亚洲日本最大视频资源| 美女午夜性视频免费| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 大陆偷拍与自拍| 麻豆av在线久日| 中文字幕人妻熟女乱码| 美女扒开内裤让男人捅视频| 高潮久久久久久久久久久不卡| 午夜91福利影院| 美女视频免费永久观看网站| 国产不卡一卡二| 天堂动漫精品| 男女下面插进去视频免费观看| 三级毛片av免费| 中文字幕最新亚洲高清| 国产精品电影一区二区三区 | 亚洲精华国产精华精| 欧美色视频一区免费| 国产成人欧美在线观看 | 99国产精品免费福利视频| 精品免费久久久久久久清纯 | 亚洲成人免费电影在线观看| 国产精品久久久av美女十八| 久久久久精品人妻al黑| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 日本一区二区免费在线视频| 欧美成人免费av一区二区三区 | 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 精品人妻在线不人妻| 亚洲人成77777在线视频| 日韩大码丰满熟妇| 久久久久视频综合| 免费观看精品视频网站| 欧美性长视频在线观看| 飞空精品影院首页| 亚洲成av片中文字幕在线观看| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 男女免费视频国产| tocl精华| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 看片在线看免费视频| 黄色成人免费大全| 午夜影院日韩av| 亚洲精品一二三| 国产有黄有色有爽视频| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 校园春色视频在线观看| 男男h啪啪无遮挡| 一级黄色大片毛片| 免费黄频网站在线观看国产| 老汉色av国产亚洲站长工具| 午夜福利在线观看吧| 精品亚洲成国产av| 亚洲片人在线观看| 亚洲人成77777在线视频| 亚洲一码二码三码区别大吗| av片东京热男人的天堂| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 国产精品99久久99久久久不卡| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 国产91精品成人一区二区三区| 久久99一区二区三区| 三级毛片av免费| 脱女人内裤的视频| 日本黄色视频三级网站网址 | 欧美丝袜亚洲另类 | 精品无人区乱码1区二区| 美女扒开内裤让男人捅视频| 无限看片的www在线观看| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 久久中文看片网| 最近最新中文字幕大全免费视频| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 淫妇啪啪啪对白视频| 亚洲色图av天堂| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 19禁男女啪啪无遮挡网站| a在线观看视频网站| 欧美精品av麻豆av| 久热爱精品视频在线9| 久久狼人影院| 成在线人永久免费视频| 在线观看免费午夜福利视频| 黑人欧美特级aaaaaa片| 激情在线观看视频在线高清 | 国产成人一区二区三区免费视频网站| 男女高潮啪啪啪动态图| 岛国在线观看网站| tube8黄色片| 久久中文字幕人妻熟女| e午夜精品久久久久久久| 男男h啪啪无遮挡| ponron亚洲| videosex国产| 日本wwww免费看| 日日爽夜夜爽网站| 少妇粗大呻吟视频| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 中文欧美无线码| 黄色丝袜av网址大全| 亚洲精品成人av观看孕妇| 国产免费av片在线观看野外av| 久久亚洲真实| 亚洲国产中文字幕在线视频| 不卡av一区二区三区| 在线视频色国产色| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 国产亚洲欧美98| 国产成人精品久久二区二区免费| 中文字幕制服av| 女性生殖器流出的白浆| 中文字幕人妻熟女乱码| 久久久久久久久免费视频了| 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 日韩欧美一区二区三区在线观看 | 91麻豆av在线| 国产亚洲精品一区二区www | 精品熟女少妇八av免费久了| 久久国产亚洲av麻豆专区| av天堂在线播放| 国产伦人伦偷精品视频| 国产单亲对白刺激| 欧美精品啪啪一区二区三区| av欧美777| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片 | 亚洲熟女精品中文字幕| 国产激情欧美一区二区| 亚洲全国av大片| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区 | 久久精品成人免费网站| 久久久久国产一级毛片高清牌| 欧美人与性动交α欧美软件| 色在线成人网| 国产精品.久久久| 视频区图区小说| 在线观看舔阴道视频| 乱人伦中国视频| 香蕉丝袜av| 久久久久久亚洲精品国产蜜桃av| 成人永久免费在线观看视频| 精品久久久久久,| 电影成人av| 国产成人啪精品午夜网站| 久久久久国产精品人妻aⅴ院 | 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 成年版毛片免费区| 精品一品国产午夜福利视频| a级毛片在线看网站| 在线播放国产精品三级| 精品高清国产在线一区| 日韩免费av在线播放| 精品久久久久久久毛片微露脸| 国产区一区二久久| 成人永久免费在线观看视频| 搡老岳熟女国产| 一夜夜www| 欧美国产精品一级二级三级| 久久国产精品影院| 丰满的人妻完整版| 两性夫妻黄色片| 丁香六月欧美| 极品少妇高潮喷水抽搐| 免费观看人在逋| 一级片'在线观看视频| 国产精品1区2区在线观看. | 这个男人来自地球电影免费观看| 正在播放国产对白刺激| 国产野战对白在线观看| 久久人妻熟女aⅴ| 国产精品欧美亚洲77777| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 久久久水蜜桃国产精品网| e午夜精品久久久久久久| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 一区二区日韩欧美中文字幕| 高清毛片免费观看视频网站 | 三级毛片av免费| 日韩免费高清中文字幕av| tube8黄色片| 母亲3免费完整高清在线观看| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 999久久久国产精品视频| 天堂中文最新版在线下载| 成人影院久久| 久久久久久久国产电影| 久久中文字幕人妻熟女| 亚洲avbb在线观看| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 午夜视频精品福利| 免费高清在线观看日韩| 91麻豆av在线| 成年版毛片免费区| 亚洲专区中文字幕在线| 视频区欧美日本亚洲| 嫁个100分男人电影在线观看| 色综合欧美亚洲国产小说| 久热爱精品视频在线9| www.999成人在线观看| 精品无人区乱码1区二区| 欧美国产精品va在线观看不卡| 午夜福利乱码中文字幕| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 99久久99久久久精品蜜桃| 一区福利在线观看| 青草久久国产| 亚洲中文日韩欧美视频| 一级a爱片免费观看的视频| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片 | 两人在一起打扑克的视频| 色老头精品视频在线观看| 精品一区二区三卡| 亚洲精华国产精华精| 黑人欧美特级aaaaaa片| 国产精品综合久久久久久久免费 | 在线av久久热| 色婷婷久久久亚洲欧美| 黄色女人牲交| 国产极品粉嫩免费观看在线| 欧美性长视频在线观看| 国产精品二区激情视频| 老司机午夜十八禁免费视频| 欧美国产精品va在线观看不卡| 欧美黑人欧美精品刺激| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 国产主播在线观看一区二区| 亚洲熟女精品中文字幕| 咕卡用的链子| 日韩欧美一区二区三区在线观看 | 免费一级毛片在线播放高清视频 | 久久久久视频综合| 91大片在线观看| 妹子高潮喷水视频| 国产一区二区激情短视频| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 成年人午夜在线观看视频| 国产精品免费一区二区三区在线 | 欧美成人免费av一区二区三区 | 另类亚洲欧美激情| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 又黄又粗又硬又大视频| 涩涩av久久男人的天堂| 男人的好看免费观看在线视频 | 男人的好看免费观看在线视频 | 中文欧美无线码| 精品卡一卡二卡四卡免费| av在线播放免费不卡| 99riav亚洲国产免费| 亚洲中文日韩欧美视频| 午夜福利欧美成人| 午夜精品在线福利| 免费日韩欧美在线观看| 亚洲熟妇熟女久久| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 欧美+亚洲+日韩+国产| 免费人成视频x8x8入口观看| 国产成人精品久久二区二区免费| 丁香欧美五月| 久9热在线精品视频| 一本大道久久a久久精品| 亚洲av美国av| 日本vs欧美在线观看视频| 欧美不卡视频在线免费观看 | 亚洲中文日韩欧美视频| 精品一品国产午夜福利视频| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 午夜91福利影院| 欧美激情 高清一区二区三区| 精品久久久久久电影网| 女性被躁到高潮视频| 成年人免费黄色播放视频| 一级片'在线观看视频| 亚洲全国av大片| 日本vs欧美在线观看视频| 色婷婷久久久亚洲欧美| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 18在线观看网站| 精品国产国语对白av| 国产精品九九99| 国产高清国产精品国产三级| 国产又色又爽无遮挡免费看| 精品熟女少妇八av免费久了| 激情视频va一区二区三区| 久久人妻熟女aⅴ| 成人精品一区二区免费| 国产精品国产av在线观看| 两人在一起打扑克的视频| 天堂俺去俺来也www色官网| 天天添夜夜摸| 怎么达到女性高潮| 免费少妇av软件| 久久香蕉激情| 一边摸一边做爽爽视频免费| 免费高清在线观看日韩| 精品一区二区三区av网在线观看| 国产真人三级小视频在线观看| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 麻豆乱淫一区二区| 欧美在线一区亚洲| 丝袜美足系列| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 欧美中文综合在线视频| 男女午夜视频在线观看| 青草久久国产| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 最近最新中文字幕大全免费视频| 欧美激情久久久久久爽电影 | 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 成人永久免费在线观看视频| 午夜福利在线观看吧| 亚洲精品国产区一区二| 久久这里只有精品19| 亚洲第一av免费看| 91大片在线观看| 久久香蕉国产精品| 国产精品乱码一区二三区的特点 | cao死你这个sao货| 动漫黄色视频在线观看| 一进一出抽搐动态| 精品国产一区二区三区四区第35| 国产精品一区二区在线不卡| 国产免费现黄频在线看| 欧美精品啪啪一区二区三区| 国产精品成人在线| 亚洲少妇的诱惑av| 欧美国产精品一级二级三级| 国产欧美日韩精品亚洲av| 在线观看舔阴道视频| 亚洲av欧美aⅴ国产| 妹子高潮喷水视频| 女人精品久久久久毛片| 国产免费av片在线观看野外av| 黄色怎么调成土黄色| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 9热在线视频观看99| 久久午夜亚洲精品久久| 亚洲美女黄片视频| 91大片在线观看| 国产精品.久久久| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 亚洲人成电影观看| av线在线观看网站| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 日韩免费高清中文字幕av| 免费看十八禁软件| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 美女扒开内裤让男人捅视频| 亚洲精品美女久久av网站| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 最近最新免费中文字幕在线| 国产高清视频在线播放一区| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 日韩欧美三级三区| av电影中文网址| 1024视频免费在线观看| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 多毛熟女@视频| 亚洲精品粉嫩美女一区| 欧美激情久久久久久爽电影 | 最新的欧美精品一区二区| 成人国产一区最新在线观看| 午夜成年电影在线免费观看| 国产亚洲欧美在线一区二区| 欧美日韩av久久| 99精品久久久久人妻精品| 无遮挡黄片免费观看| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 免费高清在线观看日韩| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 国产欧美日韩一区二区精品| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 50天的宝宝边吃奶边哭怎么回事| 欧美激情高清一区二区三区| 精品国产亚洲在线| 首页视频小说图片口味搜索| 在线永久观看黄色视频| 亚洲午夜理论影院| 日韩大码丰满熟妇| 欧美日韩亚洲高清精品| 国产精品免费大片| 久久久水蜜桃国产精品网| 757午夜福利合集在线观看| 欧美日韩视频精品一区| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 亚洲在线自拍视频| 精品免费久久久久久久清纯 | av片东京热男人的天堂| 宅男免费午夜| 欧美乱色亚洲激情| 久久性视频一级片| 久久国产乱子伦精品免费另类| xxx96com| 18禁美女被吸乳视频| 身体一侧抽搐| 99久久综合精品五月天人人| 老汉色av国产亚洲站长工具| 一边摸一边抽搐一进一出视频| av福利片在线| 精品人妻在线不人妻| 丝袜美足系列| 高清毛片免费观看视频网站 | 国产91精品成人一区二区三区| 亚洲欧美一区二区三区久久| 大香蕉久久成人网| 国产成人系列免费观看| 50天的宝宝边吃奶边哭怎么回事| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 午夜视频精品福利| 国产精品 欧美亚洲| 亚洲人成77777在线视频| 一边摸一边做爽爽视频免费| 亚洲一区高清亚洲精品| 亚洲熟妇中文字幕五十中出 | 精品人妻在线不人妻| 午夜日韩欧美国产| 黄片大片在线免费观看| 国产成人系列免费观看| 国产精品电影一区二区三区 | 一进一出抽搐gif免费好疼 | 在线观看66精品国产| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 在线免费观看的www视频| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 电影成人av| 午夜免费成人在线视频| xxx96com| 国产成人精品久久二区二区91| 久久久久久久国产电影| 久久久久精品国产欧美久久久| 成在线人永久免费视频| 激情在线观看视频在线高清 | 新久久久久国产一级毛片| 亚洲情色 制服丝袜| 男女免费视频国产| 国产欧美日韩一区二区三区在线| www.熟女人妻精品国产| 国产精品自产拍在线观看55亚洲 | 在线av久久热| 亚洲精品美女久久av网站| av免费在线观看网站| 免费不卡黄色视频| 深夜精品福利| 成年版毛片免费区| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 天堂动漫精品| 水蜜桃什么品种好| 十分钟在线观看高清视频www| 国产欧美日韩精品亚洲av| 国产精品一区二区精品视频观看| 国产成人免费观看mmmm| 天堂√8在线中文| 九色亚洲精品在线播放| 国产成人免费观看mmmm| 日本黄色日本黄色录像| 变态另类成人亚洲欧美熟女 | 久久这里只有精品19| 99热只有精品国产| 一边摸一边抽搐一进一出视频| 极品人妻少妇av视频| 91精品三级在线观看| 老司机在亚洲福利影院| 女人精品久久久久毛片| 黄色视频不卡| 麻豆成人av在线观看| 成年女人毛片免费观看观看9 | 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 久久久久久久久久久久大奶| 亚洲精品在线美女| 大码成人一级视频| videosex国产| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 婷婷丁香在线五月| 露出奶头的视频|