體內(nèi)藥物分析教學(xué)方法實(shí)踐與思考※

楊燕云 許 亮 張振秋 王 靜 何 凡 英錫相

（遼寧中醫(yī)藥大學(xué)，大連116600）

體內(nèi)藥物分析是藥物分析學(xué)的重要分支，是一門研究生物機(jī)體中藥物及其代謝物和內(nèi)源性物質(zhì)的質(zhì)與量變化規(guī)律的分析方法學(xué)［1］。我校近年來為藥物分析專業(yè)開設(shè)了此課程，目的是提高學(xué)生進(jìn)行藥物分析的能力，能夠適應(yīng)藥物分析的實(shí)際工作。但理論課學(xué)時(shí)數(shù)較少，實(shí)驗(yàn)課時(shí)數(shù)由于儀器設(shè)備限制更少。我們?yōu)榱烁玫耐瓿山虒W(xué)目標(biāo)，對體內(nèi)藥物分析課程的教學(xué)方法進(jìn)行了探索和實(shí)踐。

1 注重自身知識修養(yǎng)

師者，所以傳道授業(yè)解惑也。教師的一言一行，極大的影響著學(xué)生。因此在上好課程之前，應(yīng)加強(qiáng)自己的修養(yǎng)，博覽群書，增加知識面，所有這些方面的積累將可促進(jìn)理論教學(xué)，增強(qiáng)學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣。作為教師，上課是一門藝術(shù)，如何讓學(xué)生在上課時(shí)感到輕松，增加學(xué)生對這門課程的興趣，這是一名老師要首先考慮的、也是上好本門課程的前提。

2 結(jié)合學(xué)科特點(diǎn) 注重實(shí)踐教學(xué)的系統(tǒng)性

體內(nèi)藥物分析是一門實(shí)驗(yàn)性很強(qiáng)的課程，實(shí)驗(yàn)課在此課程中起著舉足輕重的作用，它可以幫助學(xué)生鞏固書本上學(xué)到的知識，加深對理論知識的理解和掌握。同時(shí)培養(yǎng)學(xué)生實(shí)際操作能力及分析問題、解決問題的能力，從而提高學(xué)生在本學(xué)科領(lǐng)域的水平；相反，如果我們對實(shí)驗(yàn)教學(xué)重視不足，學(xué)生將很難適應(yīng)相關(guān)專業(yè)如臨床藥師、新藥開發(fā)等工作的要求。因此，在較少的實(shí)驗(yàn)課時(shí)的情況下，采用綜合性、設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)，讓學(xué)生在有限的學(xué)時(shí)數(shù)下，完成對本課程最大的理解和掌握；并培養(yǎng)學(xué)生實(shí)際操作能力及分析問題、解決問題的能力，從而提高學(xué)生的實(shí)踐水平。

3 以學(xué)生為主體，實(shí)驗(yàn)為主導(dǎo)，改革理論授課教學(xué)

以實(shí)驗(yàn)為主導(dǎo)的體內(nèi)藥物分析理論教學(xué)模式，可以將實(shí)驗(yàn)課和理論課有機(jī)結(jié)合起來，實(shí)驗(yàn)課方面設(shè)計(jì)綜合實(shí)驗(yàn)，理論課圍繞綜合實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)進(jìn)行講解，“以問題為中心的教學(xué) （Problem－Based Learning，PBL）”強(qiáng)調(diào)教師引導(dǎo)、學(xué)生主動學(xué)習(xí)的啟發(fā)式教育，可以顯著提高學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣，鞏固學(xué)習(xí)效果［2］。該教學(xué)方式對培養(yǎng)學(xué)生掌握和實(shí)際應(yīng)用知識的綜合能力成效顯著，已得到高等醫(yī)學(xué)教育的普遍重視。但是本教學(xué)模式并非單純PBL教學(xué)模式，由于是以實(shí)驗(yàn)為主導(dǎo)，因此我們不僅要提出問題，更要在實(shí)踐中解決問題。把實(shí)踐的目的拿到理論課來學(xué)習(xí)、討論和設(shè)計(jì)方案，然后再將理論中的基礎(chǔ)理論拿到實(shí)驗(yàn)課去驗(yàn)證，遇到具體問題再回到理論課解決，提高了課堂和實(shí)驗(yàn)課的效率。

4 以提高實(shí)驗(yàn)技能為目標(biāo) 展開理論教學(xué)

體內(nèi)藥物分析過程包括給藥、取樣、樣品制備和樣品分析，其中樣品制備是體內(nèi)藥物分析極其重要的一環(huán)，也往往是最困難、最復(fù)雜的一部分，舉例說明生物樣品與樣品制備過程。處理某一樣品時(shí)采用哪種預(yù)處理方法，應(yīng)該從藥物測定的目的、藥物的理化性質(zhì)和存在形式、樣品中待測物的濃度、選用的生物樣品類型、樣品預(yù)處理與分析技術(shù)的關(guān)系等方面進(jìn)行綜合考慮，舉例討論。結(jié)合自身的科研經(jīng)驗(yàn)，介紹不同性質(zhì)藥物如水溶性如阿莫西林，二甲雙胍和脂溶性如異甘草素、水楊酸等樣品處理。如測定血漿中阿莫西林的濃度，阿莫西林為β－內(nèi)酰胺類抗生素，對酸穩(wěn)定，且酸有利于阿莫西林的提取，于是選擇高氯酸乙腈溶液沉淀蛋白作為樣品的處理方法。結(jié)合實(shí)例不但說明了樣品前處理方法選擇的重要性，也給出了選擇血樣處理方法基本思路。

無論是測定藥代動力學(xué)參數(shù)，還是臨床藥物的監(jiān)測等工作，都需要體內(nèi)藥物分析提供準(zhǔn)確、可靠的體內(nèi)藥物濃度數(shù)據(jù)。因此，建立可靠的生物樣品中微量藥物及其代謝物的分析方法是體內(nèi)藥物分析的首要任務(wù)。我們在教學(xué)過程中，從分析方法的設(shè)計(jì)依據(jù)、分析方法建立的一般步驟和分析方法驗(yàn)證的內(nèi)容與要求三個(gè)方面進(jìn)行了詳細(xì)闡述，并通過實(shí)驗(yàn)論文和實(shí)驗(yàn)課學(xué)習(xí)，加深學(xué)生對上述三個(gè)方面內(nèi)容的理解。在教學(xué)過程中，教師應(yīng)向同學(xué)們舉例說明，標(biāo)準(zhǔn)曲線應(yīng)該采用加權(quán)最小二乘法回歸方法計(jì)算和最小二乘法直接計(jì)算的區(qū)別，加權(quán)最小二乘法回歸方法計(jì)算確保藥物濃度較低的樣品測定的準(zhǔn)確性［3］。另外對體內(nèi)藥物分析方法的評價(jià)指標(biāo)給出量化范圍，如 “一般要求準(zhǔn)確度RE在±15%的范圍內(nèi)，在LOQ附近應(yīng)在±20%的范圍內(nèi)”。

5 注重介紹體內(nèi)藥物分析的前沿技術(shù)

各種分析技術(shù)是體內(nèi)藥物分析工作者賴以開展工作的技術(shù)平臺，它們能被用于靈敏、專屬、高效地解決藥物體內(nèi)諸過程中的復(fù)雜問題，是構(gòu)成體內(nèi)藥物分析學(xué)科的支柱。隨著色譜技術(shù)的進(jìn)步，使得各種色譜法，尤其是高效液相色譜法成為主流技術(shù)和常規(guī)裝備被廣泛應(yīng)用，而單純的光譜法及微生物法由于無分離能力，專屬性差，將不斷的被色譜法及色譜－光譜聯(lián)用技術(shù)所取代。由于常規(guī)的GC、HPLC和TLC技術(shù)在其他學(xué)科教學(xué)中已重點(diǎn)介紹，因此講課重點(diǎn)放在近年體內(nèi)藥物分析領(lǐng)域中最活躍的前沿技術(shù)：主要是聯(lián)用技術(shù)，LC－MS、LC－MSMS）、色譜－核磁共振聯(lián)用技術(shù) （HPLC－NMR），同時(shí)，還可以向?qū)W生介紹手性高效液相色譜技術(shù)、柱切換高效液相色譜技術(shù)、高效毛細(xì)管電泳技術(shù) （HPCE）、毛細(xì)管電泳免疫分析技術(shù) （CEIA）等，盡量拓展學(xué)生的知識面，讓學(xué)生對本學(xué)科最前言的技術(shù)有一個(gè)初步的了解，提高學(xué)生的學(xué)習(xí)積極性。

［1］李好枝.體內(nèi)藥物分析［M］.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2003：2.

［2］余勤，梁茂植，秦永平，等.體內(nèi)藥物分析教學(xué)中PLB課程的實(shí)踐與思考［J］.現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué)，2009，36（2）：269－270.

［3］鐘大放.以加權(quán)最小二乘法建立生物分析標(biāo)準(zhǔn)曲線的若干問題［J］.藥物分析雜志，1996，16（5）：343－346.