水貂氣單胞桿菌和大腸桿菌混合感染的診治

任 橋，徐 玉，劉煥奇，畢可東

（青島農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，山東 青島266109）

2012年1月山東省文登市一水貂養(yǎng)殖場(chǎng)突然發(fā)病。該水貂場(chǎng)飼養(yǎng)水貂已有4年，水貂共400只，母320只，公80只。從2011年12月開始發(fā)病，病程有一個(gè)月，死亡90多只，曾在某動(dòng)物醫(yī)院按腸炎用氟苯尼考、頭孢他啶和黃芪多糖治療過(guò)，有短暫好轉(zhuǎn)，但現(xiàn)又反復(fù)發(fā)病。第二次發(fā)病后，將病死貂送來(lái)檢驗(yàn)。本病通過(guò)臨床癥狀、病理剖檢及細(xì)菌學(xué)檢查，疑似為氣單胞桿菌和大腸桿菌混合感染。

1 臨床癥狀

病貂多數(shù)突然發(fā)病，表現(xiàn)食欲減退或廢絕，精神委靡，體溫升高到40.5℃以上。繼而出現(xiàn)腹瀉，腹瀉先以黃色糞便出現(xiàn)，后轉(zhuǎn)為排煤焦油樣的糞便。病程一般2～3d，快則1d左右死亡，慢則5d左右死亡。

2 病理變化

肺臟有大小不等的出血點(diǎn)或出血斑；肝臟彌漫性出血，紅黃相間，邊緣光滑，稍脆；脾臟腫，有少量黑色壞死灶；腎臟表面有出血點(diǎn)；腸系膜淋巴結(jié)腫大，有出血、壞死；胃內(nèi)容物呈煤焦油樣。

3 實(shí)驗(yàn)室診斷

3.1 涂片鏡檢 取新鮮病死貂的心血、肝臟、肺臟、脾臟直接進(jìn)行涂片，分別進(jìn)行革蘭染色，顯微鏡下觀察，見有菌體兩端鈍圓的的革蘭陰性桿菌，單個(gè)或成對(duì)存在；同時(shí)發(fā)現(xiàn)一種革蘭陰性直桿菌，無(wú)莢膜，散在或成對(duì)。

3.2 分離培養(yǎng) 取新鮮病死貂的肝臟、肺臟、脾臟及腸黏膜等病料分別接種于營(yíng)養(yǎng)瓊脂和鮮血瓊脂平板上，放入37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h。結(jié)果普通培養(yǎng)基上長(zhǎng)出圓形、邊緣整齊、中央隆起、表面濕潤(rùn)、光滑、半透明、顏色由灰白色至淺黃色、帶有芳香氣味及灰色、邊緣整齊、光滑、表面有光澤的兩種小菌落。挑選有芳香氣味、淺黃色的可疑菌落再接種于鮮血瓊脂培養(yǎng)基上進(jìn)行純培養(yǎng)，得到細(xì)菌的純培養(yǎng)物，涂片鏡檢見有大量?jī)啥蒜g圓的革蘭陰性桿菌（以下簡(jiǎn)稱病菌Ⅰ）。挑取另一可疑菌落再接種于伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基，在培養(yǎng)基上產(chǎn)生黑色帶金屬閃光的菌落，涂片鏡檢見有大量的革蘭陰性直桿菌（以下簡(jiǎn)稱病菌Ⅱ）。

3.3 病菌Ⅰ的鑒別

3.3.1 生化試驗(yàn) 取分離純化后的培養(yǎng)菌進(jìn)行生化試驗(yàn)。結(jié)果表明，本菌能利用甘油、葡萄糖，產(chǎn)酸產(chǎn)氣；發(fā)酵水楊素、阿拉伯糖、蔗糖、麥芽糖、甘露糖；發(fā)酵乳糖、棉籽糖和肌醇。靛基質(zhì)、M.R、V－P陽(yáng)性，氧化酶、過(guò)氧化氫酶陽(yáng)性。該生化反應(yīng)試驗(yàn)結(jié)果與氣單胞桿菌生化反應(yīng)特點(diǎn)相符。

3.3.2 動(dòng)物試驗(yàn) 采取瀕死或剛死不久的病死貂的肝、脾病變組織，按比例制成1∶10的懸液，或純分離菌24h培養(yǎng)物，經(jīng)口或皮下接種敏感水貂。通常3～7d致死。也可給小鼠腹腔注射，在2～4d發(fā)病死亡。從死亡鼠的心血中分離到與接種菌菌落形態(tài)Ⅰ菌體涂片、染色特征一致的細(xì)菌。根據(jù)以上綜合診斷，病菌Ⅰ為氣單胞桿菌。

3.4 病菌Ⅱ的鑒別

3.4.1 生化試驗(yàn) 取分離純化后的培養(yǎng)菌進(jìn)行明膠穿刺培養(yǎng)后進(jìn)行生化試驗(yàn)，結(jié)果表明，本菌能發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣；能發(fā)酵乳糖、甘露糖、D－木糖、海藻糖；吲哚和甲基紅試驗(yàn)均為陽(yáng)性；V－P和枸櫞酸鹽試驗(yàn)均為陰性；不產(chǎn)生硫化氫；不液化明膠。該生化反應(yīng)試驗(yàn)結(jié)果與大腸桿菌生化反應(yīng)特點(diǎn)相符。

3.4.2 動(dòng)物試驗(yàn) 取分離菌的肉湯22h培養(yǎng)液0.1mL、0.2mL，分別腹腔接種20g左右的小鼠各2只，18h4只小鼠全部死亡，對(duì)照組正常。從死亡鼠的心血中分離到與接種菌菌落形態(tài)Ⅱ菌體涂片、染色特征一致的細(xì)菌。根據(jù)以上綜合診斷，病菌Ⅱ?yàn)榇竽c桿菌。

4 診斷結(jié)果

綜合臨床癥狀、病理變化、實(shí)驗(yàn)室診斷，確診為氣單胞桿菌和大腸桿菌混合感染。

5 藥敏試驗(yàn)

分別選擇新霉素、慶大霉素、丁胺卡那霉素、先鋒霉素、頭孢噻呋、復(fù)方新諾明、氨芐青霉素、氟哌酸、氯霉素、林可霉素及強(qiáng)力霉素等10種藥物進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，新霉素和頭孢噻呋高敏；強(qiáng)力霉素中敏；其他各種藥物未出現(xiàn)抑菌環(huán)。

6 防治

6.1 加強(qiáng)飼養(yǎng)管理 搞好衛(wèi)生消毒工作，隔離發(fā)病貂，對(duì)籠舍、地面環(huán)境、糞便等用5%熱火堿水噴灑消毒，每天1次，連用1周；食槽及飲水槽，徹底清洗消毒，每天2次。對(duì)病死貂焚燒深埋，杜絕再用來(lái)飼喂貂。魚類飼料必須用自來(lái)水清洗干凈、充分煮熟后飼喂，不得生喂。供給新鮮清潔、無(wú)污染的飲水，避免本病的繼續(xù)傳播。

6.2 根據(jù)藥敏結(jié)果，選用敏感的藥物進(jìn)行治療 按臨床常規(guī)劑量注射頭孢噻呋，1次/日，連用3d；新霉素，口服，15g/kg飼料，連用5d；葡糖糖、維生素C和復(fù)合維生素B 50mg/kg飼料，連用2周。

7 討論

水貂氣單胞菌病又稱水貂出血性敗血癥，是由嗜水氣單胞桿菌引起的一種出血性敗血性傳染病。嗜水氣單胞桿菌廣泛存在于淡水、海水、含有有機(jī)物的淤泥，以及魚類的體表；健康魚的帶菌率甚高，因此，水域和魚類是本病的主要傳染源［1］。本病主要由污染的魚類飼料通過(guò)消化道感染發(fā)病。在饑餓、飼料蒸煮不完全、抵抗力降低等因素誘發(fā)下可引起暴發(fā)流行。

大腸桿菌是腸道的一種常在菌，屬于條件致病菌，當(dāng)水貂機(jī)體抵抗力降低時(shí)才呈現(xiàn)致病性。在氣候突變、管理不當(dāng)時(shí)，幼貂容易受寒感冒，導(dǎo)致機(jī)體抵抗力下降，環(huán)境中和體內(nèi)的條件性致病菌容易入侵機(jī)體，造成水貂發(fā)生疾?。?］。

該貂場(chǎng)發(fā)病原因可能是由于魚類飼料長(zhǎng)時(shí)間生喂，使之存在于魚體表面的嗜水氣單胞桿菌感染機(jī)體導(dǎo)致發(fā)病，再加之氣候忽冷忽熱，水貂場(chǎng)的消毒工作不到位，繼發(fā)大腸桿菌的感染。通過(guò)藥敏試驗(yàn)表明，嗜水氣單胞桿菌和大腸桿菌對(duì)多種抗生素都有一定的耐藥性，可能與平時(shí)濫用藥物有關(guān)。所以治療此類疾病時(shí)最好盡早做出正確診斷，并通過(guò)藥敏試驗(yàn)，選擇最敏感藥物，才能收到顯著的防治效果，避免浪費(fèi)藥物和延誤防治時(shí)機(jī)，減少損失。

［1］ 錢國(guó)成.毛皮動(dòng)物細(xì)菌性病害（6）［J］.特種經(jīng)濟(jì)動(dòng)植物，2009（5）：19－20.

［2］ 鄒玲.水貂大腸桿菌病的診斷［J］.中國(guó)畜牧獸醫(yī)，2006，36（9）：147－148.

［3］ 呂俊，徐鑌蕊.雞大腸桿菌病的實(shí)驗(yàn)室診斷［J］.中國(guó)畜牧獸醫(yī)，2008，35（9）：98－99.