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    全自動生化分析儀試劑針攜帶污染對脂肪酶測定的影響

    2013-03-03 08:54:02周麗敏陳毅聰
    關(guān)鍵詞:脂肪酶全自動脂蛋白

    周麗敏,陳毅聰

    (增城市中醫(yī)醫(yī)院檢驗(yàn)科,廣東增城511300)

    全自動生化分析儀試劑針攜帶污染對脂肪酶測定的影響

    周麗敏,陳毅聰

    (增城市中醫(yī)醫(yī)院檢驗(yàn)科,廣東增城511300)

    全自動生化分析儀;脂肪酶;試劑針;交叉污染;清洗

    目前,全自動生化分析儀已廣泛應(yīng)用于臨床各大、中、小型實(shí)驗(yàn)室,全自動生化分析儀具有快速、高效、準(zhǔn)確、重復(fù)性好及多項(xiàng)目,多樣品處理能力等優(yōu)點(diǎn)。但由于生化分析儀在分析過程中必須共用吸樣針、試劑針、攪拌棒以及比色杯,使得交叉污染問題也隨之產(chǎn)生。交叉污染分為吸樣針、攪拌棒、樣品杯及試劑間(試劑針)的交叉污染,其中試劑間的交叉污染常不易發(fā)現(xiàn),具有偶然性,對檢測結(jié)果影響最為嚴(yán)重。本實(shí)驗(yàn)室在實(shí)際工作中發(fā)現(xiàn)脂肪酶這一生化項(xiàng)目存在不穩(wěn)定性,個(gè)別標(biāo)本會偏離,但復(fù)查后又正常,懷疑存在試劑針交叉污染問題,下面針對脂肪酶這一項(xiàng)目做一試劑間交叉污染試驗(yàn)[1]。

    1 材料與方法

    1.1 標(biāo)本取正常人新鮮混合血清100ml。

    1.2 材料LPS采用北京利得曼試劑,方法為酶顯色法,常規(guī)生化項(xiàng)目所用試劑為廈門英科新創(chuàng)試劑,校準(zhǔn)品為試劑配套校準(zhǔn)品;生化儀為日立7180全自動生化分析儀。

    1.3 方法實(shí)驗(yàn)前應(yīng)確保實(shí)驗(yàn)環(huán)境符合相關(guān)實(shí)驗(yàn)操作條件,并嚴(yán)格按照儀器生產(chǎn)廠家的操作規(guī)程作儀器校準(zhǔn)、維護(hù)及操作,以確保儀器始終處于正常狀態(tài)及檢測的準(zhǔn)確性。試劑確保在有效期內(nèi)并用配套校準(zhǔn)品進(jìn)行校準(zhǔn)。

    1.3.1 取適量混合血清,在日立7180生化分析儀上用新鮮混合血清連續(xù)測定脂肪酶(LPS)10次結(jié)果,結(jié)果在50~52U/L,測量結(jié)果的均值為51.1U/L,變異系數(shù)為1.1%,重復(fù)性試驗(yàn)?zāi)軌驖M足臨床需要。

    1.3.2 取適量新鮮混合血清,在日立7180生化分析儀上,先測定一個(gè)常規(guī)生化項(xiàng)目(污染項(xiàng)目),再測定LPS(受污染項(xiàng)目),本實(shí)驗(yàn)室34個(gè)常規(guī)生化項(xiàng)目與LPS逐一配對測試。

    1.4 結(jié)果判斷當(dāng)脂肪酶測定結(jié)果小于平均值95%或大于平均值105%,則強(qiáng)烈支持上一測試項(xiàng)目對LPS存在交叉污染[2]。

    2 結(jié)果

    2.1 初步判斷對LPS存在試劑針污染的項(xiàng)目分別為尿酸、總膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇五個(gè)項(xiàng)目,如表1。

    表1 測定一個(gè)常規(guī)生化項(xiàng)目后再測定LPS結(jié)果比較

    2.2 將疑似對LPS污染項(xiàng)目確定,根據(jù)表2,將尿酸、總膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇五個(gè)項(xiàng)目與LPS配對測定,如測定尿酸后,再連續(xù)測定LPS3次,結(jié)果如表2,對LPS引起污染的項(xiàng)目為總膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇,而尿酸項(xiàng)目則可能是其他一些隨機(jī)誤差引起表2的不準(zhǔn)確度。

    2.3 清洗效果

    2.3.1 確定污染項(xiàng)目后,在生化儀上進(jìn)行特殊清洗功能設(shè)置,首先用水清洗,測定次數(shù)3次,效果如表3,血脂項(xiàng)目對LPS存在的污染用水清洗沒法消除。

    2.3.2 在生化儀特殊清洗系統(tǒng)中設(shè)置用堿性清洗液清洗后,測定3次結(jié)果如表4,血脂項(xiàng)目總膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇對LPS存在的污染用堿性清洗液清洗基本可以消除。

    表2 測定疑似污染項(xiàng)目后再測定LPS三次結(jié)果比較

    表3 用水清洗后結(jié)果比較

    表4 堿性清洗液清洗后結(jié)果比較

    3 討論

    血清脂肪酶測定是臨床生化檢驗(yàn)中最常見的項(xiàng)目之一,可用于急、慢性胰腺炎、總膽管結(jié)石等多種疾病的輔助診斷,但在日常生化檢驗(yàn)工作中,發(fā)現(xiàn)LPS項(xiàng)目的檢測存在不穩(wěn)定性,一些標(biāo)本會出現(xiàn)異常增高,與病人的臨床癥狀不符,將標(biāo)本復(fù)查后又變成正常范圍,檢查儀器、試劑、校準(zhǔn)品、室內(nèi)質(zhì)控品等并未發(fā)現(xiàn)異常,懷疑存在試劑間的交叉污染[3]。通過上面實(shí)驗(yàn)證明血脂項(xiàng)目總膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇這四個(gè)項(xiàng)目(簡稱血脂四項(xiàng))對LPS存在試劑間的交叉污染。查看血脂四項(xiàng)的試劑成份,均含有脂蛋白脂肪酶成分,其中甘油三酯試劑中所含脂蛋白脂肪酶成分最高,因此污染LPS最為嚴(yán)正重。在針對血脂項(xiàng)目對LPS存在試劑間的交叉污染而設(shè)置的特殊清洗實(shí)驗(yàn)中,發(fā)現(xiàn)用堿性清洗液清洗,可消除上述的交叉污染問題。另外據(jù)報(bào)導(dǎo),脂肪酶項(xiàng)目的試劑配方中含有鈣離子作為激活劑,因此含有鈣離子絡(luò)合劑的試劑對它會發(fā)生負(fù)干擾,本實(shí)驗(yàn)室生化試劑中含鈣離子絡(luò)合劑的試劑并不多,這種負(fù)干擾的發(fā)生幾率較少,因此并未進(jìn)行這一實(shí)驗(yàn)。

    在全自動生化分析儀應(yīng)用過程中,由于生化試劑的組分和含量問題,各項(xiàng)目間常常會出現(xiàn)明顯的正干擾或負(fù)干擾,這些造成干擾的原因主要來自于試劑的交叉污染,試劑間的交叉污染通常來自于生化儀的試劑針及攪拌棒的攜帶污染,丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)項(xiàng)目試劑中含有乳酸脫氫酶,對乳酸脫氫酶項(xiàng)目存在正干擾,乳酸脫氫酶、肌酸激酶項(xiàng)目試劑中含有鎂,對鎂項(xiàng)目測定存在干擾等等,要求檢驗(yàn)人員對儀器工作流程、試劑組成、測定原理了如指掌,對試劑交叉污染的各種可能性加以考慮,合理設(shè)計(jì)程序。合理安排檢測項(xiàng)目的順序,在有交叉污染的檢測項(xiàng)目中間插入特殊清洗系統(tǒng),最好是將被干擾項(xiàng)目置于干擾項(xiàng)目之前,或者干擾項(xiàng)目與被干擾項(xiàng)目間隔5個(gè)以上無干擾項(xiàng)目,以消除干擾發(fā)生的可能[4]。

    [1]楊兆武,明德松.邁瑞全自動生化分析儀血糖試劑交叉污染及排除[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2012,30(1):98-99.

    [2]于嘉屏.全自動生化分析儀及其試劑間化學(xué)污染對檢測結(jié)果的影響.中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志[J].2007,30(11):1301-1302.

    [3]葉應(yīng)嫵,王毓三,申子瑜.全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M].第3版.南京:東南大學(xué)出版社,2006:431-434.

    [4]汪仙德,程金蓮.EDTA-K2對血糖、血脂和腎功能檢測的影響[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2013,31(1):82-83.

    R446.11+2

    B

    1674-1129(2013)03-0288-03

    10.3969/j.issn.1674-1129.2013.03.039

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