脂肪酸合成酶在三陰性乳腺癌中的表達(dá)及其預(yù)后價(jià)值

孫 弢， 姚宇鋒

三陰性乳腺癌(triple-negative breast cancer, TNBC)為雌激素受體(estrogen receptor, ER)、孕激素受體(progesterone receptor, PR)、人類表皮生長(zhǎng)因子受體(human epidermal growth factor receptor-2, HER-2)均表達(dá)陰性的乳腺癌亞型，目前尚缺少有效的內(nèi)分泌治療和分子靶向治療手段，預(yù)后差。脂肪酸合成酶(fatty acid synthase, FAS)是脂肪酸生物合成的關(guān)鍵酶，在多種腫瘤組織中的表達(dá)增高[1-3]，既往針對(duì)FAS和TNBC的研究局限于FAS與臨床病理特征的相關(guān)性，不能直接反映其預(yù)后價(jià)值。因此本研究在此基礎(chǔ)上，對(duì)TNBC患者進(jìn)行隨訪，通過(guò)生存分析進(jìn)一步揭示FAS的臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集安徽省滁州市第一人民醫(yī)院及江蘇省腫瘤醫(yī)院2006年1月1日至2012年6月30日手術(shù)病理確診的TNBC 176例，均為女性，中位年齡49歲(22～73歲)，其中絕經(jīng)前患者121例，絕經(jīng)后55例。所有患者均為初診可手術(shù)患者，并經(jīng)術(shù)后病理確診為浸潤(rùn)性乳腺癌，免疫組化檢測(cè)確診為ER、PR和HER-2的表達(dá)均為陰性。其中浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌141例，浸潤(rùn)性小葉癌19例，其他類型16例。組織學(xué)分級(jí)Ⅰ級(jí)77例，Ⅱ級(jí)63例，Ⅲ級(jí)36例。術(shù)后根據(jù)AJCC病理學(xué)分期Ⅰ期91例，Ⅱ期56例，Ⅲ期29例，其中T1 92例，T2 63例，T3 25例，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移54例，無(wú)轉(zhuǎn)移122例。

1.2 免疫組織化學(xué)染色 采用Envision兩步法完成免疫組織化學(xué)染色，檢測(cè)FAS的表達(dá)情況，F(xiàn)AS陽(yáng)性定位于細(xì)胞質(zhì)，其的判斷采用陽(yáng)性染色強(qiáng)度結(jié)合陽(yáng)性細(xì)胞所占百分比進(jìn)行判斷，將切片中平均陽(yáng)性細(xì)胞比例及染色深淺分別計(jì)分，陽(yáng)性細(xì)胞比例≤1%為0分，2%～10%為1分，11% ～50%為2分，51%～80%為3分，≥81%為4分，染色深淺以多數(shù)細(xì)胞為準(zhǔn)，從無(wú)顯色至深棕色分別為0～3分，以上述2項(xiàng)評(píng)分之和作為每例患者的積分, 按積分高低判定FAS表達(dá)水平，≤3分為陰性表達(dá)，≥4分為陽(yáng)性表達(dá)。

1.3 隨訪 所有患者接受定期隨訪復(fù)查，復(fù)查包括臨床體檢、腫瘤標(biāo)志物、影像學(xué)檢查等，隨訪截止至患者死亡或2012年12月，隨訪時(shí)間以月為單位?；颊邿o(wú)病生存時(shí)間為手術(shù)日期至首次局部復(fù)發(fā)或遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移確診日期，總生存時(shí)間為手術(shù)日期至患者死亡日期。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)

行統(tǒng)計(jì)分析，以P<0.05作為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。不同F(xiàn)AS蛋白表達(dá)組間臨床病理資料比較采用χ2檢驗(yàn)。生存曲線用壽命表法繪制，生存率間差異的比較用Wilcoxon檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 FAS表達(dá)與TNBC臨床病理特征的關(guān)系 176例TNBC患者中FAS陽(yáng)性表達(dá)率為68%(120/176)。單因素分析顯示FAS表達(dá)與腫塊大小、組織學(xué)分級(jí)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移具有相關(guān)性，與年齡、絕經(jīng)狀態(tài)、病理學(xué)類型無(wú)關(guān)，具體數(shù)據(jù)見(jiàn)表1。

表1 FAS表達(dá)與TNBC臨床病理特征的關(guān)系

2.2 FAS表達(dá)與TNBC患者預(yù)后的關(guān)系 所有病例均完成定期隨訪復(fù)查，截止2012年12月，中位隨訪時(shí)間為49個(gè)月(6～97個(gè)月)。壽命表法繪制生存曲線顯示FAS陰性表達(dá)組的5年無(wú)病生存率(RFS)和5年總生存率(OS)分別為73%、84%，陽(yáng)性表達(dá)組的5年無(wú)病生存率和5年總生存率分別為21%、55%，兩組比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01，見(jiàn)圖1，圖2)。

圖1 TNBC不同F(xiàn)AS表達(dá)狀態(tài)的RFS生存分析

圖2 TNBC不同F(xiàn)AS表達(dá)狀態(tài)的OS生存分析

3 討論

脂肪酸在能量?jī)?chǔ)存、胞膜結(jié)構(gòu)的維持、蛋白質(zhì)酰化等方面具有重要的生理作用[4]。人體一般從飲食中或者自身合成途徑獲取。FAS是脂肪酸合成途徑的關(guān)鍵酶。乙酰CoA、丙二酰CoA和NADPH等通過(guò)FAS合成長(zhǎng)鏈脂肪酸[5]。在正常人體組織中FAS不表達(dá)或者低表達(dá)，因?yàn)槿梭w主要從飲食途徑獲取絕大多數(shù)的脂肪酸。但是在癌組織中由于腫瘤細(xì)胞快速增殖需要充分的能量供應(yīng)和膜脂的生物合成，F(xiàn)AS顯著增高。因此FAS被稱為代謝性致癌基因。

TNBC目前尚無(wú)明確的作用靶點(diǎn)，內(nèi)分泌治療及針對(duì)HER-2的分子靶向治療對(duì)其無(wú)效，因此臨床容易發(fā)生復(fù)發(fā)與轉(zhuǎn)移，預(yù)后差，尋找合適的作用靶點(diǎn)是目前TNBC研究的熱點(diǎn)。既往研究發(fā)現(xiàn)FAS在乳腺癌中過(guò)表達(dá)，但是在正常乳腺組織及乳腺良性腫瘤中低表達(dá)或者無(wú)表達(dá)[6]。我們的研究發(fā)現(xiàn)在TNBC中FAS陽(yáng)性表達(dá)率為68%。在進(jìn)行單因素分析時(shí)顯示，F(xiàn)AS的表達(dá)與腫瘤大小、組織學(xué)分級(jí)及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移存在相關(guān)性，但是與年齡、絕經(jīng)狀態(tài)、病理學(xué)類型等無(wú)關(guān)。較大的腫瘤體積、高組織學(xué)分級(jí)、存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移是乳腺癌的不良預(yù)后因素，這也提示FAS陽(yáng)性表達(dá)的TNBC預(yù)后更差。

為了進(jìn)一步明確FAS在TNBC預(yù)后評(píng)價(jià)中的價(jià)值，我們對(duì)入組的176例患者進(jìn)行了定期隨訪，生存分析顯示FAS表達(dá)陽(yáng)性的TNBC患者的5年無(wú)病生存率和總生存率，均顯著高于FAS表達(dá)陰性者。此提示FAS可能成為判斷TNBC患者預(yù)后的一個(gè)指標(biāo)，甚至成為TNBC的治療靶標(biāo)。

既往研究通過(guò)RNA干擾技術(shù)下調(diào)FAS的表達(dá)能夠抑制LNCaP細(xì)胞的增殖，而對(duì)正常細(xì)胞沒(méi)有影響[7]。下調(diào)FAS能夠顯著提高乳腺癌細(xì)胞株對(duì)紫杉類及長(zhǎng)春堿類化療藥物的敏感性。目前FAS抑制劑變藍(lán)菌素、C75和奧利司他均能有效抑制FAS的表達(dá)，但是其性質(zhì)不穩(wěn)定，且在動(dòng)物模型中通過(guò)活化CPT-1出現(xiàn)諸如厭食、體重下降等副作用，這些副作用限制了其臨床應(yīng)用[8]。因此目前希望能夠發(fā)現(xiàn)特異性靶向腫瘤細(xì)胞，但是對(duì)正常細(xì)胞作用較小的FAS抑制劑，使FAS成為TNBC治療的新靶點(diǎn)。

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