牛巴氏桿菌病的病理學(xué)觀察

比爾來西肯·賽都力，吾蘭·呼加汗

（伊犁職業(yè)技術(shù)學(xué)院，新疆 伊犁835000）

巴氏桿菌是動(dòng)物體內(nèi)的常見條件致病性細(xì)菌之一，正常的家畜、家禽及野生動(dòng)物體內(nèi)都可以分離到。當(dāng)外界因素劇烈變化或機(jī)體抵抗力下降時(shí)，?？墒箘?dòng)物致病，嚴(yán)重可致動(dòng)物死亡［1］。牛巴氏桿菌病又稱牛出血性敗血癥，是以高熱、肺炎、急性胃腸炎及內(nèi)臟廣泛性出血為主要特征的一種急性、熱性傳染病。2010年5月，伊犁某縣養(yǎng)殖飼養(yǎng)的奶牛有2頭突然發(fā)病。其臨床癥狀為病初體溫升高（41．6℃），精神沉郁，呆立，低頭拱背，口吐白沫，臥地不起，飲食欲明顯減退或廢絕，呼吸加快，個(gè)別牛有痛苦性干咳，流涎，肌肉震顫，鼻鏡干燥，兩眼流淚，腹痛，下痢，糞便初為粥狀，后期呈液狀，間有黏液、黏膜碎片及血液，有惡臭，有個(gè)別牛鼻孔內(nèi)和尿中混有血液。隨病情發(fā)展在頸部、咽喉部及胸部的皮下出現(xiàn)水腫，同時(shí)伴發(fā)舌及周圍組織的高度腫脹，舌伸出齒外，呈暗紅色，可視黏膜發(fā)紺。

當(dāng)病死奶牛病理剖檢可見黏膜、漿膜、舌、皮下組織肌肉中有出血點(diǎn)，脾臟不腫大，有小出血點(diǎn)，肝臟腫脹、質(zhì)脆，個(gè)別牛肝臟表面有壞死灶，腎稍腫，淋巴結(jié)顯著水腫，肺明顯水腫，有出血點(diǎn)，肺臟表面有肝變區(qū)，呈大理石樣花紋；胸膜粘連，胸腔內(nèi)有纖維素性滲出物，心冠脂肪、心內(nèi)外膜出血明顯，心包積水，頸部、咽喉部、四肢皮下有漿液性浸潤，切開流出深黃色、透明的液體，咽周圍組織呈黃色膠膝樣浸潤，咽淋巴結(jié)和前頸淋巴結(jié)高度急性腫脹，上呼吸道黏膜卡他性潮紅。通過流行病學(xué)調(diào)查、臨床癥狀、病理變化，初步診斷為奶牛巴氏桿菌病，試驗(yàn)結(jié)果報(bào)告如下。

本實(shí)驗(yàn)室從送檢的1頭奶牛肺，肝，心等臟器；做涂片檢查，結(jié)果：牛肝臟中分離到1株高致病性巴氏桿菌，診斷為奶牛巴氏桿菌病。對疑似巴氏桿菌病死亡牛的組織器官進(jìn)行病理組織切片觀察，為診斷該病提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1．1 病料來源 采自2010年5月伊犁某縣養(yǎng)殖戶內(nèi)疑似巴氏桿菌病牛1頭。送檢時(shí)已死亡9h。

1．2 病料處理 分別采取心、肝、脾、肺、腎等組織器官用10%福爾馬林固定。

1．3 主要試劑 無水乙醇、蘇木素、伊紅、甲醛等試劑，均購自北京天宇生物試劑公司。

1．4 儀器 YL3輪式切片機(jī)（上海儀表廠）；倒置顯微鏡（SANYO公司，型號 MCO－17AI）；Olympus普通光學(xué)顯微鏡（JAPAN）；數(shù)碼照相機(jī)（SONY）。

2 方法

2．1 細(xì)菌檢測 無菌采取心、肝、脾、肺、腎及腸內(nèi)容物涂片，分別用革蘭染色和堿性美藍(lán)染色后鏡檢；將病料無菌操作接種于血清肉湯培養(yǎng)基和麥康凱培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)菌分離鑒定；將分離病原菌按0．3mL／只劑量經(jīng)腹腔注射法接種10只小鼠進(jìn)行動(dòng)物試驗(yàn)。

2．2 病理學(xué)觀察 對送檢病牛進(jìn)行剖檢，觀察各組織器官的病理學(xué)變化，取心、肝、脾、肺、腎等組織，經(jīng)福爾馬林溶液固定后，進(jìn)行常規(guī)石蠟包埋、切片以及H．E．染色，顯微鏡觀察并照相分析。

3 結(jié)果

3．1 細(xì)菌檢測結(jié)果 經(jīng)革蘭染色的病料涂片見有大量的兩端鈍圓、兩極濃染的紅色球桿菌，堿性美藍(lán)染色可見大量的呈明顯兩極著色的球桿菌；血清肉湯培養(yǎng)基變渾濁，有大量細(xì)菌生長，涂片革蘭染色鏡檢可見大量均勻的兩端濃染的球桿菌；麥康凱培養(yǎng)基無細(xì)菌菌落生長；血清肉湯培養(yǎng)的細(xì)菌接種的10只小鼠均在16～48h內(nèi)死亡。取小鼠病變臟器觸片染色鏡檢并同時(shí)進(jìn)行細(xì)菌分離培養(yǎng)，其分離細(xì)菌的特征與病料中分離的一致。

3．2 剖檢結(jié)果 病牛消瘦，被毛無光澤，可視黏膜發(fā)白。眼觀主要病變?yōu)榱馨徒Y(jié)腫大、出血，表現(xiàn)為出血性淋巴結(jié)炎；心包、胸腔積液；心肌可見明顯的白色壞死灶，心包膜，心內(nèi)、外膜均有出血點(diǎn)和出血斑；脾臟皺縮，質(zhì)地柔軟，表面分布大量白色斑點(diǎn)（見中插彩版圖1）；肺臟膨大，表面有塌陷，呈壞疽性肺炎變化（見中插彩版圖2）；肝臟腫大，有塊狀壞死灶和白色小結(jié)節(jié)（見中插彩版圖3）。

3．3 病理組織學(xué)變化 心肌纖維腫脹，部分肌纖維崩解斷裂，心肌纖維間毛細(xì)血管擴(kuò)張充血，肌漿中含有大量紅染顆粒，呈顆粒變性變化；部分肌纖維崩解斷裂，在斷裂部有多量的紅細(xì)胞，呈局灶性出血；肝臟呈中毒性營養(yǎng)不良的變化，肝小葉失去固有結(jié)構(gòu)，小葉中央靜脈淤血，部分肝細(xì)胞壞死；脾小體發(fā)生壞死，脾臟紅髓和白髓界限不清，有大量炎性細(xì)胞浸潤；脾小體發(fā)生壞死，細(xì)胞核溶解碎裂，并有大量炎性細(xì)胞，脾小梁被支解成島嶼狀；肺泡腔內(nèi)見有大量的巨噬細(xì)胞；肺泡內(nèi)有大量的嗜中性粒細(xì)胞，呈現(xiàn)化膿性肺炎的變化；支氣管內(nèi)有大量的嗜中性粒細(xì)胞滲出，呈化膿性支氣管炎；部分肺組織中細(xì)胞壞死，呈均質(zhì)紅染結(jié)構(gòu)，壞疽性肺炎；肺細(xì)支氣管和小血管周圍結(jié)締組織增生，呈現(xiàn)支氣管和小動(dòng)脈周圍炎變化；部分肺泡內(nèi)含大量變性、壞死的嗜中性粒細(xì)胞；另有部分肺泡中含有大量纖維蛋白和少量的白細(xì)胞，呈現(xiàn)纖維素性肺炎變化（見中插彩版圖4）；腎臟中腎小管壞死（腎小管上皮細(xì)胞胞核溶解消失，壞死細(xì)胞碎片進(jìn)入管腔，使整個(gè)腎小管呈均質(zhì)紅染的結(jié)構(gòu)，臨床檢驗(yàn)出現(xiàn)蛋白尿、管型尿）；腎小管間毛細(xì)血管擴(kuò)張充血，部分腎小管上皮細(xì)胞壞死。

4 討論

推測本病例的發(fā)生是外因與內(nèi)因相互作用的結(jié)果。首先在正常情況下，動(dòng)物呼吸道內(nèi)存有巴氏桿菌，但并不引起動(dòng)物發(fā)病，而當(dāng)外界或機(jī)體內(nèi)環(huán)境改變時(shí)，機(jī)體的抵抗力下降，造成菌群失調(diào)，毒力增強(qiáng)，由常在菌變?yōu)橹虏【?。該病原菌首先在其最近的組織器官大量繁殖并引發(fā)病變，并開始出現(xiàn)較輕微的癥狀。在此之后，機(jī)體抵抗力進(jìn)一步下降，細(xì)菌通過血液途徑或淋巴途徑進(jìn)入全身各個(gè)器官，并引起多器官出血性炎癥，形成敗血癥。

一般認(rèn)為，敗血癥時(shí)，脾臟較正常增大2～3倍，質(zhì)地變軟，被膜緊張，脾組織原有結(jié)構(gòu)模糊不清，顯微鏡觀察脾臟有大量白細(xì)胞浸潤和網(wǎng)狀內(nèi)皮細(xì)胞增生，脾小體受壓而變小，即所謂的“敗血脾”［2－3］。

本試驗(yàn)從臨床送檢的牛病料中分離獲得一株病原菌，經(jīng)涂片、染色、培養(yǎng)基上的變化試驗(yàn)等系統(tǒng)鑒定，初步證明該菌株為多殺性巴氏桿菌

本病例大體解剖觀察到脾臟稍腫大，病理組織學(xué)觀察到脾淋巴組織減少，脾小體結(jié)構(gòu)松散；心肌的局灶性壞死，部分心肌纖維斷裂、肌間有大量的炎性細(xì)胞浸潤；該牛腎臟中可見明顯的腎小管管腔被壞死脫落的腎小管上皮細(xì)胞堵塞的現(xiàn)象，由此判斷牛生前的尿液中可能檢測的管型尿。另外，本病例最突出的組織學(xué)病變是肺臟的壞疽性肺炎變化，由于臨床上?？人院秃粑щy的主要原因，加上敗血癥導(dǎo)致心力衰竭并使該牛死亡的最后原因。

［1］ 張福春．牛巴氏桿菌病的防治措施［J］．養(yǎng)殖技術(shù)顧問，2011（01）：129－130．

［2］ Jubb K V F，Kennedy P C，Palmer N．Pathology of Domestic Animals［M］．4th edition．California：Acadmic Press，1992：55－88．

［3］ 汪開毓，熊焰，耿毅．亞成體大熊貓細(xì)菌性敗血癥的病理學(xué)觀察［J］．中國獸醫(yī)科技，2000，30（1）：28－29．