長(zhǎng)白山復(fù)序橐吾和狹苞橐吾花的脂溶性成分分析1)

朱 梅 劉洪章 劉淑英 于莉莉 吳國(guó)英

(吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)，長(zhǎng)春，1300118)

復(fù)序橐吾(Ligularia jaluensis Kom.)、狹苞橐吾(Ligularia intermedia Nakai)均為菊科(Compositae)橐吾屬(Ligularia Cass.)多年生草本植物，該屬植物藥用種類(lèi)較多，其根及根莖在我國(guó)許多地方同作為山紫菀入藥，具有潤(rùn)肺、止咳化痰、活血化瘀、清熱解毒之功效［1］。復(fù)序橐吾產(chǎn)于東北長(zhǎng)白山一帶，其莖直立，圓錐狀總狀花序或總狀花序，花黃色，管狀花多數(shù)，多生于海拔450 ～1 000 m 的草甸子及林緣濕草地，為長(zhǎng)白山特有種［2－3］，狹苞橐吾產(chǎn)于我國(guó)云南、四川、貴州、湖北、湖南、河南、甘肅、陜西、華北及東北等省區(qū)，在朝鮮及日本也有分布，株高40 ～70 cm，全株無(wú)毛，頭狀花序多數(shù)且于莖頂集生成總狀序，花黃色，生于海拔120 ～3 400 m 的水邊、山坡、林緣、林下及高山草原等處［4］。在長(zhǎng)白山區(qū)，復(fù)序橐吾和狹苞橐吾根及根莖可藥用;春季，2 種橐吾的嫩葉可食用;夏秋季節(jié)，由于其葉形優(yōu)美，黃色花純正，花序長(zhǎng)，花期7—9月，可點(diǎn)綴沿途風(fēng)景，是長(zhǎng)白山區(qū)夏秋時(shí)節(jié)的景觀植物;此外，復(fù)序橐吾和狹苞橐吾的花序用開(kāi)水沖泡代茶飲，具有清熱解毒、消炎去火等作用。目前，已有文獻(xiàn)［5 －11］報(bào)道了復(fù)序橐吾葉和狹苞橐吾根及根莖的化學(xué)成分，但有關(guān)花的化學(xué)成分尚未見(jiàn)報(bào)道。本研究以長(zhǎng)白山野生復(fù)序橐吾和狹苞橐吾花為材料，采用氣相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)，對(duì)脂肪酸等成分進(jìn)行分析、鑒定，為長(zhǎng)白山橐吾屬植物資源的進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試材料

狹苞橐吾、復(fù)序橐吾花于2011年7—8月分別采自長(zhǎng)白縣十五道溝海拔900 ～1 100 m 的水邊、山坡、林緣、林下及吉林省敦化市黃泥河林業(yè)局所轄區(qū)海拔416 ～670 m 的林緣、沼澤濕草地。樣品經(jīng)吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院董然教授鑒定為復(fù)序橐吾和狹苞橐吾的花。標(biāo)本保存于吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院。

1.2 儀器與試劑

氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀(Agilent 6890N/5973I)，HH－6B 數(shù)顯恒溫水浴鍋(泰特牌)，RE －52AA 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海亞榮生化儀器廠)。石油醚、甲醇、氫氧化鉀、正己烷均為國(guó)產(chǎn)分析純。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 脂溶性成分的提取

將干燥的復(fù)序橐吾、狹苞橐吾花粉碎，過(guò)40 目篩，分別稱(chēng)取8.0 g，放入折好的濾紙筒內(nèi)，將濾紙筒放入索氏提取器內(nèi)，連接已干燥的250 mL 圓底燒瓶，以石油醚(60 ～90 ℃)為溶劑，88 ℃恒溫水浴加熱，回流提取6 h，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀除去石油醚，并進(jìn)一步在烘箱中除去殘存的溶劑，得到黃色油狀物，冰箱中4 ℃存放備用。

1.3.2 脂肪酸的甲酯化

參照文獻(xiàn)［12］的方法，對(duì)脂肪酸進(jìn)行甲酯化。

1.3.3 GC－MS 分析

氣相色譜條件:色譜柱為DB －1(30.00 m ×0.25 mm×0.25 μm)彈性石英毛細(xì)管柱;進(jìn)樣口溫度250℃，初始柱溫70 ℃，保持2 min，以6 ℃/min 升溫速率升至230 ℃，保持10 min;進(jìn)樣量0.2 μL，載氣為氦氣，分流比20∶ 1，流速1.0 mL/min，柱前壓59.8 KPa。

質(zhì)譜條件:離子源為EI 源，電子能量70 eV，全掃描方式，掃描范圍m/z =33 ～500 amu，速度0.50 s/dec，溶劑延遲2.75 min。

定性定量分析:取酯化的樣品溶液0.2 μL 進(jìn)樣，按GC － MS 分析條件對(duì)樣品進(jìn)行分析，通過(guò)G1701BA 化學(xué)工作站數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)，檢索NIST98質(zhì)譜圖庫(kù)，分別與八峰索引及EPA/NIH 質(zhì)譜圖集的標(biāo)準(zhǔn)譜圖進(jìn)行對(duì)照、復(fù)核，并結(jié)合相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行人工譜圖解析，確定各個(gè)化學(xué)成分，同時(shí)采用峰面積歸一化法計(jì)算出各成分的相對(duì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)。

2 結(jié)果與分析

甲酯化后的脂溶性成分通過(guò)氣相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)分析，2 種橐吾花脂溶性成分的總離子流圖見(jiàn)圖1～圖2。

圖1 復(fù)序橐吾花脂溶性成分總離子流色譜圖

從復(fù)序橐吾花的脂溶性成分總離子色譜圖檢測(cè)出27 個(gè)色譜峰，鑒定了19 個(gè)化學(xué)組分，占色譜總餾分出峰面積的93.08%，其中脂肪酸7 種(占總含量的70.54%)，非脂肪酸12 種(占總含量22.54%)。從狹苞橐吾花的脂溶性成分總離子色譜圖中得到51 個(gè)色譜峰，鑒定出34 個(gè)化學(xué)組分，占色譜總餾分出峰面積的75.34%，其中脂肪酸13 種(占總含量55.15%)，非脂肪酸20 種(占總含量20.19%)。鑒定的各化學(xué)成分詳見(jiàn)表1～表2。

圖2 狹苞橐吾花脂溶性成分總離子流色譜圖

表1 復(fù)序橐吾和狹苞橐吾花脂肪酸成分組分及相對(duì)含量

表1的結(jié)果顯示，2 種橐吾花共有6 個(gè)相同組分，分別為(Z，Z)－9，12 － 十八碳二烯酸(亞油酸)、(E)－9 －十八碳烯酸(油酸)、(Z，Z，Z)－9，12，15 －十八碳三烯酸(亞麻酸)、n －十四酸(肉豆蔻酸)、n － 十六酸(軟脂酸)、n － 十八碳酸(硬脂酸)，但其相對(duì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)有明顯差異，復(fù)序橐吾的不飽和脂肪酸相對(duì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)總和較狹苞橐吾高25.26%，其中亞油酸在復(fù)序橐吾花中含量最高達(dá)24.59%;飽和脂肪酸軟脂酸在復(fù)序橐吾、狹苞橐吾中含量均較高，分別為19.12%、22.32%。除上述脂肪酸成分外，在本試驗(yàn)中還鑒定了28 種非脂肪酸組分(見(jiàn)表2)，但含量較低，這可能與試驗(yàn)方法有關(guān)，且28 種化合物在供試的2 種橐吾花中所含成分差別較大，共有成分只有4 種(植醇、十六烷、二十烷、二十八烷)，狹苞橐吾的非脂肪酸種類(lèi)多于復(fù)序橐吾。復(fù)序橐吾和狹苞橐吾花非脂肪酸成分的比較見(jiàn)表3。

表2 復(fù)序橐吾和狹苞橐吾花非脂肪酸成分組分及相對(duì)含量

表3 復(fù)序橐吾和狹苞橐吾花非脂肪酸成分 %

3 結(jié)論與討論

首次利用GC－MS 聯(lián)用法對(duì)復(fù)序橐吾和狹苞橐吾花的脂溶性成分進(jìn)行了研究，結(jié)果表明復(fù)序橐吾、狹苞橐吾花都含有一定的不飽和脂肪酸，分別占脂溶性成分的39.44%和13.25%，其中復(fù)序橐吾花的亞油酸、亞麻酸及油酸含量均高于狹苞橐吾。亞油酸、亞麻酸是人體必需脂肪酸，亞油酸具有免疫、抗癌、抗氧化、降低血清膽固醇和甘油三酸酯、抗脂肪肝、降低血脂、防止動(dòng)脈粥樣硬化及血栓形成等作用［13］，而且亞油酸還可在體內(nèi)轉(zhuǎn)化成人體必需的亞麻酸和花生四烯酸［14］。復(fù)序橐吾、狹苞橐吾花中的飽和脂肪酸分別占脂溶性成分的31.10%和41.90%，其中軟脂酸在2 種橐吾花中含量豐富。軟脂酸又稱(chēng)棕櫚酸，用途廣泛，可用于制蠟燭、肥皂、潤(rùn)滑脂、合成洗滌劑、軟化劑等，還具有延緩衰老、促進(jìn)細(xì)胞再生、預(yù)防心腦血管疾病的作用［15］。軟脂酸和亞油酸在全緣橐吾、東俄洛橐吾、黑苞橐吾、千花橐吾、單頭橐吾的揮發(fā)油中也有檢出［5，16－19］，但2 種橐吾花中軟脂酸和亞油酸的含量遠(yuǎn)高于報(bào)道值。這可能由于植物種類(lèi)、地域、來(lái)源、植物部位及提取方法不同導(dǎo)致其化學(xué)組成及含量存在差異。

復(fù)序橐吾、狹苞橐吾花中的非脂肪酸成分含量雖低，但種類(lèi)豐富，涵蓋了萜、烷烴、酮、酚、酸、酯等，這些化學(xué)成分有的是藥用植物的主要有效成分，具有抗菌、抗病毒、抗腫瘤、抗氧化等生物活性。以往對(duì)橐吾屬植物的研究和利用大多以根及根莖為材料，但長(zhǎng)期采挖對(duì)野生資源會(huì)造成破壞。綜上所述，復(fù)序橐吾、狹苞橐吾的花也具有開(kāi)發(fā)價(jià)值，其化學(xué)成分可能在食品、飼料、醫(yī)藥及精細(xì)化學(xué)品等領(lǐng)域中有著廣泛的應(yīng)用，有待進(jìn)一步研究。

［1］ 張達(dá)治，余國(guó)奠，張勉，等.橐吾屬植物藥用研究概況［J］.中國(guó)野生植物資源，2003，22(2):4 －7.

［2］ 中國(guó)科學(xué)院中國(guó)植物志編輯委員會(huì). 中國(guó)植物志:第77 卷［M］.北京:科學(xué)出版社，1999:86，104.

［3］ 傅沛云.東北植物檢索表［M］.2 版.北京:科學(xué)出版社，1995:685.

［4］ 張繼有，嚴(yán)仲鎧. 長(zhǎng)白山植物藥志［M］. 長(zhǎng)春:吉林人民出版社，1982:1217 －1218.

［5］ 董然，王麗清，劉洪章.長(zhǎng)白山復(fù)序橐吾和全緣橐吾葉片揮發(fā)油成分分析［J］.東北林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2010，38(1):105 －107.

［6］ 張勉，王崢濤，趙顯國(guó)，等.狹苞橐吾化學(xué)成分的研究［J］.中草藥，1999，30(2):93 －94.

［7］ 袁永亮，葉丹丹，梁會(huì)娟，等.河南狹苞橐吾化學(xué)成分研究［J］.中草藥，2012，43(7):1270 －1272.

［8］ Chen Hongming，Zhang Keqin，Cai Mengshen，et al. Terpenes from Ligularia intermedia［J］. Indian Journal of Chemistry Section B，Organic Including Medicinal，1998，37(7):669 －671.

［9］ Zhang Mian，Wang Zhengtao，Qin Hailin，et al. Two new dibenzofurans from the underground parts of Ligularia intermedia［J］. Chinese Chemical Letters，2002，13(7):620 －622.

［10］ Chen Hongming，Cai Mengshen，Jia Zhongjian［J］. Sesquiterpenes from Ligularia intermedia Phytochemistry，1997，45(7):1441－1444.

［11］ Ma Bin，Gao Kun，ShiYanping，et al. Phenol derivatives from Ligularia intermedia［J］. Phytochemistry，1997，46(5):915 －919.

［12］ 薄海波，秦榕. 沙棘果油與沙棘籽油脂肪酸成分對(duì)比研究［J］.食品科學(xué)，2008，29(5):378 －381.

［13］ 王麗芳，盧德勛，馬燕芬.共軛亞油酸的來(lái)源及其生物學(xué)作用［J］.畜牧與飼料科學(xué)，2011，32(9/10):13 －15.

［14］ 陳健初，徐斐燕，夏其樂(lè).楊梅核仁油的理化指標(biāo)和脂肪酸成分分析［J］.林產(chǎn)化工通訊，2005，39(1):21 －23.

［15］ 張秀麗，趙巖，沈宏圖，等.人參與西洋參脂溶性成分的GC －MS 分析［J］.特產(chǎn)研究，2011(4):49 －53.

［16］ 涂永勤，朱華李，楊榮平，等. 東俄洛橐吾揮發(fā)油化學(xué)成分的GC－MS 分析［J］.重慶中草藥研究，2008(1):7 －10.

［17］ 涂永勤，楊榮平，朱華李，等. 黑苞橐吾揮發(fā)油化學(xué)成分的研究［J］.重慶中草藥研究，2007(2):10 －15.

［18］ 魏小寧，蔣生祥，劉霞，等. 千花橐吾揮發(fā)油化學(xué)成分研究［J］.中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志，2002(4):8 －10.

［19］ 董然，南敏倫，劉洪章.長(zhǎng)白山特有種單頭橐吾的揮發(fā)油成分研究［J］.安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2009，37(36):17900 －17901.