張福華
(河南省漯河醫(yī)學(xué)高等??茖W(xué)校,漯河462002)
四逆散治療大鼠肝郁癥實(shí)驗(yàn)研究
張福華
(河南省漯河醫(yī)學(xué)高等專科學(xué)校,漯河462002)
目的對(duì)采用四逆散治療大鼠肝郁癥的效果進(jìn)行試驗(yàn)和分析。方法選擇一批大鼠,隨機(jī)分成三組:對(duì)照組為空白組;肝郁模型組;治療組采用四逆散進(jìn)行治療。使用模具進(jìn)行加水浴來(lái)制作肝氣郁結(jié)候動(dòng)物模型。對(duì)這幾組的大鼠的表現(xiàn)情況以及胃腸超威結(jié)構(gòu)的變化等進(jìn)行仔細(xì)觀察,最后對(duì)大鼠的智力和胃腸激素進(jìn)行測(cè)試。結(jié)果試驗(yàn)組中:大鼠的體重和活動(dòng)情況得到了增加,大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力得到提高,大鼠的病理得到了有效改善,大鼠血清中的胃泌素以及血漿中的胃動(dòng)素等含量都得到了提高。同時(shí),降低了血漿中的生長(zhǎng)抑素含量。結(jié)論對(duì)大鼠采用四逆散進(jìn)行治療,可以有效的保護(hù)大鼠的胃腸黏膜。同時(shí)也使得大鼠的脾胃得到了回復(fù),調(diào)節(jié)了大鼠的胃腸激素。
大鼠肝郁證;四逆散;實(shí)驗(yàn)
1.1 材料
1.1.1 動(dòng)物選擇SD大鼠,雌雄數(shù)量相等;大鼠的體重在165~205g之間。
1.1.2 藥物采用四逆散對(duì)實(shí)驗(yàn)大鼠進(jìn)行治療,配方為:白芍6g;柴胡6g;炙甘草6g;枳實(shí)6g。這些藥材由同仁堂提供。經(jīng)過(guò)專家的鑒定為正品之后進(jìn)行使用。
選擇枳實(shí);柴胡用水10倍浸泡3h;采用水蒸氣蒸餾法對(duì)其進(jìn)行揮發(fā)油的提取,時(shí)間為6h;收集的揮發(fā)油放入到棕色的瓶子內(nèi),將藥渣和液體進(jìn)行分離,保留好藥液。
使用水12倍對(duì)甘草;白芍浸泡1h,再進(jìn)行煎煮2h;總共需要進(jìn)行煎煮3次。將藥渣進(jìn)行分離,保留好藥液。
對(duì)以上幾種藥液進(jìn)行混合均勻到1g生藥/m L,并向里放入揮發(fā)油,制作成四逆散的提取液。將其放入到冰箱里儲(chǔ)存,溫度為4℃。在使用時(shí),使用蒸餾水對(duì)其進(jìn)行配置,濃度為0.24g生藥/mL濃度。
1.1.3 儀器XH-6010閃爍計(jì)數(shù)儀(西安二六二廠生產(chǎn));電子天平PA2003(上海天平儀器廠生產(chǎn));CB3201數(shù)字描記式小動(dòng)物活動(dòng)觀測(cè)儀(中國(guó)川北電子工業(yè)公司生產(chǎn))
1.1.4 試劑胃動(dòng)素(MTL)試劑盒由解放軍總醫(yī)院科技開發(fā)中心放免所提供,批號(hào):040226。血管活性腸肽試劑盒由美國(guó)DiaSorin公司提供,批號(hào):040113。生長(zhǎng)抑素試劑盒由海軍放免技術(shù)中心提供,批號(hào):040215。電鏡固定液:25%的戊二醛溶液360mL,NaH2PO4· 2H2O 8.9g;Na2HPO4·12H2O 87g;三者加水到3000mL。胃泌素(Gas)試劑盒由北京北方生物技術(shù)研究所提供,國(guó)藥準(zhǔn)字S10940100。
1.2 實(shí)驗(yàn)方法
1.2.1 建立模型和分組試驗(yàn)選擇80只SD大鼠進(jìn)行隨
機(jī)分組,分成:空白組;肝郁模型組;四逆散治療組;分別為20只;30只;30只。模型的制作將制作模型的大鼠放置到鐵桶中,讓其不能隨意的走動(dòng)。另外向鐵桶里灌水,讓大鼠的劍突以下浸入到水中。水深大概為15~18cm。對(duì)水的溫度控制在18~22℃。讓大鼠在水中站立4h;每天進(jìn)行一次,需要連續(xù)進(jìn)行10d。治療的模型制作與以上相同,從第11天開始停止模型的制作,對(duì)其進(jìn)行灌四逆散藥液,劑量為10ml/kg,需要連續(xù)進(jìn)行5d。在空白組中,在第11天停止造模后,灌胃四逆散藥液10mL/kg,連續(xù)5d??瞻讓?duì)照組:對(duì)大鼠進(jìn)行灌胃0.9% N.S10mL/kg。
在模型制作期間,需要對(duì)大鼠的基本情況;活動(dòng);體重;被毛;攝食量;大便的形狀;智力的情況進(jìn)行仔細(xì)的觀察[2]。在對(duì)大鼠進(jìn)行16d的乙醚麻醉下,對(duì)大鼠的空腸和胃幽門部位進(jìn)行截取,分別為2塊,將其中的一塊空腸和胃放入到10%的甲醛液里進(jìn)行固定。使用HE進(jìn)行染色,用石蠟進(jìn)行包裹,使用光學(xué)顯微鏡進(jìn)行觀察。另外一塊空腸和胃,使用電鏡固定液將另外一塊空腸和胃進(jìn)行固定,另一塊胃和空腸立即投入電鏡固定液內(nèi)固定,對(duì)其進(jìn)行包裹并進(jìn)行切片,使用投射電鏡進(jìn)行仔細(xì)觀察。
1.2.2 統(tǒng)計(jì)學(xué)的方法對(duì)所有的數(shù)據(jù)都采用SPSS11.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)和分析。組間的數(shù)據(jù)采用χ2進(jìn)行檢驗(yàn)。
空白組:大鼠的背毛非常白;攝食正常;背毛光澤;活潑;精神佳;大小便正常。模型組:大鼠在初期主要表現(xiàn)為:易激惹;煩躁不安;不斷嘶叫;抓咬模具。在3d以后,大鼠的活動(dòng)開始逐漸減少,精神變得頹廢,表情呆滯,食量少,容易困倦,喜歡扎堆,大鼠的反應(yīng)開始變得緩慢。背毛開始失去光澤變得枯黃,糞便干。
四逆散治療組:大鼠活動(dòng)增加;精神得到好轉(zhuǎn);食量變大;反應(yīng)變得靈敏。大鼠的體重和活動(dòng)情況都得到了增加,大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力得到了提高,大鼠的病理得到了有效的改善。大鼠血清中的胃泌素以及血漿中的胃動(dòng)素等含量都得到了提高。同時(shí),降低了血漿中的生長(zhǎng)抑素含量。
經(jīng)過(guò)此次的實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),肝郁能夠使得動(dòng)物的胃腸黏膜層和肌層發(fā)生顯著性的病變[3]。最終導(dǎo)致大鼠的消化和吸收能力出現(xiàn)下降。所以動(dòng)物就出現(xiàn)食欲減退,進(jìn)而變得消瘦,毛色不澤等現(xiàn)象。同時(shí)也表明:肝郁癥的實(shí)質(zhì)就是動(dòng)物的消化和吸收功能出現(xiàn)了障礙。采用四逆散對(duì)肝郁癥進(jìn)行治療,能有效的緩解大鼠的這些情況,使得大鼠的消化吸收能力得到了有效的提高[4]。
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10.3969/j.issn.1672-2779.2013.11.100
1672-2779(2013)-11-0152-02在中醫(yī)臨床上,肝氣郁結(jié)證是一種非常常見(jiàn)的癥候。本次通過(guò)制作肝氣郁結(jié)癥候動(dòng)物模型,采用四逆散來(lái)對(duì)大鼠進(jìn)行治療?,F(xiàn)在對(duì)試驗(yàn)的具體情況作以下報(bào)道。
??張文娟
2013-05-03)