膝關(guān)節(jié)創(chuàng)傷后炎性細胞因子變化的研究現(xiàn)狀①

王飛，劉克敏

近年來，隨著分子生物學及其相關(guān)學科的迅速發(fā)展以及細胞因子研究的深入，炎性細胞因子在膝關(guān)節(jié)創(chuàng)傷后造成疼痛及僵直的作用越來越受到重視。大量研究表明，膝關(guān)節(jié)創(chuàng)傷后周圍組織，包括關(guān)節(jié)囊、滑膜、關(guān)節(jié)軟骨、半月板等，均能產(chǎn)生炎癥介質(zhì)，這就提示膝關(guān)節(jié)創(chuàng)傷后疼痛及僵直與其局部的炎癥反應(yīng)及炎性細胞因子有關(guān)。在膝關(guān)節(jié)創(chuàng)傷后，炎性細胞因子的存在是僵直的原因還是結(jié)果，目前還不清楚。最有可能的解釋是炎性細胞因子可能是通過自分泌或旁分泌的方式作用于膝關(guān)節(jié)周圍，通過改變其生物行為和(或)產(chǎn)生病理效應(yīng)，從而參與僵直的形成。而膝關(guān)節(jié)創(chuàng)傷后的細胞生物學行為改變后，可產(chǎn)生各種炎性細胞因子誘導并引起膝關(guān)節(jié)僵直。膝關(guān)節(jié)疼痛和(或)僵直發(fā)生后，在康復(fù)治療過程中又反過來刺激各種炎性因子的產(chǎn)生及變化。兩者相互促進，互為因果。

這些炎性細胞因子中有促進和加速炎癥反應(yīng)的因子如腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor,TNF)、白細胞介素-1(interleukin-1,IL-1)、白細胞介素-2(IL-2)、白細胞介素-6(IL-6)、環(huán)氧酶(cyclooxygenase,Cox)等。下面對各種炎性細胞因子近年的研究進行綜述。

1 白細胞介素(interleukin,IL)

白細胞介素簡稱白介素，是由多種細胞產(chǎn)生并作用于多種細胞的一類細胞因子。它和血細胞生長因子同屬細胞因子。兩者相互協(xié)調(diào)，相互作用，共同完成造血和免疫調(diào)節(jié)功能。IL在傳遞信息，激活與調(diào)節(jié)免疫細胞，介導T、B細胞活化、增殖與分化在炎癥反應(yīng)中起重要作用。目前已發(fā)現(xiàn)了35個IL，分別命名為，IL-1～IL-35。而在膝關(guān)節(jié)創(chuàng)傷后的研究中主要集中在IL-1、IL-2和IL-6。

1.1 白細胞介素-1(interleukin-1,IL-1)

IL-1是單核細胞產(chǎn)生的多肽，血管內(nèi)皮細胞、大小膠質(zhì)細胞、星形細胞、巨噬細胞和T淋巴細胞均能產(chǎn)生IL-1。Clausen等用凝膠過濾的化學分析和高效液相陰離子交換色譜法研究發(fā)現(xiàn)，血管內(nèi)皮細胞釋放IL-1，當加到培養(yǎng)中的巨噬細胞內(nèi)時，可增加細胞數(shù)5～7倍[1]。Karao?lan等研究發(fā)現(xiàn)，IL-1可影響下丘腦-垂體-腎上腺皮質(zhì)激素的釋放，多種神經(jīng)遞質(zhì)如5-羥色胺、去甲腎上腺素、多巴胺、乙酰膽堿、氨基丁酸、促腎上腺素釋放因子、促甲狀腺激素釋放激素及阿片肽等的作用均與IL-1有關(guān)[2]。IL-1還參與宿主防御，參與免疫反應(yīng)，炎癥、發(fā)熱、急性期蛋白質(zhì)合成，全身或局部誘發(fā)的IL-1可有力地啟動、加強、延長創(chuàng)傷后疾病應(yīng)激狀態(tài)的炎癥反應(yīng)，與IL-1相應(yīng)的血管內(nèi)皮細胞功能的改變可使白細胞滲到炎癥區(qū)[3-4]。此外，IL-1能夠刺激星形細胞和膠質(zhì)細胞的激活和增生，介導星形細胞表面干擾介導的Ⅱ類主要組織相容性復(fù)合體(major histocompatibility complex,MHC)抗原的調(diào)節(jié)，刺激星形細胞分泌IL-6，使星形細胞擴增，膠質(zhì)細胞溶解[5-6]。

IL-1還是重要的炎性介質(zhì)之一，也是一種熱原質(zhì)成分[7]，具有致熱和介導炎癥的作用，主要在細胞免疫激活中發(fā)揮調(diào)節(jié)作用。IL-1受各種刺激因子(包括抗原、內(nèi)毒素、細菌及病毒等)所誘導，在急性和慢性炎癥的致病過程發(fā)揮重要作用[8]。IL-1升高在某些自身免疫性炎癥反應(yīng)，如類風濕性關(guān)節(jié)炎時，IL-1參與了關(guān)節(jié)滑膜、軟骨的病理損傷過程，在多種關(guān)節(jié)炎[9](包括創(chuàng)傷性關(guān)節(jié)炎、骨性關(guān)節(jié)炎、色素絨毛結(jié)節(jié)性滑膜炎等)的關(guān)節(jié)液中可測出高水平IL-1。監(jiān)測IL-1的釋放有助于了解機體的免疫調(diào)節(jié)能力，可為疾病的診斷、療效觀察及預(yù)后判斷等提供一項可靠依據(jù)。

近年來研究發(fā)現(xiàn)，IL-1在早期膝關(guān)節(jié)創(chuàng)傷后的病理過程中占有重要的地位。IL-1可通過誘導基質(zhì)金屬蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMPs)的表達，引起蛋白多糖的降解。Ross等發(fā)現(xiàn)，IL-1可以通過影響MMPs的生物活性以及抑制基質(zhì)中蛋白多糖的合成而導致創(chuàng)傷后關(guān)節(jié)軟骨退變的發(fā)生，而且這種作用呈現(xiàn)明顯的時間和濃度依賴性[10]。Wassilew等發(fā)現(xiàn)IL-1能促使滑膜細胞產(chǎn)生的前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)和磷脂酶A2(phospholipaseA2，PLA2)增加，且分泌量呈劑量依賴性增加，而后兩者同時誘導酪蛋白酶(casein)mRNA的產(chǎn)生，減少創(chuàng)傷后早期膝關(guān)節(jié)滑膜中總的蛋白多糖含量，從而導致關(guān)節(jié)滑膜萎縮、退變加劇[11]。

1.2 白細胞介素-2(interleukin-2,IL-2)

IL-2原稱T細胞生長因子，是最為重要的淋巴因子之一，在機體復(fù)雜免疫網(wǎng)絡(luò)中起中心調(diào)節(jié)作用，它能誘導和激活機體多種免疫細胞發(fā)揮效應(yīng)。因此，IL-2在機體免疫應(yīng)答、免疫調(diào)節(jié)和抗腫瘤免疫中具有重要作用。IL-2的產(chǎn)生或表達異常與臨床多種疾病有密切關(guān)系[12]。通過測定人外周血、尿液中IL-2水平，或激活淋巴細胞上清液中IL-2水平，可為疾病的早期診斷、預(yù)后及療效觀察提供可靠數(shù)據(jù)。IL-2低下在多種原發(fā)性免疫缺陷病和繼發(fā)性免疫缺陷病時均可伴有產(chǎn)生IL-2水平和表達IL-2膜受體的能力顯著降低，如類風濕性關(guān)節(jié)炎[13-14]、紅斑狼瘡、麻風病、艾滋病等。Vangsness等在分子基礎(chǔ)水平研究骨性關(guān)節(jié)炎時發(fā)現(xiàn)，骨關(guān)節(jié)炎患者滑膜中IL-2表達水平較正常膝關(guān)節(jié)滑膜明顯升高[15]。Cuellar等還發(fā)現(xiàn)，在膝關(guān)節(jié)創(chuàng)傷后早期，即使半月板仍然完好，在半月板中的IL-2表達水平仍然明顯高于正常膝關(guān)節(jié)半月板，并且與疼痛及僵直形成有密切關(guān)系[16]。

1.3 白細胞介素-6(interleukin-6,IL-6)

IL-6是一種來源廣泛的細胞因子，它可被多種淋巴細胞和非淋巴細胞自發(fā)地或在各種因素刺激下產(chǎn)生。IL-6是細胞因子網(wǎng)絡(luò)中一種多效應(yīng)的細胞因子[17]，對多種細胞的生長、分化及其基因表達都有影響。IL-6還是重要的炎癥促進劑，可刺激炎癥細胞聚集，激活和炎癥介質(zhì)的釋放，促進膝關(guān)節(jié)創(chuàng)傷后疼痛及早期僵直形成的驗證過程[16]。Huebner等在兔膝關(guān)節(jié)創(chuàng)傷后早期僵直形成的過程中研究發(fā)現(xiàn)，IL-6、IL-1β、TNF-α在關(guān)節(jié)囊攣縮過程中含量相應(yīng)增加，提示炎性細胞因子可能在關(guān)節(jié)僵直的形成和發(fā)展中起重要作用[18]。Sui和Lee等對正常和膝關(guān)節(jié)創(chuàng)傷后早期的關(guān)節(jié)軟骨組織分別進行體外培養(yǎng)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，創(chuàng)傷后早期的膝關(guān)節(jié)關(guān)節(jié)軟骨組織培養(yǎng)液中IL-6含量遠遠高于正常的膝關(guān)節(jié)關(guān)節(jié)軟骨組織，提示IL-6可能參與了膝關(guān)節(jié)創(chuàng)傷后早期僵直形成的過程[19]。Lin等同樣認為，IL-6可能通過調(diào)節(jié)免疫細胞的功能而促進膝關(guān)節(jié)創(chuàng)傷后早期的自身免疫反應(yīng)，從而加劇膝關(guān)節(jié)創(chuàng)傷后僵直形成過程[20]。還有研究認為，在膝關(guān)節(jié)創(chuàng)傷后早期，僵直形成的病理過程中有自身免疫反應(yīng)機制參與[21]?？傊?，IL-6在膝關(guān)節(jié)創(chuàng)傷后早期僵直形成過程中的作用是多方面的，具體作用機制還有待于進一步深入研究。

2 腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor,TNF)

19世紀末人們發(fā)現(xiàn)，某些腫瘤患者感染細菌或注射細菌毒素混合物后，腫瘤會縮小。當時人們認為是細菌內(nèi)毒素所導致的效應(yīng)。1975年，Carswell及其同事發(fā)現(xiàn)，感染卡介苗的小鼠用內(nèi)毒素處理后，其血清中含有一種具有內(nèi)毒素樣能使腫瘤壞死的物質(zhì)，稱其為腫瘤壞死因子[22]。1985年Shalaby把巨噬細胞產(chǎn)生的腫瘤壞死因子命名為TNF-α，把T淋巴細胞產(chǎn)生的淋巴毒素(lymph toxin,LT)命名為TNF-β[23]。TNF-α又稱惡質(zhì)素。

TNF不僅是一種抗腫瘤炎性細胞因子，還是一種真正的多效因子，具有多種生物學效應(yīng)。TNF可直接作用于T細胞、B細胞、Mφ、NK細胞等效應(yīng)細胞，在細胞分子水平上發(fā)揮作用。TNF主要由巨噬細胞和單核細胞產(chǎn)生。Ng已發(fā)現(xiàn)，TNF可對眾多的組織器官產(chǎn)生生物效應(yīng)，是體內(nèi)細胞因子網(wǎng)絡(luò)中重要的多功能物質(zhì)[24]。Kaye等同樣認為，TNF具有多種生物效應(yīng)，主要是介導抗腫瘤及調(diào)節(jié)機體的免疫功能，也是炎癥反應(yīng)介質(zhì)之一，參與炎癥病變的多方面病理變化[25]。有研究證明，風濕性關(guān)節(jié)炎患者的膝關(guān)節(jié)滑膜中有大量TNF存在[26]。還有研究證明，在嚴重創(chuàng)傷后、膿毒敗血癥、感染性肺炎等嚴重致命性疾病時，血清中TNF含量明顯增高[27]。細菌、瘧疾抗原、病毒感染均可誘導TNF產(chǎn)生，TNF又反過來具有抗細菌、抗病毒、抗瘧疾的作用。TNF還是內(nèi)源性熱原質(zhì)，引起發(fā)熱，并誘導創(chuàng)傷急性期蛋白的合成[28]。TNF引起發(fā)熱可能是通過直接刺激下丘腦體溫調(diào)節(jié)中樞和刺激巨噬細胞釋放IL-1而引起，還可通過IL-1、TNF-α刺激其它細胞產(chǎn)生IL-6。TNF在體外還可刺激骨質(zhì)破壞和再吸收，抑制新骨形成[29]。將重組TNF加入體外骨培養(yǎng)物可使多核的破骨細胞數(shù)增加，礦化的骨質(zhì)質(zhì)量下降，骨膠原(骨質(zhì)的主要成分)合成抑制。TNF刺激骨吸收是通過誘導成骨細胞產(chǎn)生一種可溶性因子完成的。

TNF-α是一種單核因子，主要由激活的單核細胞和巨噬細胞產(chǎn)生，中性粒細胞、淋巴激活殺傷細胞(lymphocyte activated killer cells,LAK)、星狀細胞、內(nèi)皮細胞、平滑肌細胞亦可產(chǎn)生TNF-α。近期研究認為，TNF-α主要有以下作用：可以上調(diào)基質(zhì)金屬蛋白酶的活性和基因表達；能刺激產(chǎn)生其他炎性細胞因子，如IL-1、IL-6、IL-8和PGE2等；能刺激細胞遷徙，改變內(nèi)皮細胞的通透性；能降低基質(zhì)中膠原和蛋白多糖的合成；能刺激機體產(chǎn)生炎癥反應(yīng)[30]。Fiocco應(yīng)用單克隆抗TNF-α抗體對膝關(guān)節(jié)創(chuàng)傷后早期關(guān)節(jié)滑膜組織進行檢測，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，早期僵直的膝關(guān)節(jié)滑膜細胞中存在TNF-α，并證明創(chuàng)傷早期僵直膝關(guān)節(jié)所釋放的TNF-α可啟動一系列的神經(jīng)病理變化[31]。Woodell-May通過對比TNF-α與IL-1β在蛋白水平，細胞因子的降解和基因受體方面面對人正常和膝關(guān)節(jié)創(chuàng)傷后的關(guān)節(jié)軟骨細胞的影響，發(fā)現(xiàn)在同一刺激水平時，TNF-α并不能誘導MMPs的表達，但是它可以使IL-1β的表達增多，從而說明TNF-α可能是膝關(guān)節(jié)創(chuàng)傷后早期僵直中重要的啟動因素[32]。

但是，關(guān)于創(chuàng)傷后僵直膝關(guān)節(jié)周圍肌肉組織中TNF-α的來源和及其機制，目前仍未明了。有研究認為，在大鼠創(chuàng)傷后膝關(guān)節(jié)僵直的形成過程中，肌肉細胞就開始產(chǎn)生TNF-α和IL-1等炎性細胞因子，而這些炎性細胞因子可以從細胞內(nèi)遷移到細胞外，導致創(chuàng)傷后僵直膝關(guān)節(jié)周圍肌肉組織巨噬細胞集聚，由于聚集的巨噬細胞具有強大的吞噬功能及其釋放的基質(zhì)金屬蛋白酶的作用，病變的肌肉組織可逐漸萎縮[33]。Orita和Koshi等認為，TNF-α可能參與并促進創(chuàng)傷后膝關(guān)節(jié)僵直的發(fā)生、發(fā)展過程，在創(chuàng)傷后膝關(guān)節(jié)僵直的發(fā)病機制中發(fā)揮重要的作用[34]。

3 環(huán)氧酶(cyclooxygenase,Cox)

Cox是前列腺素(prostaglandin,PG)合成所必須的酶，也是PG合成初始步驟中的關(guān)鍵性限速酶。又稱環(huán)氧化物水化酶。全稱為環(huán)氧化物水解酶，其作用是催化醚水解，專一作用于醚鍵。該酶可催化各種環(huán)氧化物和芳烴氧化物水解。Cox有兩種同工酶：Cox-1和Cox-2。

3.1 Cox-1

Cox-1為結(jié)構(gòu)型，被稱為要素酶或管家酶，主要存在于血管、胃、腎等組織中[35]。國內(nèi)、外學者普遍認為，Cox-1產(chǎn)生的PG參與機體正常生理過程和保護功能，如維持胃腸黏膜完整性、調(diào)節(jié)血小板功能和腎血流[36-37]?，F(xiàn)已證明，Cox-1不僅參與炎癥并有加重炎癥的作用[38]。

3.2 Cox-2

Cox-2為誘導型，是經(jīng)刺激迅速產(chǎn)生的誘導酶，即由各種損傷性化學、物理和生物因子誘導其產(chǎn)生，進而催化PG合成參與炎癥反應(yīng)[39]。Gierse等認為，Cox-2似乎主要參與早期炎癥，而在慢性炎癥階段反而有抗炎作用[40]。有研究發(fā)現(xiàn)，在梗死的心肌內(nèi)皮細胞、肌細胞和擴張性心肌病纖維化的心肌細胞中均發(fā)現(xiàn)Cox-2表達增加[41]。有學者認為，內(nèi)皮細胞誘導的Cox-2增加，可能是一種防護創(chuàng)傷后損傷的補償機制，對肌肉細胞可能有保護作用[42]。

Crofford將Cox歸納為：Cox-1作為生理性酶具有保護黏膜、激活血小板及維持腎功能的作用，并參與巨噬細胞分化[43-44]。而Cox-2除在誘導下作為病理性酶引起炎癥、疼痛、發(fā)熱和異常調(diào)節(jié)外，還參與組織修復(fù)，維持腦、腎、心、肺等器官的生理功能。另外，該酶對慢性炎癥有抗炎作用。

4 總結(jié)

炎性細胞因子在創(chuàng)傷后早期膝關(guān)節(jié)僵直的形成過程中起著重要作用，其含量增加或減少會促進細胞外基質(zhì)降解、促進膝關(guān)節(jié)周圍的炎癥反應(yīng)，最終導致膝關(guān)節(jié)僵直及相關(guān)癥狀的發(fā)生。雖然，近年來對炎癥細胞因子的研究越來越深入，并可以應(yīng)用炎性細胞因子的作用來解釋一些臨床征象，但這些炎性細胞因子作用機制非常復(fù)雜，來源與作用方式仍無法完全解釋。目前對膝關(guān)節(jié)關(guān)節(jié)炎的研究主要集中于骨性關(guān)節(jié)炎、類風濕性關(guān)節(jié)炎和創(chuàng)傷后關(guān)節(jié)炎早期階段。沒有對膝關(guān)節(jié)創(chuàng)傷后僵直及康復(fù)治療過程中的中、長期炎性細胞因子表達變化加以研究。并且，目前研究主要關(guān)注于關(guān)節(jié)軟骨細胞、滑膜組織及關(guān)節(jié)囊內(nèi)的變化，沒有對關(guān)節(jié)周圍肌肉組織變化的系統(tǒng)研究。因此，創(chuàng)傷后膝關(guān)節(jié)僵直在康復(fù)訓練過程中，周圍肌肉組織的炎性細胞因子的變化規(guī)律需要進一步研究。

[1]Clausen F,H?nell A,Israelsson C,et al.Neutralization of interleukin-1β reduces cerebral edema and tissue loss and improves late cognitive outcome following traumatic brain injury in mice[J].Eur J Neurosci,2011,34(1)：110-123.

[2]Karao?lan A,Akdemir O,C?nar N,et al.Correlation between lepton and pro-inflammatory cytokines in cortical contusion injury model[J].Ulus Travma Acil Cerrahi Derg,2011,17(4)：298-302.

[3]Ralay Ranaivo H,Zunich SM,Choi N,et al.Mild stretch-induced injury increases susceptibility to interleukin-1β-induced release of matrix metalloproteinase-9 from astrocytes[J].J Neurotrauma,2011,28(9)：1757-1766.

[4]Sowa G,Coelho P,Vo N,et al.Determination of annulus fibrosis cell response to tensile strain as a function of duration,magnitude,and frequency [J].JOrthop Res,2011,29(8)：1275-1283.

[5]Bingham D,John CM,Panter SS,et al.Post-injury treatment with lipopolysaccharide or lipooligosaccharide protects rat neuronal and glial cell cultures[J].Brain Res Bull,2011,85(6)：403-409.

[6]Abd-El-Basset EM,Abd-El-Barr MM.Effect of interleukin-1β on the expression of actin isoforms in cultured mouse astroglia[J].Anat Rec(Hoboken),2011,294(1)：16-23.

[7]Tsukamoto T,Antonic V,El Hajj II,et al.Novel model of peripheral tissue trauma-induced inflammation and gastrointestinal dysmotility[J].Neurogastroenterol Motil,2011,23(4)：379-386,e164.

[8]Catterall JB,Stabler TV,Flannery CR,et al.Changes in serum and synovial fluid biomarkers after acute injury[J].Arthritis Res Ther,2010,12(6)：R229.

[9]Spulber S,Schultzberg M.Connection between inflammatory processes and transmitter function-modulatory effects of interleukin-1[J].Prog Neurobiol,2010,90(2)：256-622.

[10]Ross TN,Kisiday JD,Hess T,et al.Evaluation of the inflammatory response in experimentally induced synovitis in the horse：a comparison of recombinant equine interleukin-1 beta and lipopolysaccharide[J].Osteoarthritis Cartilage,2012,20(12)：1583-1590.

[11]Wassilew GI,Lehnigk U,Duda GN,et al.The expression of proinflammatory cytokines and matrix metalloproteinases in the synovial membranes of patients with osteoarthritis compared with traumatic knee disorders[J].Arthroscopy,2010,26(8)：1096-1104.

[12]Guo M,Liu T,Guo JC,et al.Study on serum cytokine levels in posttraumatic stress disorder patients[J].Asian Pac J Trop Med,2012,5(4)：323-325.

[13]Yudoh K,Matsuno H,Nakazawa F,et al.Reduced expression of the regulatory CD4+T cell subset is related to Th1/Th2 balance and disease severity in rheumatoid arthritis[J].Arthritis Rheum,2000,43(3)：617-627.

[14]Hoy MD,Williams JL,Kirkham BW.Symmetrical synovial fluid cell cytokine messenger RNA expression in rheumatoid arthritis：analysis by reverse transcription/polymerase chain reaction[J].Br J Rheumatol,1997,36(2)：170-173.

[15]Vangsness CT Jr,Burke WS,Narvy SJ,et al.Human knee sy-novial fluid cytokines correlated with grade of knee osteoarthritis-a pilot study[J].Bull NYU Hosp Jt Dis,2011,69(2)：122-127.

[16]Cuellar JM,Scuderi GJ,Cuellar VG,et al.Diagnostic utility of cytokine biomarkers in the evaluation of acute knee pain[J].J Bone Joint Surg Am,2009,91(10)：2313-2320.

[17]Bonne O,Gill JM,Luckenbaugh DA,et al.Corticotropin-releasing factor,interleukin-6,brain-derived neurotrophic factor,insulin-like growth factor-1,and substance P in the cerebrospinal fluid of civilians with posttraumatic stress disorder before and after treatment with paroxetine[J].J Clin Psychiatry,2011,72(8)：1124-1128.

[18]Huebner KD,Shrive NG,Frank CB.New surgical model of post-traumatic osteoarthritis：Isolated intra-articular bone injury in the rabbit[J].J Orthop Res,2013,31(6)：914-920

[19]Sui Y,Lee JH,DiMicco MA,et al.Mechanical injury potentiates proteoglycan catabolism induced by interleukin-6 with soluble interleukin-6 receptor and tumor necrosis factor alpha in immature bovine and adult human articular cartilage[J].Arthritis Rheum,2009,60(10)：2985-2996.

[20]Lin MT,Yeh SL,Wu MS,et al.Impact of surgery on local and systemic responses of cytokines and adhesion molecules[J].Hepatogastroenterology,2009,56(94-95)：1341-1345.

[21]Ley C,Ekman S,Elmén A,et al.Interleukin-6 and tumor necrosis factor in synovial fluid from horses with carpal joint pathology[J].J Vet Med A Physiol Pathol Clin Med,2007,54(7)：346-351.

[22]Carswell EA,Old LJ,Kassel RL,et al.An endotoxin-induced serum factor that causes necrosis of tumors[J].Proc Natl Acad Sci U S A,1975,72(9)：3666-3670.

[23]Shalaby MR,Aggarwal BB,Rinderknecht E,et al.Activation of human polymorphonuclear neutrophil functions by interferon-gamma and tumor necrosis factors[J].J Immunol,1985,135(3)：2069-2073.

[24]Ng LG,Sutherland AP,Newton R,et al.B cell-activating factor belonging to the TNF family(BAFF)-R is the principal BAFF receptor facilitating BAFF costimulation of circulating T and B cells[J].J Immunol,2004,173(2)：807-817.

[25]Kaye AD,Hoover JM,Baluch AR.A contemporary review of multiple organ failure[J].Middle East J Anesthesiol,2005,18(2)：273-292.

[26]Ramos-Casals M,Brito-Zerón P,Soto MJ,et al.Autoimmune diseases induced by TNF-targeted therapies[J].Best Pract Res Clin Rheumatol,2008,22(5)：847-861.

[27]Sundberg E,Grundtman C,Af Klint E,et al.Systemic TNF blockade does not modulate synovial expression of the pro-inflammatory mediator HMGB1 in rheumatoid arthritis patients-a prospective clinical study[J].Arthritis Res Ther,2008,10(2)：R33.

[28]Popa C,Netea MG,van Riel PL,et al.The role of TNF-alpha in chronic inflammatory conditions,intermediary metabolism,and cardiovascular risk[J].J Lipid Res,2007,48(4)：751-762.

[29]Matsuno H,Yoshida K,Ochiai A,et al.Requirement of methotrexate in combination with anti-tumor necrosis factor-alpha therapy for adequate suppression of osteoclast genesis in rheumatoid arthritis[J].J Rheumatol,2007,34(12)：2326-2333.

[30]Straub RH,H?rle P,Sarzi-Puttini P,et al.Tumor necrosis factor-neutralizing therapies improve altered hormone axes：an alternative mode ofantiinflammatory action [J].Arthritis Rheum,2006,54(7)：2039-2046.

[31]Fiocco U,Sfriso P,Lunardi F,et al.Molecular pathways involved in synovial cell inflammation and tumoral proliferation in diffuse pigmented villonodular synovitis[J].Autoimmun Rev,2010,9(11)：780-784.

[32]Woodell-May J,Matuska A,Oyster M,et al.Autologous protein solution inhibits MMP-13 production by IL-1β and TNFα-stimulated human articular chondrocytes[J].J Orthop Res,2011,29(9)：1320-1326.

[33]Yabe Y,Hagiwara Y,Suda H,et al.Joint immobilization induced hypoxic and inflammatory conditions in rat knee joints[J].Connect Tissue Res,2010,44(8)：1039-1046.

[34]Orita S,Koshi T,Mitsuka T,et al.Associations between proinflammatory cytokines in the synovial fluid and radiographic grading and pain-related scores in 47 consecutive patients with osteoarthritis of the knee[J].BMC Musculoskelet Disord,2011,12：144.

[35]Lee Y,Rodriguez C,Dionne RA.The role of COX-2 in acute pain and the use of selective COX-2 inhibitors for acute pain relief[J].Curr Pharm Des,2005,11(14)：1737-1755.

[36]Luan Y,Xu W.The function of the selective inhibitors of cyclooxygenase 2[J].Mini Rev Med Chem,2006,6(12)：1375-1381.

[37]Paiotti AP,Artigiani Neto R,Forones NM,et al.Immunoexpression of cyclooxygenase-1 and-2 in ulcerative colitis[J].Braz J Med Biol Res,2007,40(7)：911-918.

[38]Danilewicz M,Wagrowska-Danilewicz M.Analysis of renal immunoexpression of cyclooxygenase-1 and cyclooxygenase-2 in lupus and nonlupus membranous glomerulopathy[J].Pol J Pathol,2007,58(4)：221-226.

[39]Boldarian NA,Pozharisski? KM,Vinokurov VL,et al.Prognostic significance of cyclooxygenase(COX-1 and COX-2)expression in endometrial carcinoma(clinical and immunohistochemical study)[J].Vopr Onkol,2008,54(1)：40-46.

[40]Gierse J,Nickols M,Leahy K,et al.Evaluation of COX-1/COX-2 selectivity and potency of a new class of COX-2 inhibitors[J].Eur J Pharmacol,2008,588(1)：93-98.

[41]Wong SC,Fukuchi M,Melnyk P,et al.Induction of cyclooxygenase-2 and activation of nuclear factor-kappa B in myocardium of patients with congestive heart failure[J].Circulation,1998,98(2)：100-103.

[42]Crofford LJ.Clinical experience with specific COX-2 inhibitors in arthritis[J].Curr Pharm Des,2000,6(17)：1725-1736.

[43]Crofford LJ.COX-2 in synovial tissues[J].Osteoarthritis Cartilage,1999,7(4)：406-408.

[44]Crofford LJ.COX-1 and COX-2 tissue expression：implications and predictions[J].J Rheumatol Suppl,1997,49：15-19.