培養(yǎng)條件對錦帶花粉離體萌發(fā)的影響*

劉雪蓮，秦佳梅，張 巖，梁 宇，徐貴福

(通化師范學(xué)院 生命科學(xué)學(xué)院，吉林 通化 134002)

錦帶(Diervillasessilifolia.)為忍冬科落葉直立灌木，花期4～6月，錦帶花枝葉茂密，花色艷麗，花期長可達兩個多月[1-2]，適宜庭院墻隅、湖畔群植．也可在樹叢林緣作花籬、叢植配植．點綴于假山、坡地．錦帶屬陽性樹種，喜光、耐寒、耐旱、怕水澇，對土壤要求不嚴，是一種很好的園林綠化裝飾樹種[3].目前關(guān)于錦帶花粉活力[4]、培養(yǎng)基組分對花粉離體萌發(fā)的影響[5]有相關(guān)報道，但就培養(yǎng)條件對錦帶花粉離體萌發(fā)的研究尚未見報道，本試驗以錦帶新鮮花粉為研究材料,采用單因素實驗方法研究培養(yǎng)基pH值、培養(yǎng)溫度和時間對花粉萌發(fā)的影響,其結(jié)果可為錦帶花粉的生殖生物學(xué)研究、植物的品種改良與育種操作、種質(zhì)庫保存提供基礎(chǔ)資料．

1 材料與方法

1.1 實驗材料

選用通化師范學(xué)院校園內(nèi)8:00～10:00采集的錦帶花花粉進行萌發(fā)實驗.選擇當天開放完整的，花粉多的花朵，最好在晴天采集．

1.2 培養(yǎng)基

實驗采用固體培養(yǎng)基，培養(yǎng)基的成分為: 20%蔗糖+0.02%硼酸+0.005%鈣離子+5g/L瓊脂．

1.3 實驗方法

(1)花粉的培養(yǎng)方法.配制好的培養(yǎng)基滴在干凈載玻片上，待培養(yǎng)基冷卻后，再將當天采集花朵的花粉用毛筆均勻的灑落在載玻片的培養(yǎng)基表面，每個載玻片大約2～3朵花，然后將載玻片放在襯有濕潤濾紙的培養(yǎng)皿中，以保證空氣濕度利于花粉的萌發(fā)和防止培養(yǎng)基快速蒸發(fā)，在培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng).

(2)實驗處理.采用單一因素實驗方法，在研究某一因素時其他因子均取假設(shè)的最適值.實驗處理如下：培養(yǎng)基pH:5.5、6.0、6.5、7.0、7.5五個梯度.培養(yǎng)溫度:15℃、20℃、25℃、30℃四個梯度.培養(yǎng)時間:1h、2h、3h、4h、6h五個梯度.

(3)花粉的萌發(fā)與檢測.經(jīng)過培養(yǎng)后，在顯微鏡下觀測花粉萌發(fā)的情況，每處理3次重復(fù)，統(tǒng)計花粉萌發(fā)率，用測微尺測量花粉管的長度，以10個花粉的花粉管長度平均值作為花粉管的長度，花粉管長度超過花粉粒直徑作為萌發(fā)標準，計算萌發(fā)率(同一視野中花粉萌發(fā)數(shù)占花粉總數(shù)的百分比)和花粉管長度，每個視野花粉?？倲?shù)約在100粒左右.

(4)數(shù)據(jù)分析.利用DPS統(tǒng)計軟件和EXCEL軟件對所得實驗數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析.

2 結(jié)果分析

2.1 培養(yǎng)基pH值對花粉萌發(fā)和花粉管生長的影響

測定pH值對其影響時，在不同pH值的培養(yǎng)基上，花粉萌發(fā)和花粉管生長有顯著差異. 由表1可見，花粉萌發(fā)率和花粉管長度的變化趨勢一致，在pH值為5.5的培養(yǎng)基上萌發(fā)率為0,pH值為6.0時的萌發(fā)率達到最大為89.333%，花粉管長度最大為0.44mm,當pH值超過6.0后花粉萌發(fā)率和花粉管長度隨pH值的升高而逐漸下降.

表1 培養(yǎng)基pH值對錦帶花粉萌發(fā)和花粉管生長的影響

注：表中每個小寫字母代表5%的顯著水平

2.2 培養(yǎng)溫度對花粉萌發(fā)和花粉管生長的影響

經(jīng)不同溫度培養(yǎng)的花粉，其萌發(fā)率和花粉管生長差異較大(見表2).在15～25℃溫度范圍內(nèi)花粉萌發(fā)率隨溫度升高而上升，25℃培養(yǎng)時花粉萌發(fā)率最高為86%，與其他溫度下培養(yǎng)的萌發(fā)率相比差異顯著，超過25℃時花粉萌發(fā)率開始下降.花粉管長度的變化趨勢與花粉萌發(fā)率的變化趨勢一致，即在較低的溫度范圍內(nèi)，隨溫度的升高花粉管生長越好，當超過25℃培養(yǎng)時花粉管長度反而下降，25℃培養(yǎng)條件下花粉管生長最好為0.42mm，與其他處理相比差異顯著.

表2 培養(yǎng)溫度對錦帶花粉萌發(fā)和花粉管生長的影響

注：表中每個小寫字母代表5%的顯著水平

2.3 培養(yǎng)時間對花粉萌發(fā)和花粉管生長的影響

不同培養(yǎng)時間條件下花粉萌發(fā)率和花粉管生長長度有較大差異(見表3).隨培養(yǎng)時間的延長花粉萌發(fā)率先升高后下降，當培養(yǎng)時間為3h時花粉萌發(fā)率最大為92%，與培養(yǎng)時間為2h和4h的花粉萌發(fā)率相比差異不顯著,花粉管長度的變化趨勢與花粉萌發(fā)率不同，隨培養(yǎng)時間的延長花粉管長度逐漸增加，當培養(yǎng)時間達到6h時花粉管長度達到最大值.

表3 培養(yǎng)時間對錦帶花粉萌發(fā)和花粉管生長的影響

注：表中每個小寫字母代表5%的顯著水平

3 結(jié)論

花粉萌發(fā)與生長不僅與培養(yǎng)基組分有關(guān)，而且也受培養(yǎng)基pH值和培養(yǎng)溫度的影響.研究表明植物花粉離體培養(yǎng)基的適宜pH值為5.0～7.0，最適pH值為6.0～6.5，在強酸或強堿條件下，均不利于離體花粉萌發(fā)與生長.他們受花粉培養(yǎng)溫度的影響，在培養(yǎng)溫度較低時花粉幾乎不萌發(fā)，花粉管也不生長．而達到15℃以上時才能良好生長.本實驗條件下,錦帶花粉萌發(fā)和花粉管生長的最適培養(yǎng)基pH值為 6.0，培養(yǎng)溫度為25℃，培養(yǎng)時間為3h.除了這些環(huán)境因素外，外源激素對植物花粉萌發(fā)和花粉管生長影響作用也很大.有關(guān)外源激素對錦帶花粉離體萌發(fā)的影響有待進一步研究.

參考文獻：

[1]阿達來提,侯正年.四季錦帶引種與栽培技術(shù)[J].新疆林業(yè),2005,6(1):23-29.

[2]周景清,張麗茹,周長虹,等.錦帶花全光噴霧嫩枝扦插繁殖技術(shù)[J].河北林業(yè)科技,2007(1):20-21.

[3]漢斌,鄭亦津,李法曾.山東植物志[M].青島:青島出版社,1997.

[4]劉林德,張萍,張麗,等.錦帶花的花粉活力、柱頭可授性及傳粉者的觀察[J].西北植物學(xué)報,2004,24(8):1431-1434.

[5]李范.不同培養(yǎng)條件對錦帶花粉萌發(fā)的影響[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2007,35(11):3234-3236.