宮頸細胞DNA超早期篩查宮頸病變的臨床分析

康一青 歐陽新華 何丹 江萍 嚴朝霞

宮頸癌是婦科常見的三大惡性腫瘤之一，其中原位癌和浸潤癌好發(fā)于30～55歲的已婚女性。宮頸上皮內瘤變發(fā)展為宮頸癌大約十年歷程，早期發(fā)現(xiàn)并治療宮頸上皮內瘤變有重要意義。宮頸上皮內瘤變時已有細胞分化不良，有絲分裂增多，故檢測宮頸細胞DNA異倍體數(shù)量可發(fā)現(xiàn)早期宮頸癌前病變或宮頸癌。本實驗取得良好臨床篩查和確診效果，下面具體做一闡述。

1 資料與方法

1.1 一般資料 隨機選取上栗縣3551例已婚健康女性行宮頸細胞DNA異倍體測定，婦女平均年齡（38±8.7）歲，婚齡5年以上，均無宮頸接觸性出血和家族腫瘤史。

1.2 方法 在陰道窺器下宮頸刷刷取宮頸轉化區(qū)，取材后立即將宮頸刷浸泡在固定液中固定，高速離心，棄上清液，取細胞懸液制成3張涂片，予Feulgen染色，全自動細胞分析系統(tǒng)檢測分析DNA異倍體。

1.3 細胞DNA異倍體判定標準 1～2個>5 C非整倍體細胞為少量DNA異倍體異常；3～10個>5 C非整倍體細胞，為中量DNA異倍體異常；10個以上>5 C非整倍體細胞，為大量DNA異倍體異常；未檢出>5 C非整倍體細胞為陰性[1]。

1.4 組織病理學檢查 少量宮頸細胞DNA異倍體的婦女3個月隨訪并復查宮頸細胞DNA異倍體，大量宮頸細胞DNA異倍體的婦女行陰道鏡及宮頸組織活檢。病理結果分為：正?；蛄夹?，低度宮頸上皮內瘤變（CINⅠ）、高度宮頸上皮內瘤變（CINⅡ、CINⅢ）和宮頸癌[2]。

2 結果

2.1 宮頸細胞DNA檢測結果 宮頸細胞DNA正常的檢出率為84.2%，少量宮頸細胞DNA異倍體和大量宮頸細胞DNA異倍體檢出率分別為13.1%、2.7%。

2.2 宮頸細胞DNA異倍體與宮頸病變的關系 2991例（84.2%）未見DNA異倍體，465例（13.1%）可見少量DNA異倍體，95例（2.7%）可見大量宮頸細胞DNA異倍體，其中41例患者同意進行陰道鏡檢查并細胞學病理檢查，病理結果示：9例慢性宮頸炎良性病變，16例宮頸上皮內低度瘤變，12例宮頸上皮高度內瘤變，4例宮頸浸潤癌。宮頸細胞DNA異倍體檢測的敏感性15.8%，診斷宮頸病變的特異性占78.0%，其中宮頸癌前病變占68.3%，宮頸癌占9.6%。宮頸細胞DNA異倍體數(shù)量與宮頸病變級別成正比。

3 討論

宮頸癌是婦科常見的危害女性健康的腫瘤，研究發(fā)現(xiàn)宮頸癌的發(fā)展演變分低度宮頸上皮內瘤變、高度上皮內瘤變、宮頸原位癌和宮頸浸潤癌四個階段。宮頸癌的發(fā)生與早婚、性活躍、多伴侶、和高危型人乳頭瘤病毒持續(xù)感染有關。早期發(fā)現(xiàn)并治療宮頸癌前病變是研究的熱點問題。宮頸癌好發(fā)于經濟狀況低下，文化層次低的邊緣地區(qū)。本研究地區(qū)為偏遠山區(qū)，以全縣已婚女性為普查對象，篩查宮頸病變的發(fā)生率。

宮頸脫落細胞篩查從傳統(tǒng)的宮頸刮板到液基薄層細胞制片，取代了常規(guī)的細胞涂片[3]。常規(guī)細胞學檢查受取材、制片及病理細胞學醫(yī)師水平等因素影響，假陰性率高，敏感性低。DNA定量細胞分析系統(tǒng)根據每種細胞因成分不同而具有不同參數(shù)的特征，進行自動細胞分類和計數(shù)。以同一張玻片上的100個正常上皮細胞為標準對照細胞，測出細胞的平均光密度，從細胞角度發(fā)現(xiàn)異常細胞，可提高宮頸癌普查的陽性檢出率[4]。通過細胞DNA的定量分析，不僅從形態(tài)上獲得細胞的腫瘤生物學信息，為診斷腫瘤提供了細胞學依據，而且提供了腫瘤發(fā)展級別信息。研究表明DNA定量細胞分析篩查CIN3以上宮頸病變的敏感性和特異性分別為82%、71%，而常規(guī)細胞學方法的敏感性和特異性分別為52%、92%[5]。因此宮頸細胞DNA異倍體測定是成熟的實驗診斷方法，DNA圖像分析系統(tǒng)具有穩(wěn)定性和可靠性，可從微觀角度超早期發(fā)現(xiàn)異常腫瘤細胞。

人體處于動態(tài)平衡，維持機體的正常生理功能活動。腫瘤的發(fā)生與細胞逃脫凋亡調控系統(tǒng)，過分生長繁殖有關。鏡下表現(xiàn)為細胞分化不良，細胞核異常增大，有絲分裂增加，排列紊亂，無極性，異型細胞突破上皮細胞基底膜，表現(xiàn)為腫瘤浸潤性生長。正常體細胞DNA為二倍體，當細胞分裂增殖異常，細胞出現(xiàn)染色體數(shù)量異常，表現(xiàn)為三倍體。本研究中發(fā)現(xiàn)細胞DNA異倍體共560例，其中95例出現(xiàn)大量DNA異倍體，發(fā)現(xiàn)異型細胞DNA的特異性為78.0%。

本研究發(fā)現(xiàn)大量細胞DNA異倍體與病理組織分級成正相關。細胞DNA異倍體越多，宮頸組織病理級別越高，診斷的特異性越高[6]。本研究中41例行宮頸活組織檢查，高度宮頸上皮內瘤變以上級別確診率達39.2%。商宇紅等[7]研究發(fā)現(xiàn)宮頸上皮內瘤變級別與高危人乳頭瘤病毒量成正相關。人乳頭瘤病毒分高危型和低危型，高危型致宮頸癌的發(fā)生。常見的高危型人乳頭瘤病毒為16、18。30歲左右婦女機體有清除病毒感染的能力，如果持續(xù)高危人乳頭瘤病毒感染，則有發(fā)展為宮頸癌的可能。研究發(fā)現(xiàn)高危人乳頭瘤病毒持續(xù)感染可能導致宮頸細胞DNA異倍體的發(fā)生[8]，檢測高危人乳頭瘤病毒對診斷宮頸上皮內瘤變有較高的靈敏度[9]，因此同時檢測細胞核DNA異倍體和高危人乳頭瘤病毒，為30歲以上婦女宮頸癌的篩查、診斷和預后提供有力的診斷依據。宮頸液基細胞學檢查也是篩查宮頸病變的有力措施，診斷的敏感性和特異性高于常規(guī)細胞學篩查。行細胞DNA倍體檢測同時結合宮頸液基細胞學檢查、高危人乳頭瘤病毒的檢查，可減少漏診，提高細胞學檢查的確診率。

研究中發(fā)現(xiàn)宮頸病變不局限有接觸性出血的患者，在宮頸輕度糜爛或宮頸光滑的已婚女性，也發(fā)現(xiàn)宮頸上皮內瘤變。因此已婚女性常規(guī)行宮頸細胞DNA異倍體超早期篩查宮頸細胞，同時行人高危人乳頭瘤病毒檢測，可及時發(fā)現(xiàn)病變組織的異常生物學行為。結合陰道鏡下行宮頸活檢，早發(fā)現(xiàn)宮頸癌前疾病和宮頸癌，降低宮頸癌的發(fā)生率，減少醫(yī)療成本，適合在基層單位大力推[10]。

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