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    朝醫(yī)方三神散對(duì)兔心房正性肌力作用的影響

    2013-01-31 08:40:00崔昊震
    中國(guó)民族醫(yī)藥雜志 2013年4期
    關(guān)鍵詞:分泌量正性灌流

    申 晨 李 超 李 雪 崔昊震

    (延邊大學(xué)中醫(yī)學(xué)院臨床基礎(chǔ)教研室,吉林 延吉 133002)

    朝醫(yī)方三神散對(duì)兔心房正性肌力作用的影響

    申 晨 李 超 李 雪 崔昊震*

    (延邊大學(xué)中醫(yī)學(xué)院臨床基礎(chǔ)教研室,吉林 延吉 133002)

    目的:研究朝醫(yī)方三神散對(duì)兔心房的正性肌力作用。方法:采用兔離體搏動(dòng)心房灌流模型來(lái)觀察不同劑量的三神散(0.1,0.3,1 g·L-1)對(duì)心房正性肌力的變化。結(jié)果:三神散可使心房每搏輸出量(stroke volume)、心房搏動(dòng)壓(pulse pressure)及灌流液中cAMP流出量比給藥前呈現(xiàn)濃度依賴性遞增趨勢(shì);阻斷-腎上腺素受體(adrenergic receptor,AR)或L-型Ca2+型通道(L-type Ca2+channel,LTCC)均可抑制三神散對(duì)心房正性肌力的增強(qiáng)作用。結(jié)論:三神散具有增強(qiáng)心肌正性肌力的作用,其作用主要可能與 -AR-cAMP-LTCC信號(hào)傳導(dǎo)途徑有關(guān)。

    三神散;心房正性肌力;-AR-cAMP-LTCC信號(hào)傳導(dǎo)途徑

    心臟是人體重要的泵血器官,通過(guò)心肌的收縮-舒張功能,將血液輸送至全身各臟器和組織當(dāng)中。Ca2+作為心肌細(xì)胞收縮—舒張功能的重要調(diào)控因子,主要經(jīng)過(guò)β-AR及LTCC通道的激活等途徑參與心臟的功能活動(dòng)。朝醫(yī)方三神散源自《東醫(yī)四象新編》,屬朝醫(yī)太陰人方劑,主要由遠(yuǎn)志、石菖蒲和龍骨3味藥物組成,具有醒肺調(diào)氣,重鎮(zhèn)安神之功效[1]。本方根據(jù)太陰人“血濁氣澀”及“肺虛過(guò)燥”等體質(zhì)特點(diǎn),可調(diào)節(jié)和改善因血液黏稠及血液動(dòng)力學(xué)改變引起的各種心腦血管疾病。目前,國(guó)內(nèi)外三神散對(duì)心臟正性肌力的實(shí)驗(yàn)研究尚未見報(bào)道。本研究通過(guò)家兔離體搏動(dòng)心房灌流模型,觀察三神散對(duì)心房正性肌力作用的影響,并探討其具體作用機(jī)制。

    1 實(shí)驗(yàn)材料

    1.1 動(dòng)物:新西蘭白兔,雄性,體重為 2.0±0.2 kg,由延邊大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供,合格證號(hào)SCXK(吉)2003-0005。

    1.2 藥品與試劑:三神散中的三味藥物(各 500 g)均購(gòu)自北京同仁堂藥店,等量稱重后,分2次煎煮,過(guò)濾后混勻,并用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀進(jìn)行濃縮。烘干后,最終獲得黃褐色粉末狀藥物78.9 g,其得率為5.26%。鹽酸普萘洛爾、硝苯地平均購(gòu)自美國(guó)Sigma公司。

    1.3 主要儀器:YPJ01型壓力換能器和RM6240C生物記錄儀購(gòu)自成都儀器廠;cAMP檢測(cè)試劑盒(K371-100)購(gòu)自BioVison公司。

    2 實(shí)驗(yàn)方法

    2.1 離體搏動(dòng)心房灌流裝置:參照Cho等[2]研制的心房灌流裝置制備離體搏動(dòng)心房模型。該裝置可懸掛剝離的心房組織,通過(guò)給予適宜的電刺激 (0.3 ms,30~40 V)維持心房搏動(dòng),并用氧(95%O2+5%CO2)飽和的HEPES緩沖液對(duì)心房進(jìn)行持續(xù)灌流。心房與壓力換能器相連,測(cè)定心房搏動(dòng)壓的變化;心房搏出量則由心房舒縮時(shí)透明套管水柱的變化,并經(jīng)過(guò)換算而測(cè)得;cAMP分泌變化量用放免試劑盒測(cè)定。

    2.2 實(shí)驗(yàn)步驟

    2.2.1 心房組織經(jīng)過(guò)3個(gè)正常組循環(huán)(12 min/循環(huán))后,給予高、中、低3種不同劑量的三神散提取物 (0.3,0.1,0.03g·L-1)2個(gè)循環(huán)。

    2.2.2 經(jīng)過(guò)1個(gè)正常組循環(huán)后,預(yù)處理β-AR阻斷劑普萘洛爾 (1μmol·L-1)2個(gè)循環(huán),并在持續(xù)阻斷 β-AR的情況下給予三神散提取物 (0.1g·L-1)2個(gè)循環(huán)。

    2.2.3 經(jīng)過(guò)1個(gè)對(duì)照組循環(huán)后,預(yù)處理 LTCC阻斷劑硝苯地平(1μmol·L-1)2個(gè)循環(huán),并在阻斷 LTCC的情況下再給予三神散提取物 (0.1g·L-1)2個(gè)循環(huán)。

    2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法:實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析,實(shí)驗(yàn)結(jié)果均以標(biāo)準(zhǔn)差(±s )表示,P<0.05時(shí)表示組間比較具有顯著性差異。

    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

    3.1三神散對(duì)心房正性肌力的影響:三神散提取物(0.3,0.1,0.03g·L-1)可濃度依賴性地增加心房正性肌力 (表 1)。

    表1 三神散的不同劑量組對(duì)兔心房正性肌力及cAMP分泌量的影響 (±s,n=6)

    表1 三神散的不同劑量組對(duì)兔心房正性肌力及cAMP分泌量的影響 (±s,n=6)

    注:*P<0.05,與正常灌流組相比較;△P<0.05,與低劑量組相比較;#P<0.05,與中劑量組相比較。

    藥物對(duì)照組三神散劑量 心房搏動(dòng)壓mmHg心房搏出量L·g-1-0.03 0.1 0.3 3.28±0.07 3.60±0.04*4.22±0.06△4.50±0.03#692.89±12.11 730.37±8.02*770.76 ±9.64△804.84±11.55#cAMP分泌量pmol·min-1·g-1 1.27±0.06 1.61±0.04*1.99±0.07△2.68±0.09#

    3.2 β-AR阻斷后三神散對(duì)心房正性肌力作用的影響:實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示(表 2),普萘洛爾(1μmol·L-1)可阻斷三神散提取物對(duì)于心房正性肌力的增強(qiáng)作用。

    表2 β—AR阻斷后三神散對(duì)正性肌力作用及cAMP分泌量的影響 ( ±s,n=6)

    表2 β—AR阻斷后三神散對(duì)正性肌力作用及cAMP分泌量的影響 ( ±s,n=6)

    注:△△P<0.01與對(duì)照組相比較。

    藥物對(duì)照組普萘洛爾普+三神散劑量 心房搏動(dòng)壓mmHg心房搏出量L·g-1-1 1+0.1 3.35±0.04 3.01±0.04△3.06±0.05 672.17±4.87 625.67±4.06△647.17±2.39 cAMP分泌量pmol·min-1·g-1 1.28±0.05 1.12±0.03 1.15±0.02

    3.3 LTCC阻斷后三神散對(duì)心房正性肌力作用的影響:實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示(表 3),硝苯地平(1μmol·L-1)可阻斷三神散對(duì)心房正性肌力的增強(qiáng)作用。

    表3 LTCC阻斷后三神散對(duì)正性肌力作用及cAMP分泌量的影響 ( x±s,n=6)

    4 討論

    心肌細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度的變化在心肌收縮—舒張過(guò)程中起決定性作用。其中β-AR介導(dǎo)的LTCC通路的激活是增加心肌細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度的最經(jīng)典途徑之一。β-AR可通過(guò)G蛋白激活腺苷酸環(huán)化酶活性,增加心肌細(xì)胞內(nèi)第二信使cAMP水平,進(jìn)而通過(guò)特異性蛋白激酶A的磷酸化作用,促使細(xì)胞膜上的LTCC開放,增加細(xì)胞外Ca2+內(nèi)流[3]。流入的 Ca2+通過(guò)“扳機(jī)樣”作用,激活肌漿網(wǎng)膜上的藍(lán)尼堿受體,釋放大量的Ca2+,最終實(shí)現(xiàn)心肌正性肌力的增強(qiáng)作用[4]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,朝醫(yī)方三神散可增強(qiáng)心房的正性肌力作用,同時(shí)增加心肌細(xì)胞的cAMP水平。此外,三神散的正性肌力作用可被β-AR阻斷劑普萘洛爾或LTCC阻斷劑硝苯地平所抑制。此研究表明,三神散對(duì)心臟的正性肌力作用可能與心肌細(xì)胞膜上β-AR介導(dǎo)的cAMP-LTCC信號(hào)途徑有關(guān)。

    三神散是朝醫(yī)太陰人方劑,具有醒肺調(diào)氣,重鎮(zhèn)安神之功效,可用于治療太陰人的癲狂、健忘、驚悸、怔忡及久心痛等疾病。朝醫(yī)四象體質(zhì)學(xué)認(rèn)為太陰人“肝大肺小”的臟局結(jié)構(gòu)可引起此類人群多具有“血濁氣澀,肺虛過(guò)燥”等體質(zhì)弱點(diǎn),易形成自身血液粘稠度增高及血液動(dòng)力學(xué)改變等病理變化,并引發(fā)動(dòng)脈粥樣硬化、冠心病及心衰等心血管疾病。三神散可通過(guò)加強(qiáng)心肌正性肌力,改善對(duì)心血管系統(tǒng)的調(diào)節(jié)作用,從而加強(qiáng)心主血脈、肺朝百脈等功能。此外,據(jù)現(xiàn)代藥理研究證明,石菖蒲揮發(fā)油具有抗心律失常[5]、抑制血小板聚集、增加冠脈血流量及降血脂等作用[6];遠(yuǎn)志皂苷通過(guò)抑制心肌組織一氧化氮形成,提高超氧化物歧化酶的活力,從而減少心肌梗死等作用[7]。

    綜上所述,朝醫(yī)三神散對(duì)離體家兔心房發(fā)揮正性肌力作用,其作用機(jī)制與β-AR-cAMP-LTCC信號(hào)通路密切相關(guān)。本方中各味藥物對(duì)心臟的具體作用機(jī)制及其相關(guān)藥效成分的效應(yīng)還有待于進(jìn)一步深入研究。

    [1]元持.東醫(yī)四象新編[M].延邊民族醫(yī)藥研究所,1955.

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    [4]Bers DM.Cardiac excitation–contraction coupling[J].Na ture.2002,415(6868):198-205.

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    [6]吳啟端,吳清和.石菖蒲的藥理研究進(jìn)展[J].中藥新藥與臨床藥理,2006:17(6):477-480.

    [7]郭健龍,沈志斌.遠(yuǎn)志皂苷對(duì)大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用[J].黑龍江醫(yī)藥,2005:18(4):263-264.

    The positive inotropic effect by'San Shen Powder'in beating rabbit atria

    CUI Hao-zhen
    (Department of clinic and basic medicine,Yanbian University,Yanji 133000,Jilin,China)

    Objective:To address positive inotropic effect of'San Shen Powder'(SSP)in beating rabbit atria.Methods:the SSP-induced changes in atrial dynamics,pulse pressure and stroke volume,and cAMP efflux were measured in perfused beating rabbit atria.Results:SSP increased atrial dynamics and cAMP efflux in a concentration-dependent manner(0.1,0.3,1 g·L-1).The SSP-induced positive inotropic effect was significantly attenuated by the blockade of-adrenergic receptor(AR)or an L-type Ca2+channels(LTCC).Conclusion:These results suggest that SSP-induced positive inotropic effect is,at least in part,related with activation of-AR-cAMP-LTCC signaling pathway in beating rabbit atria.

    San Shen Powder;atrial dynamics;-AR-cAMP-LTCC signaling pathway

    R291.9

    A

    1006-6810(2013)04-0043-03

    *通訊作者:崔昊震,講師,博士,中醫(yī)藥心血管藥理研究,Tel:18744339308,E-mail:cuihaozhen@ybu.edu.cn。

    2013年1月4日收稿

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