生物發(fā)酵飼料在生長育肥豬上的應(yīng)用

■肖 軻 毛雨竹 趙旭民 李繼光 湯江武

（1株洲智薈生物科技有限公司，湖南株洲 412516；2.浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)與微生物研究所，浙江杭州 310021；3.義烏市華太飼料有限公司，浙江義烏 322005）

近年來，隨著飼料原料價(jià)格不斷上漲，畜禽養(yǎng)殖成本大幅提高，嚴(yán)重影響了我國飼料工業(yè)和畜牧業(yè)的健康穩(wěn)定發(fā)展。因此，如何提高飼料利用率，改善飼料品質(zhì)是當(dāng)前飼料工業(yè)的研究重點(diǎn)之一。其中，發(fā)酵飼料的生產(chǎn)與應(yīng)用是近年來飼料工業(yè)和養(yǎng)殖業(yè)的研究熱點(diǎn)。目前報(bào)道較多的為液態(tài)發(fā)酵飼料。其中林標(biāo)聲等研究發(fā)現(xiàn)，應(yīng)用高活菌發(fā)酵飼料能夠有效促進(jìn)生長肥育豬的免疫功能和抗氧化性能。沈紹新等應(yīng)用高活菌發(fā)酵飼料飼喂生長肥育豬后發(fā)現(xiàn)，發(fā)酵飼料具有促進(jìn)豬生長、減少腹瀉以及改善其腸道功能的效果。李敏等研究證明，發(fā)酵飼料具有提高豬生長性能的趨勢，但對(duì)豬胴體品質(zhì)沒有不良影響。但對(duì)通過采用固態(tài)發(fā)酵手段獲得的發(fā)酵飼料的動(dòng)物養(yǎng)殖評(píng)價(jià)較少，因此本研究嘗試采用固態(tài)發(fā)酵獲得的飼料對(duì)生長豬進(jìn)行飼喂，以期為發(fā)酵飼料對(duì)豬的生長作用提供科學(xué)依據(jù)。

1 試驗(yàn)材料與方法

1.1 菌種

乳酸菌EM：4.1×109cfu/ml；芽孢桿菌Bym1：1.34×1010cfu/g；釀酒酵母：5.75×109cfu/g，由浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)與微生物研究所提供。

1.2 發(fā)酵飼料制備

將玉米和豆粕按照2∶1的比例粉碎并混合均勻，將芽孢桿菌500 g、酵母菌100 g、乳酸菌1 000 ml，加入到80 L溫度在40℃左右的溫水中攪拌均勻，并將100 kg混合后的玉米豆粕，與上述菌液混合攪拌均勻；將混合好的飼料填入到塑料桶中，表層用塑料薄膜密封，發(fā)酵48 h，即可作為發(fā)酵飼料添加應(yīng)用。

1.3 試驗(yàn)動(dòng)物與日糧

將180頭體重在25 kg左右生長育肥豬的杜×長×大三元雜交豬按體重大小隨機(jī)分為12欄，每欄15頭豬。分為3個(gè)處理組，每個(gè)處理包括4個(gè)重復(fù)，每欄為一個(gè)重復(fù)，分別為對(duì)照組、低添加量組、高添加量組。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧為玉米64%、豆粕24%、麩皮6%、大豆磷脂2%、預(yù)混料4%(預(yù)混料為科皇集團(tuán)生產(chǎn)的科皇精品4312，見表1)由科皇牧業(yè)提供，低添加量組飼喂采用7.5%發(fā)酵飼料替代基礎(chǔ)日糧、高添加量組采用15%發(fā)酵飼料替代基礎(chǔ)日糧。各處理組營養(yǎng)成分見表2。試驗(yàn)持續(xù)40 d。

表1 預(yù)混料成分分析（每千克產(chǎn)品含）

表2 飼料樣品檢測結(jié)果

所有試驗(yàn)豬均飼養(yǎng)于同一棟豬舍內(nèi)。各組之間相互隔開，并保證向陽面與背陽面每組欄數(shù)相等。每天早上8：00和下午4：00各飼喂一次。預(yù)實(shí)驗(yàn)為3 d，試驗(yàn)天數(shù)為40 d，按照常規(guī)的管理進(jìn)行消毒、衛(wèi)生、免疫等工作，鴨嘴式飲水器自由飲水，每日清掃豬糞1次，每天觀察和記錄各欄豬的飼喂量、腹瀉、發(fā)病及用藥情況。

在試驗(yàn)開始前和試驗(yàn)結(jié)束后早上逐欄進(jìn)行空腹稱重并計(jì)算初重、末重、平均日增重、平均日采食量、料肉比、腹瀉率和發(fā)病率。

1.4 血液采集及分析

試驗(yàn)結(jié)束后，每欄選擇兩頭，使用一次性注射器進(jìn)行前腔靜脈采血，用真空促凝管采血管獲取血清后，立即置于冰盒中，5 000 r/min離心，取上清于新的1.5 ml離心管中，-20℃冷凍保藏，用于測定血清生理生化指標(biāo)、抗氧化指標(biāo)等。血清生理生化指標(biāo)及免疫指標(biāo)委托杭州市第二人民醫(yī)院進(jìn)行檢測。血清抗氧化指標(biāo)使用南京建成試劑盒進(jìn)行檢測。

1.5 飼料樣品采集

取發(fā)酵后濕料樣品和在試驗(yàn)過程中飼喂的試驗(yàn)組和對(duì)照組飼料，放置于無菌封口袋中，置于-20℃保存，用于測定飼料中的水分、pH值、菌數(shù)、粗蛋白、鉻含量等指標(biāo)。

1.6 數(shù)據(jù)處理

利用SPSS軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和方差分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 生長性能（見表3）

由表3可知，各組豬初始體重、平均日采食量無顯著差異。用7.5%的添加量發(fā)酵飼料飼喂生長育肥豬，可顯著提高豬的結(jié)束重和平均日增重，降低料肉比（P＜0.05）。高添加量組各項(xiàng)生長指標(biāo)與對(duì)照組相比無顯著差異。飼喂發(fā)酵飼料組豬與對(duì)照組相比，腹瀉情況明顯減少，其中低添加量組腹瀉頭數(shù)降低了52.7%，高添加量組減少36.4%，但對(duì)于豬的發(fā)病率影響作用不大。

表3 發(fā)酵飼料對(duì)生長育肥豬生長性能的影響

2.2 血清生化指標(biāo)（見表4）

血液指標(biāo)可以反映出動(dòng)物體的健康狀況和營養(yǎng)代謝狀況。由表4可知，試驗(yàn)組各組豬的血清IgG和IgM均高于對(duì)照組，但差異不顯著(P＞0.05)，低劑量組白蛋白/球蛋白、白蛋白、血清尿素氮均顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)，高添加量組總蛋白含量顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)，堿性磷酸酶顯著低于對(duì)照組(P＜0.05)，血糖含量顯著低于對(duì)照組。其他各項(xiàng)指標(biāo)差異不顯著(P＞0.05)。

3 討論

表4 發(fā)酵飼料對(duì)生長育肥豬血清免疫及生化指標(biāo)的影響

從試驗(yàn)結(jié)果可以看出，無論是生長性能，日采食量，腹瀉情況，低添加量組都要比高添加量組好，并不是添加量越高越好，因此選擇合適的發(fā)酵飼料添加量也非常重要。微生物發(fā)酵飼料是利用微生物的新陳代謝和繁殖菌體來生產(chǎn)和調(diào)制的飼料，它主要是利用微生物的發(fā)酵作用改變飼料的理化性狀，增加適口性及營養(yǎng)價(jià)值，提高消化利用率。目前關(guān)于發(fā)酵飼料添加量方面的研究較少，對(duì)這方面的機(jī)理研究比較缺乏。王振華等利用枯草芽孢桿菌制劑飼喂奶牛時(shí)發(fā)現(xiàn)，在5×109cfu/(d·頭)添加量對(duì)產(chǎn)奶量提高量要比1×109cfu/(d·頭)，10×1010cfu/(d·頭)要好。張仁義以地衣芽孢桿菌以不同比例添加量飼喂肉雞發(fā)現(xiàn)低劑量組效果明顯高于中、高劑量組。周輝霞利用枯草芽孢桿菌飼喂建鯉，結(jié)果發(fā)現(xiàn)0.2%添加量的飼喂效果要優(yōu)于2%添加量。有分析指出這可能是過多的外源微生物破壞了消化道固有的微生態(tài)平衡，消耗營養(yǎng)所致。也可能是微生物分泌過多的酶抑制了機(jī)體內(nèi)源酶的活性，降低了內(nèi)源酶對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)的分解。關(guān)于這一方面的機(jī)理目前尚無定論，還有待進(jìn)一步研究。

從血清免疫及生化指標(biāo)方面，飼喂發(fā)酵飼料組的生長豬血清中的IgG、IgM的含量高于對(duì)照組，表明發(fā)酵飼料在一定程度上可以增強(qiáng)豬的免疫能力。試驗(yàn)組白蛋白、球蛋白和總蛋白的含量均高于對(duì)照組?？偟鞍资茄逯邪椎鞍着c球蛋白的總和，血清總蛋白的含量在一定程度上可以反映日糧的蛋白質(zhì)營養(yǎng)水平以及動(dòng)物對(duì)蛋白質(zhì)的消化率。血清白蛋白可以作為載體運(yùn)輸營養(yǎng)物質(zhì)，作為媒介參與體內(nèi)廢物運(yùn)輸，維持血漿滲透壓，修補(bǔ)組織和提高能量，同時(shí)又是機(jī)體蛋白質(zhì)的一個(gè)來源。血清球蛋白由漿細(xì)胞分泌，可以反映機(jī)體的抵抗力水平。低添加量組白蛋白/球蛋白、白蛋白、顯著高于對(duì)照組（P＜0.05），高添加量組總蛋白顯著高于對(duì)照組，表明豬的蛋白合成能力增強(qiáng)，發(fā)酵飼料可以有效緩解體蛋白的分解，提高蛋白的沉積，促進(jìn)豬的生長。

血清中的尿素氮通過鳥氨酸循環(huán)合成，是蛋白質(zhì)、氮基酸代謝的終產(chǎn)物，尿素氮濃度可以比較準(zhǔn)確地反映動(dòng)物體內(nèi)蛋白質(zhì)代謝和氨基酸之間的平衡狀況。其濃度受飼料中蛋白質(zhì)、氨基酸含量與質(zhì)量的影響，其含量與體內(nèi)氮沉積率、蛋白質(zhì)或氨基酸利用率有顯著負(fù)相關(guān)。當(dāng)日糧中含氮物質(zhì)增高，體內(nèi)氨基酸代謝旺盛，或組織遭受破壞，核蛋白清除量增加，腎功能障礙，血中的尿素得不到正常排除時(shí)均會(huì)使血清尿素氮濃度增高。血清中尿素氮降低表明蛋白質(zhì)分解降低，而蛋白質(zhì)合成代謝增強(qiáng)，組織的蛋白質(zhì)沉積提高；相反，蛋白質(zhì)分解代謝增強(qiáng)時(shí)，尿素氮含量升高。低添加量組血清尿素氮顯著高于對(duì)照組，表明豬的分解代謝增強(qiáng)。

血清堿性磷酸酶活性的強(qiáng)弱和生長密切相關(guān)活性，堿性磷酸酶的升高反映成骨細(xì)胞活性增強(qiáng)，骨生成旺盛，鈣、磷在骨中的沉積增加。高劑量組血清堿性磷酸酶顯著低于對(duì)照組，血清磷含量比對(duì)照組低，但差異不顯著，表明15%添加量的發(fā)酵飼料會(huì)影響生長豬對(duì)磷的吸收。

血糖水平是動(dòng)物機(jī)體內(nèi)能量平衡的重要指標(biāo)，血糖在生理正常值范圍內(nèi)的降低意味著腸道對(duì)葡萄糖的消化吸收作用有所減弱，高添加量組血糖含量顯著低于對(duì)照組，表明15%添加量飼料會(huì)影響生長豬對(duì)葡萄糖的吸收。

血清中天門冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶和丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶的活性的改變可以反映肝臟的功能情況，當(dāng)肝組織受損或細(xì)胞通透性增大時(shí)，可以有大量的轉(zhuǎn)氨酶逸入血清，使血清中的轉(zhuǎn)氨酶活性升高。試驗(yàn)組與對(duì)照組相比，天門冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶和丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶的活性差異不顯著(P＞0.05)，由此可以判斷，發(fā)酵飼料對(duì)生長育肥豬肝臟功能沒有顯著影響。

甘油三酯和血清膽固醇的含量可以反映動(dòng)物體脂肪代謝的情況，試驗(yàn)組與對(duì)照組甘油三酯和血清膽固醇含量差異不顯著，表明發(fā)酵飼料對(duì)生長育肥豬脂肪代謝沒有顯著影響。

丙二醛(MDA)是自由基作用于脂質(zhì)發(fā)生過氧化反應(yīng)的氧化終產(chǎn)物，反映機(jī)體受氧化損害的程度。谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)和超氧化物歧化酶(SOD)是體內(nèi)的抗氧化酶，可以發(fā)揮清除體內(nèi)自由基和脂質(zhì)過氧化物的作用。谷胱甘肽在人體內(nèi)的生化防御體系起重要作用，具有多方面的生理功能。它的主要生理作用是能夠清除掉人體內(nèi)的自由基，作為體內(nèi)一種重要的抗氧化劑，保護(hù)許多蛋白質(zhì)和酶等分子中的巰基?？偪寡趸芰Γ═-AOC）是反映機(jī)體抗氧化系統(tǒng)功能的綜合指標(biāo)。雖然各組豬之間血清抗氧化指標(biāo)差異不顯著，低添加量組T-SOD、T-AOC、GSH均高于對(duì)照組，MDA略低于對(duì)照組，表明添加7.5%的發(fā)酵飼料可以在一定程度上增強(qiáng)豬抗氧化能力。

由飼料樣品檢測結(jié)果可以看出，添加發(fā)酵飼料可以降低飼料pH值，提高飼料含水率和粗蛋白含量，添加發(fā)酵飼料中芽孢桿菌和乳酸菌能夠達(dá)到107cfu/g以上，酵母菌能夠達(dá)到106cfu/g以上。

由此可以看出低添加量的發(fā)酵飼料可以提高生長育肥豬的生長性能，降低豬的腹瀉情況和料肉比，增強(qiáng)豬健康狀況和抗氧化能力，最終選擇7.5%添加量發(fā)酵飼料飼喂生長育肥豬，可以達(dá)到較好的飼養(yǎng)效果。

4 結(jié)論

①將發(fā)酵飼料飼喂25 kg左右杜長大三元雜交生長育肥豬，其中低添加量試驗(yàn)組與對(duì)照組相比，降低料肉比（P＜0.05），腹瀉頭數(shù)降低了52.7%，低劑量組白蛋白/球蛋白、白蛋白、血清尿素氮均顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）。

②將發(fā)酵飼料飼喂25 kg左右杜長大三元雜交生長育肥豬，高劑量組腹瀉頭數(shù)降低了36.4%，平均日增重，料肉比，發(fā)病率與對(duì)照組比差異不顯著，高添加量組總蛋白含量顯著高于對(duì)照組，堿性磷酸酶顯著低于對(duì)照組，血糖含量顯著低于對(duì)照組。