遼東楤木三萜皂苷類化學(xué)成分的研究Δ

張家鑫，田瑜，鐘曉明，孫桂波，孫曉波，許旭東#b（1.浙江中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，杭州 310053；.中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥用植物研究所，北京 100193）

遼東楤木三萜皂苷類化學(xué)成分的研究Δ

張家鑫1，2＊，田瑜2，鐘曉明1#a，孫桂波2，孫曉波2，許旭東2#b（1.浙江中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，杭州 310053；2.中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥用植物研究所，北京 100193）

目的：研究遼東楤木中三萜皂苷類化學(xué)成分。方法：采用各種柱色譜對(duì)遼東楤木中的化學(xué)成分進(jìn)行分離純化，通過(guò)理化性質(zhì)和波譜分析鑒定化合物結(jié)構(gòu)。結(jié)果：從遼東楤木中分離并鑒定出10個(gè)三萜皂苷，分別為齊墩果酸-28-O-β-D-吡喃葡糖苷（1）、Elatoside E（2）、Elatoside F（3）、3-O-β-D-吡喃葡萄糖（1-3）-α-L-吡喃阿拉伯糖-齊墩果酸-28-O-β-D-吡喃葡糖苷（4）、Araliasaponin Ⅳ（5）、屏邊三七苷（6）、Tarasaponin Ⅳ（7）、Elatoside C（8）、SpinasaponinA28-O-glucoside（9）、楤木皂苷C（10）。其中，化合物4、5為首次從該植物中分離得到。結(jié)論：該試驗(yàn)結(jié)果可為遼東楤木的進(jìn)一步研究提供依據(jù)。

遼東楤木；三萜皂苷；化學(xué)成分

遼東楤木（Aralia elataSeem.）為五加科楤木屬植物，又名龍牙楤木、刺龍牙、刺嫩芽，主要分布在我國(guó)東北地區(qū)，朝鮮、日本等地也有分布。其藥用部位為根皮、葉，具有補(bǔ)氣安神、活血化瘀、除濕止痛的功效，用于治療神經(jīng)衰弱、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、肝炎、糖尿病、外傷出血癥等[1]。本課題組從20世紀(jì)80年代就開(kāi)始了對(duì)遼東楤木的系統(tǒng)研究[2-3]，通過(guò)現(xiàn)代色譜技術(shù)分離制備了遼東楤木皂苷，并通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)了其治療冠心病、心絞痛的新用途。目前，以遼東楤木總皂苷為成分研制的楤木心脈通膠囊已獲得藥物臨床研究批件（批號(hào)：2003L01111），并已完成臨床觀察。為明確楤木總皂苷中具有抗心肌缺血的皂苷類化合物及其構(gòu)效關(guān)系，本試驗(yàn)對(duì)遼東楤木的皂苷類成分進(jìn)行了研究，從其總皂苷中分離得到10個(gè)三萜皂苷類化合物，其結(jié)構(gòu)根據(jù)理化性質(zhì)與波譜分析分別鑒定為齊墩果酸-28-O-β-D-吡喃葡糖苷（1）、Elatoside E（2）、Elatoside F（3）、3-O-β-D-吡喃葡萄糖（1-3）-α-L-吡喃阿拉伯糖-齊墩果酸-28-O-β-D-吡喃葡糖苷（4）、Araliasaponin Ⅳ（5）、屏邊三七苷（6）、Tarasaponin Ⅳ（7）、Elatoside C（8）、SpinasaponinA28-O-glucoside（9）、楤木皂苷C（10）。其中，化合物4和5為首次從該植物中分離得到。

1 材料

1.1 儀器

AVANCEⅢ600型超導(dǎo)超屏蔽傅里葉變換核磁共振（NMR）波譜儀（TMS為內(nèi)標(biāo)，德國(guó)Bruker公司）；LTQ-Obitrap XL型高效液相色譜（HPLC）-質(zhì)譜（MS）儀（美國(guó)Thermo Scientific公司）；

1.2 試劑

AB-8大孔吸附樹脂（南開(kāi)大學(xué)化工廠）；柱層析硅膠、薄層層析硅膠（青島海洋化工廠）；所用試劑均為分析純。

1.3 藥材

試驗(yàn)藥材采自遼寧鞍山市，經(jīng)中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥用植物研究所張本剛研究員鑒定其來(lái)源為五加科楤木屬植物遼東楤木A.elataSeem.。

2 提取與分離

取遼東楤木藥材10kg，用70%乙醇回流提取3次，每次70L，減壓濃縮得提取液。提取液經(jīng)大孔吸附樹脂柱（AB-8），先用水洗，再用20%乙醇洗，最后用80%乙醇洗脫，回收80%乙醇，減壓干燥，得到干浸膏，干浸膏加70%乙醇溶解，回收溶劑后減壓干燥，制得總皂苷?？傇碥胀ㄟ^(guò)硅膠柱，合并得9個(gè)洗脫部分（Fr.1～Fr.9）。經(jīng)過(guò)反復(fù)硅膠柱層析，F(xiàn)r.4得到化合物1（200mg）；Fr.6得到化合物2（5.2mg）、3（8.4mg）、4（24.3mg）、5（8.4mg）；Fr.7得到化合物6（46mg）、7（71.6mg）、8（30.6mg）、9（32.5mg）；Fr.8得到化合物10（350mg）。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1：白色粉末，5%濃硫酸-乙醇溶液噴霧顯色后顯紫紅色斑點(diǎn)。1H-NMR（d5-pyridine，600MHz）δ：6.33（1H，d，J＝7.8Hz），5.46（1H，s，H-12），1.24（3H，s，CH3），1.22（3H，s，CH3），1.13（3H，s，CH3），1.02（3H，s，CH3），0.92（3H，s，CH3），0.90（3H，s，CH3），0.89（3H，s，CH3）。碳譜數(shù)據(jù)見(jiàn)表1。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[4]報(bào)道基本一致，故確定該化合物為齊墩果酸-28-O-β-D-吡喃葡糖苷（Oleanlic acid 28-O-β-D-glucoside ester）。

表1 化合物1～10的碳譜數(shù)據(jù)（吡啶）Tab1 13C-NMR spectrum data of compounds 1-10（in d5-pyridine）

續(xù)表1Continued tab 1

化合物2：白色粉末，5%濃硫酸-乙醇溶液噴霧顯色后顯紫紅色斑點(diǎn)。1H-NMR（d5-pyridine，600MHz）δ：5.46（1H，s，H-12），5.40（1H，d，J＝7.8Hz），5.30（1H，d，J＝7.8Hz），4.75（1H，d，J＝6.6Hz），1.29（3H，s，CH3），1.28（3H，s，CH3），1.08（3H，s，CH3），1.00（3H，s，CH3），0.98（3H，s，CH3），0.95（3H，s，CH3），0.83（3H，s，CH3）。碳譜數(shù)據(jù)見(jiàn)表1。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[5]報(bào)道基本一致，故確定該化合物為Elatoside E。

化合物3：白色粉末，5%濃硫酸-乙醇溶液噴霧顯色后顯紫紅色斑點(diǎn)。1H-NMR（d5-pyridine，600MHz）δ：6.30（1H，d，J＝7.8Hz），5.41（1H，s，H-12），5.37（1H，d，J＝7.8Hz），5.28（1H，d，J＝7.8Hz），4.75（1H，d，J＝7.2Hz），1.26（3H，s，CH3），1.25（3H，s，CH3），1.08（3H，s，CH3），1.08（3H，s，CH3），0.91（3H，s，CH3），0.88（3H，s，CH3），0.86（3H，s，CH3）。碳譜數(shù)據(jù)見(jiàn)表1。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[5]報(bào)道基本一致，故確定該化合物為Elatoside F。

化合物4：白色粉末，5%濃硫酸-乙醇溶液噴霧顯色后顯紫紅色斑點(diǎn)。1H-NMR（d5-pyridine，600MHz）δ：6.33（1H，d，J＝7.8Hz），5.54（1H，s，H-12），5.38（1H，d，J＝7.8Hz），4.74（1H，d，J＝7.8Hz），1.30（3H，s，CH3），1.26（3H，s，CH3），1.10（3H，s，CH3），1.10（3H，s，CH3），0.91（3H，s，CH3），0.88（3H，s，CH3），0.86（3H，s，CH3）。碳譜數(shù)據(jù)見(jiàn)表1。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[6]報(bào)道基本一致，故確定該化合物為3-O-β-D-吡喃葡萄糖（1-3）-α-L-吡喃阿拉伯糖-齊墩果酸-28-O-β-D-吡喃葡糖苷（3-O-β-D-Glucopyranosyl（1-3）-α-L-arabinopyranosyl oleanolic acid 28-O-β-D-glucopyranosyl ester）。

化合物5：白色粉末，5%濃硫酸-乙醇溶液噴霧顯色后顯紫紅色斑點(diǎn)。1H-NMR（d5-pyridine，600MHz）δ：6.32（1H，d，J＝8.4Hz），5.59（1H，d，J＝7.8Hz），5.42（1H，s，H-12），5.37（1H，d，J＝7.8Hz），4.82（1H，d，J＝7.8Hz），1.26（3H，s，CH3），1.25（3H，s，CH3），1.08（3H，s，CH3），1.06（3H，s，CH3），0.90（3H，s，CH3），0.88（3H，s，CH3），0.83（3H，s，CH3）。碳譜數(shù)據(jù)見(jiàn)表1。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[7]報(bào)道基本一致，故確定該化合物為AraliasaponinⅣ。

化合物6：白色粉末，5%濃硫酸-乙醇溶液噴霧顯色后顯紫紅色斑點(diǎn)。1H-NMR（d5-pyridine，600MHz）δ：6.31（1H，d，J＝7.8Hz），5.64（1H，d，J＝7.8Hz），5.44（1H，s，H-12），5.10（1H，d，J＝7.8Hz），4.80（1H，d，J＝7.8Hz），1.29（3H，s，CH3），1.22（3H，s，CH3），1.07（3H，s，CH3），0.92（3H，s，CH3），0.91（3H，s，CH3），0.89（3H，s，CH3），0.78（3H，s，CH3）。碳譜數(shù)據(jù)見(jiàn)表1。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[8]報(bào)道基本一致，故確定該化合物為屏邊三七苷（Stipuleanoside R2）。

化合物7：白色粉末，5%濃硫酸-乙醇溶液噴霧顯色后顯紫紅色斑點(diǎn)。1H-NMR（d5-pyridine，600MHz）δ：6.29（1H，d，J＝7.8Hz），5.53（1H，d，J＝7.8Hz），5.44（1H，s，H-12），5.11（1H，d，J＝7.8Hz），4.88（1H，d，J＝7.8Hz），1.31（3H，s，CH3），1.25（3H，s，CH3），1.08（3H，s，CH3），0.95（3H，s，CH3），0.92（3H，s，CH3），0.89（3H，s，CH3），0.78（3H，s，CH3）。碳譜數(shù)據(jù)見(jiàn)表1。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[9]報(bào)道基本一致，故確定該化合物為TarasaponinⅣ。

化合物8：白色粉末，5%濃硫酸-乙醇溶液噴霧顯色后顯紫紅色斑點(diǎn)。1H-NMR（d5-pyridine，600MHz）δ：6.31（1H，d，J＝7.8Hz），5.42（1H，d，J＝7.8Hz），5.42（1H，s，H-12），5.27（1H，d，J＝7.8Hz），4.46（1H，d，J＝7.8Hz），1.28（3H，s，CH3），1.19（3H，s，CH3），1.06（3H，s，CH3），1.01（3H，s，CH3），0.90（3H，s，CH3），0.87（3H，s，CH3），0.81（3H，s，CH3）。碳譜數(shù)據(jù)見(jiàn)表1。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[10]報(bào)道基本一致，故確定該化合物為Elatoside C。

化合物9：白色粉末，5%濃硫酸-乙醇溶液噴霧顯色后顯紫紅色斑點(diǎn)。1H-NMR（d5-pyridine，600MHz）δ：6.31（1H，d，J＝7.8Hz），5.68（1H，d，J＝7.8Hz），5.42（1H，s，H-12），4.80（1H，d，J＝7.8Hz），1.30（3H，s，CH3），1.28（3H，s，CH3），1.25（3H，s，CH3），1.08（3H，s，CH3），0.95（3H，s，CH3），0.92（3H，s，CH3），0.89（3H，s，CH3）。碳譜數(shù)據(jù)見(jiàn)表1。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[8]報(bào)道基本一致，故確定該化合物為SpinasaponinA28-O-glucoside。

化合物10：白色粉末，5%濃硫酸-乙醇溶液噴霧顯色后顯紫紅色斑點(diǎn)。1H-NMR（d5-pyridine，600MHz）δ：6.31（1H，d，J＝7.8Hz），5.43（1H，d，J＝7.8Hz），5.39（1H，s，H-12），5.32（1H，d，J＝7.8Hz），4.80（1H，d，J＝7.8Hz），1.26（3H，s，CH3），1.22（3H，s，CH3），1.06（3H，s，CH3），0.91（3H，s，CH3），0.92（3H，s，CH3），0.88（3H，s，CH3），0.80（3H，s，CH3）。碳譜數(shù)據(jù)見(jiàn)表1。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[11]報(bào)道基本一致，故確定該化合物為楤木皂苷C（Araloside C）。

4 討論

本試驗(yàn)從楤木總皂苷中分離得到10個(gè)五環(huán)三萜類皂苷，其中2個(gè)為首次從該植物中分離得到，進(jìn)一步豐富了該植物的化學(xué)成分組成。目前，遼東楤木總皂苷的抗心肌缺血活性是研究熱點(diǎn)，不僅總皂苷被證實(shí)作用確切，而且還發(fā)現(xiàn)部分活性顯著的單體化合物。本試驗(yàn)結(jié)果可為楤木皂苷類成分抗心肌缺血的活性及其構(gòu)效關(guān)系的分析奠定物質(zhì)基礎(chǔ)，還將為遼東楤木的深入研究與新藥開(kāi)發(fā)提供科學(xué)依據(jù)。

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Study on Saponins Chemical Components fromAralia elata

ZHANG Jia-xin1，2，TIAN Yu2，ZHONG Xiao-ming1，SUN Gui-bo2，SUN Xiao-bo2，XU Xu-dong2
（1.College of Pharmacy，Zhejiang University of TCM，Hangzhou 310053，China；2.Institute of Medicinal Plant Development，Chinese Academy of Medical Sciences，Beijing 100193，China）

OBJECTIVE：To study the saponins chemical components fromAralia elata.METHODS：Chemical compounds were isolated and purified by column chromatography，and their structures were identified by means of physical property and spectral data analysis.RESULTS：10saponins were isolated and identified as Oleanlic acid 28-O-glucoside ester（1），Elatoside E（2），Elatoside F（3），3-O-β-D-Glucopyranosyl（1-3）-α-L-arabinopyranosyl oleanolic acid 28-O-β-D-glucopyranosyl ester（4），AraliasaponinⅣ（5），Stipuleanoside R2（6），TarasaponinⅣ（7），Elatoside C（8），Spinasaponin A 28-O-glucoside（9），Araloside C（10）.Compound 4and 5both were obtained from the plant for the first time.CONCLUSION：Results of the trial can provide reference for the further study ofA.elata.

Aralia elata；Saponins；Chemical components

R284.1；R917

A

1001-0408（2013）15-1380-03

DOI10.6039/j.issn.1001-0408.2013.15.13

國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目（No.81173589）

＊碩士研究生。研究方向：天然產(chǎn)物化學(xué)。E-mail：freidazhang@gmail.com

#a通信作者：教授，博士研究生導(dǎo)師。研究方向：中藥及天然藥物研發(fā)。電話：0571-86613576。E-mail：zxm_k6@yahoo.com.cn

#b通信作者：研究員，博士。研究方向：中藥及天然藥物研發(fā)。E-mail：xdxu@implad.ac.cn

2012-09-10

2012-11-01）