游離脂肪酸及葡萄糖對(duì)鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞的影響及作用機(jī)制

[摘要] 目的 探討高糖高游離脂肪酸（free fatty acids，F(xiàn)FAs）對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞增殖和凋亡的影響及其作用機(jī)制。 方法 原代培養(yǎng)大鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞（rat aorta endothelial cell，RAEC），采用不同濃度的葡萄糖（5.5 mmol/L，30 mmol/L）及棕櫚酸（200 μmol/L、400 μmol/L、600 μmol/L）單獨(dú)或聯(lián)合作用于細(xì)胞24 h、48 h、72 h。免疫組織化學(xué)染色方法鑒定內(nèi)皮細(xì)胞并測(cè)定IL-8、Bcl-2、BAX表達(dá)水平；MTT比色法檢測(cè)細(xì)胞增殖率。 結(jié)果 FFAs及葡萄糖單獨(dú)及聯(lián)合應(yīng)用均可導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)凋亡形態(tài)學(xué)變化，增殖呈劑量-時(shí)間依賴性（P ＜ 0.05），且聯(lián)合組明顯低于單獨(dú)培養(yǎng)組（P ＜ 0.01）；干預(yù)后IL-8、BAX表達(dá)增加，Bcl-2蛋白表達(dá)逐漸減弱，Bcl-2/BAX比值逐漸減小，聯(lián)合培養(yǎng)組表達(dá)更為明顯。 結(jié)論 高濃度FFAs及高糖具有抑制內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)、促進(jìn)其凋亡的作用，其作用機(jī)制可能是通過(guò)葡萄糖及棕櫚酸酯參與PI3K/AKT等途徑激活氧化應(yīng)激誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。

[關(guān)鍵詞] 糖尿??；游離脂肪酸；內(nèi)皮細(xì)胞；bcl-2；BAX；PI3K/AKT

[中圖分類號(hào)] R34[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A[文章編號(hào)] 1673-9701（2012）10-0004-04

Influence and mechanism of free fatty acid and glucose on endothelial cell of rat aorta

GUO Hailian1 LIU Xiaoling2 LI Pengcui3 HAN Le2 WANG Dongqing1

1.Graduate School of Shanxi Medical University， Taiyuan 030001， China; 2.Department of Endocrinology， the Second Affiliated Hospital of Shanxi Medical University， Taiyuan 030001，China； 3.Department of Orthopaedic Laboratory， the Second Affiliated Hospital of Shanxi Medical University， Taiyuan 030001， China

[Abstract] Objective To explore the influence and mechanism of free fatty acid（FFAs） and glucose on endothelial cell proliferation and apoptosis. Methods Rat aorta endothelial cell （RAEC）were cultured in vitro， glucose(5.5 mmol/L， 30 mmol/L) and palmitic acid (200 μmol/L、400 μmol/L、600 μmol/L) in different concentration were applied，alone and together， to RAEC for 24 h， 48 h， 72 h. Immunohistochemistry were used to determine CD31-related antigen and detectedIL-8， Bcl-2， BAX protein expression changes; Applied four methyl azo thiazole blue (determined by MTT) colorimetric detection different environment RAEC proliferation capacity. Results Glucose and FFAs， alone and together， can lead to apoptotic morphological changes in RAEC； FFAs and glucose display strong growth inhibitory effect in a-time and does-development manner against RAEC (P < 0.05)， and the combination group was significantly lower than the proliferation of cultured alone group (P < 0.01). After intervention， IL-8， BAX expression were increased， Bcl-2 protein expression were gradually decreased， Bcl-2/BAX ratio wrere decreased， and more obvirous expression of the combination group. Conclusion High FFAs and high glucose can inhibit the growth of RAEC and promote their apoptosis， its mechanism may be involved by glucose and palmitate PI3K/AKT pathway activation oxidative stress-induced apoptosis.

[Key words] Diabetes mellit; Free fatty acid; Endothelial cell; bcl-2; BAX; PI3K/AKT

糖尿病血管病變是糖尿病的主要并發(fā)癥之一，也是糖尿病患者致殘和致死的主要并發(fā)癥，其中血管內(nèi)皮細(xì)胞的損傷在血管并發(fā)癥中起著關(guān)鍵作用[1]。2001年美國(guó)糖尿病學(xué)會(huì)年會(huì)上，BANTING科學(xué)獎(jiǎng)得主McGarry JD 教授提出，脂代謝障礙是2型糖尿病及其并發(fā)癥的基本病理生理改變[2]。伴隨著葡萄糖利用和代謝障礙，脂肪的合成代謝障礙而分解代謝異常增高，血液中FFAs含量增多，而FFAs在一定程度上可反映2型糖尿病患者體內(nèi)脂代謝異常狀況。FFAs尤其是棕櫚酸（palmitic acid，PA）可導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞功能障礙，是糖尿病血管病變的關(guān)鍵因素。因此，探討脂毒性對(duì)糖尿病血管病變的影響及可能的機(jī)制對(duì)臨床具有一定的指導(dǎo)意義。本實(shí)驗(yàn)觀察高糖狀態(tài)下不同濃度的棕櫚酸對(duì)大鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞的影響，并探討其可能的作用機(jī)制，為糖尿病血管病變的防治提供新的思路。

1 材料與方法

1.1 主要材料和試劑

SD大鼠（山西醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心），軟脂酸（Gibco，USA），RPMI 1640（武漢博士德），胎牛血清（Cyagen Biosciences，USA），大鼠內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子（VEGF）（Prospec，USA），胰蛋白酶（TRYPSIN 1：250）（Solarbio），去脂牛血清白蛋白（d-BSA）、四甲基偶氮唑藍(lán)（MTT）（sigma，USA），即用型兔抗大鼠CD31單克隆一抗試劑盒（武漢博士德）、即用型兔抗大鼠bcl-2單克隆一抗試劑盒（武漢博士德）、即用型兔抗大鼠BAX單克隆一抗試劑盒（武漢博士德）、即用型SABC免疫組織化學(xué)染色試劑盒（武漢博士德），DAB顯色液（武漢博士德）。

1.2 主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞的培養(yǎng)與鑒定

頸椎脫臼處死SD雌性大鼠，碘伏酒精消毒后，逐層剖開胸腹腔，于脊柱旁暴露主動(dòng)脈，游離主動(dòng)脈周圍筋膜及結(jié)締組織，分離后取主動(dòng)脈弓至髂總動(dòng)脈段，剪下放入無(wú)菌PBS液中漂洗去除附壁血細(xì)胞后，放入1640培養(yǎng)液中，使用眼科鑷將主動(dòng)脈內(nèi)膜翻轉(zhuǎn)朝外，并剪成1～2 mm寬動(dòng)脈環(huán)，平均擺放入25 cm2培養(yǎng)瓶中，37 ℃、5%CO2培養(yǎng)箱中靜置1 h后，加入配制好的大鼠專用內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)液（RPMI1640、20%胎牛血清、大鼠內(nèi)皮生長(zhǎng)因子、肝素、青鏈霉素），靜置68 h以上。每3天更換培養(yǎng)液一次，待細(xì)胞生長(zhǎng)單層融合后，0.25%胰酶消化傳代，實(shí)驗(yàn)使用3～5代細(xì)胞。采用形態(tài)學(xué)、倒置顯微鏡及抗CD31抗體免疫組化染色法行內(nèi)皮細(xì)胞鑒定。

1.3 實(shí)驗(yàn)分組

試驗(yàn)共設(shè)置7組：（1）游離脂肪酸干預(yù)組設(shè)3組：以去脂牛血清白蛋白（d-BSA）為溶解軟脂酸的載體，以加入培養(yǎng)液中軟脂酸濃度的不同分為200 μmol/L、400 μmol/L、600 μmol/L（各組載體d-BSA含量為0.2%、0.4%、0.6%）；（2）葡萄糖干預(yù)組，30 mmol/L GLU；（3）聯(lián)合培養(yǎng)組：30 mmol/L GLU + 400 μmol/L PA；（4）對(duì)照組：①正常培養(yǎng)液組（含5.5mmol/L GLU），②0.5% d-BSA+正常培養(yǎng)液組。

1.4 形態(tài)學(xué)觀察

以每孔1×104個(gè)細(xì)胞接種于6孔板中，細(xì)胞貼壁后加入PA及葡萄糖。設(shè)正常培養(yǎng)液組和0.5%d-BSA+正常培養(yǎng)液組為對(duì)照，于5%CO2、37℃溫箱中孵育48 h，在倒置顯微鏡下觀察并照相。

1.5 生長(zhǎng)曲線的測(cè)定

取90%單層融合的鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞P3代細(xì)胞消化成單細(xì)胞懸液，調(diào)整細(xì)胞濃度為3×104/mL，接種至24孔培養(yǎng)板中，每孔1 mL，每三孔為1組，共8組。每隔24 h抽查一組，用血球計(jì)數(shù)板數(shù)細(xì)胞數(shù)目，以時(shí)間為橫坐標(biāo)，培養(yǎng)細(xì)胞數(shù)對(duì)數(shù)為縱坐標(biāo)繪制生長(zhǎng)曲線。細(xì)胞倍增時(shí)間以以下公式計(jì)算：TD =T×log2/（log Nt-log No），T為培養(yǎng)時(shí)間，Nt和No分別代表接種后及培養(yǎng)T小時(shí)后的細(xì)胞數(shù)。

1.6 主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞生存率的檢測(cè)（MTT比色法）

將細(xì)胞培養(yǎng)至單層融合時(shí)，換無(wú)血清RPMI1640培養(yǎng)液同步化細(xì)胞24 h，分別給于不同濃度的干預(yù)液，共同孵育24 h、48 h、72 h終點(diǎn)時(shí)，每孔依次加入MTT溶液20 μL（5 mg/mL），避光繼續(xù)培養(yǎng)4 h，棄培養(yǎng)上清液；每孔加入DMSO 150 μL，置37℃水浴搖床均勻震蕩10 min，室溫放置10 min，使結(jié)晶物充分溶解；用酶標(biāo)儀在492 nm波長(zhǎng)處測(cè)定其吸光度（A）值。

1.7 免疫化學(xué)染色法測(cè)定IL-8、Bcl-2/BAX表達(dá)水平

常規(guī)消化，收集主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞，按照每孔1×105接種于放有蓋玻片的6孔板內(nèi)，每孔加入2 mL 1640內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)液，置于37℃、5%CO2孵育箱細(xì)胞爬片24 h，換無(wú)血清培養(yǎng)液培養(yǎng)24 h同步化細(xì)胞后加入不同濃度的棕櫚酸及葡萄糖繼續(xù)培養(yǎng)48 h，在48 h終點(diǎn)進(jìn)行試驗(yàn)：先用PBS洗兩次，加入4%多聚甲醛室溫固定30 min，PBS洗兩次，滅活酶室溫30 min，蒸餾水洗2次，胰酶37℃修復(fù)10 min，PBS洗2次，山羊血清37℃封閉30 min，按操作說(shuō)明滴加抗體，蘇木素復(fù)染，脫水透明風(fēng)干后封片，每次試驗(yàn)均以PBS代替一抗作為陰性對(duì)照組，以胞質(zhì)出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽(yáng)性。采用Image-Pro Plus（IPP）分析免疫組化圖片。

1.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，多組間比較顯著性檢驗(yàn)采用方差分析（ANOVA），兩兩比較用q檢驗(yàn)，P ＜ 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞形態(tài)

原代細(xì)胞在培養(yǎng)5～7 d后，在主動(dòng)脈貼壁附近可見少量游出的內(nèi)皮細(xì)胞，呈多角形或短梭形；培養(yǎng)到12～13 d，可見遷移出的細(xì)胞呈片生長(zhǎng)，70%～80%單層融合，分布密度不均。見圖1。大鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞在傳代接種2 h后開始貼壁，24 h后90%細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)，24～48 h間細(xì)胞量有所減少，48 h后可見新長(zhǎng)出的細(xì)胞為單層、互不重疊，呈梭形或鵝卵石狀，邊界清晰，胞漿豐富，核清晰，呈多角形。第3～5天，可見細(xì)胞呈小片狀集落生長(zhǎng)，細(xì)胞漲勢(shì)增快，第5～7天細(xì)胞生長(zhǎng)融合成片，中間排列緊密，部分可見典型的“鋪路石”狀排列的單層細(xì)胞。培養(yǎng)至7～8代后，細(xì)胞變瘦小，分泌物增多，可見細(xì)胞分化，成老化狀態(tài)。

圖1 原代大鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞100×

2.2 CD31相關(guān)抗原免疫組化鑒定結(jié)果

可見細(xì)胞呈圓形、梭形或多邊形，細(xì)胞胞漿內(nèi)可見棕黃色顆粒（圖2a），而對(duì)照組內(nèi)未見著色（圖2b）。證實(shí)培養(yǎng)的細(xì)胞為大鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞。

2.3 各組細(xì)胞（MTT）增殖狀況

不同劑量的棕櫚酸、葡萄糖及聯(lián)合培養(yǎng)組處理內(nèi)皮細(xì)胞24 h、48 h、72 h后，與正常培養(yǎng)液組及d-BSA對(duì)照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＜ 0.05），其中24 h低劑量PA組與對(duì)照組相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＞ 0.05），說(shuō)明短時(shí)間低濃度的棕櫚酸酯對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞的損害較??；相同濃度時(shí)，24 h與72 h組內(nèi)比較，高糖組、高、中、低劑量棕櫚酸組差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＜ 0.01），聯(lián)合培養(yǎng)組不同時(shí)間段差異均有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＜ 0.01）；高糖組、中、高劑量棕櫚酸組48 h與72 h組內(nèi)比較，24 h與48 h組內(nèi)比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＜ 0.05），低劑量組24 h與48 h，48 h與72 h組內(nèi)比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＞ 0.05）。正常培養(yǎng)液組與d-BSA組相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＞ 0.05），見表1。說(shuō)明棕櫚酸及高糖抑制大鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞增殖，并具有時(shí)間-劑量依賴趨勢(shì)；高糖及高脂聯(lián)合培養(yǎng)組具有協(xié)同抑制作用，且具有時(shí)間依賴趨勢(shì)。見圖3。

注：橫坐標(biāo)（X軸）代表分組：①1640組為正常對(duì)照組（含GLU5.5 mmol/L）；②d-BSA組為0.5%d-BSA+1640對(duì)照組（含GLU5.5 mmol/L）；③高糖組為30 mmol/L GLU組；④聯(lián)合組為30 mmol/L GLU+400 μmol/L PA；⑤低濃度PA為200 μmol/LPA組；⑥中濃度PA為400 μmol/L PA組；⑦高濃度PA為600 μmol/L PA組；縱坐標(biāo)（Y軸）代表增殖率

圖3 FFAs及葡萄糖對(duì)RAEC增殖的影響

2.4 細(xì)胞生長(zhǎng)曲線

大鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞在傳代接種2 h后開始貼壁，24 h后90%細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)，24～48 h間細(xì)胞量有所減少，48 h后可見新長(zhǎng)出的細(xì)胞為單層、互不重疊，傳代細(xì)胞增殖速率較原代細(xì)胞增長(zhǎng)稍快，第4～7天為對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，第8～9天為平臺(tái)期。細(xì)胞生長(zhǎng)曲線呈“S”型。見圖4。

圖4 大鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)曲線

2.5 細(xì)胞免疫組化法檢測(cè)結(jié)果

正常對(duì)照組、d-BSA對(duì)照組培養(yǎng)內(nèi)皮細(xì)胞48 h后，IL-8、BAX幾乎不表達(dá)或弱表達(dá)，兩個(gè)對(duì)照組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＞ 0.05）。不同濃度FFAs、高糖及聯(lián)合培養(yǎng)組處理細(xì)胞后，細(xì)胞IL-8表達(dá)明顯增高，且具有劑量-時(shí)間依賴關(guān)系，與對(duì)照組相比，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＜ 0.05）；細(xì)胞Bcl-2表達(dá)隨時(shí)間延長(zhǎng)及濃度的增高表達(dá)逐漸減弱，與正常對(duì)照組及d-BSA對(duì)照組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＜ 0.05）；而細(xì)胞BAX表達(dá)則隨時(shí)間的延長(zhǎng)及濃度的增加表達(dá)亦增強(qiáng)，與正常對(duì)照組及d-BSA組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＜ 0.05）。Bcl-2/BAX比值隨葡萄糖及棕櫚酸濃度增高逐漸減低，聯(lián)合培養(yǎng)組為甚。見表2。

3 討論

糖尿病血管病變是糖尿病特異的病理生理改變，是糖尿病多種并發(fā)癥的共同病理生理基礎(chǔ)（糖尿病腎病、糖尿病視網(wǎng)膜病變、糖尿病心血管病變）。2型糖尿病患者常伴有血脂代謝異常，血清游離脂肪酸濃度隨著血糖的增高而發(fā)生改變，伴隨空腹血糖水平的升高而升高[3]。血管內(nèi)皮細(xì)胞裱襯在整個(gè)心血管系統(tǒng)的內(nèi)表面，是血管壁與血液之間的分界細(xì)胞，是形成心血管封閉管道系統(tǒng)的形態(tài)基礎(chǔ)。血管內(nèi)皮細(xì)胞不僅是炎癥反應(yīng)的中介物，也是受損靶器官，通過(guò)一系列復(fù)雜的機(jī)制從而影響炎癥反應(yīng)的進(jìn)展和結(jié)局。內(nèi)皮細(xì)胞的存活和細(xì)胞的程序性死亡在維護(hù)血管結(jié)構(gòu)及血管生成中是極其重要的[4]。

bcl-2基因（即B細(xì)胞淋巴瘤/白血病-2基因）是一種原癌基因，具有抑制凋亡的作用。bax基因?qū)儆赽cl-2基因家族，編碼的BAX蛋白可與Bcl-2形成異二聚體，對(duì)Bcl-2產(chǎn)生阻抑作用。bax與bcl-2相互制約，在正常情況下二者保持一種平衡狀態(tài)。研究發(fā)現(xiàn)Bax/Bcl-2兩蛋白之間的比例關(guān)系是決定對(duì)細(xì)胞凋亡抑制作用強(qiáng)弱的關(guān)鍵因素，因此認(rèn)為，bax是極重要的促細(xì)胞凋亡基因之一。BAX主要位于細(xì)胞質(zhì)中，當(dāng)?shù)蛲霭l(fā)生時(shí)，BAX即刻轉(zhuǎn)移到線粒體并與線粒體膜相結(jié)合，通過(guò)加速線粒體內(nèi)細(xì)胞色素C的釋放和增加Caspases的活性來(lái)促進(jìn)細(xì)胞凋亡。目前國(guó)內(nèi)外大多數(shù)學(xué)者把細(xì)胞Bcl-2/BAX值作為判斷細(xì)胞凋亡是否被抑制或加強(qiáng)的主要標(biāo)志之一[5]。

高血糖能通過(guò)減少Akt活性抑制葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)子4（GLUT-4）介導(dǎo)葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)，導(dǎo)致2型糖尿病。高葡萄糖可明顯引起內(nèi)皮細(xì)胞的早期凋亡，而不影響細(xì)胞的壞死，其形成可能與Akt酶活性下降有關(guān)?？赡苁峭ㄟ^(guò)PI3K-Akt信號(hào)途徑抑制內(nèi)皮細(xì)胞增殖，Akt的308位點(diǎn)蘇氨酸磷酸化是葡萄糖影響內(nèi)皮細(xì)胞增殖信號(hào)級(jí)聯(lián)中的敏感元件[6]。PI3K-Akt信號(hào)途徑在葡萄糖對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞增殖和凋亡過(guò)程中起了重要的作用[7]。因此，嚴(yán)格控制血糖是有效防治糖尿病血管并發(fā)癥的措施。

IL-8由多種細(xì)胞產(chǎn)生，包括外周血淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞、中性粒細(xì)胞等，近來(lái)發(fā)現(xiàn)內(nèi)皮細(xì)胞及腎小管上皮細(xì)胞也可產(chǎn)生。IL-8參與多種炎癥疾患的發(fā)病過(guò)程，其自分泌和旁分泌功能已被證實(shí)在血管新生、腫瘤生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移中起重要作用[8，9]。Tashiro等發(fā)現(xiàn)，糖尿病患者尿中IL-8水平與HbA1c水平有顯著聯(lián)系，提示高血糖可能刺激IL-8的合成和分泌[10]。我們的實(shí)驗(yàn)證實(shí)，在高糖條件下，與對(duì)照組相比，IL-8表達(dá)增加，與Tashiro所觀察到的反應(yīng)一致；而在FFAs干預(yù)下，實(shí)驗(yàn)組中呈陽(yáng)性表達(dá)，在正常對(duì)照組細(xì)胞內(nèi)呈陰性表達(dá)，由此推測(cè)，在FFAs的誘導(dǎo)下，IL-8的上調(diào)，進(jìn)一步介導(dǎo)炎性反應(yīng)，在聯(lián)合組中，高糖及高脂具有協(xié)同作用，參與了糖尿病血管病變的發(fā)展和惡化。

本實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)大鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞在葡萄糖及FFAs干預(yù)下，細(xì)胞凋亡增加，并具有濃度-劑量依賴趨勢(shì)。在高糖環(huán)境下，F(xiàn)FAs引起Akt快速激活，并導(dǎo)致PI3K受體激活，增加了細(xì)胞內(nèi)活性氧水平，通過(guò)氧化應(yīng)激使細(xì)胞內(nèi)IL-8表達(dá)增加，同時(shí)激活PKC通路，使其轉(zhuǎn)位，引起其下游Bcl-2蛋白表達(dá)減弱，BAX表達(dá)增強(qiáng)，因此，Bcl-2/BAX比值減小。FFAs誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞凋亡可能部分通過(guò)bcl-2改變線粒體膜的功能，并釋放細(xì)胞色素C，部分通過(guò)調(diào)整Bcl-2/BAX的比率引起細(xì)胞凋亡。因此，Bcl-2可抑制線粒體介導(dǎo)的細(xì)胞死亡[11]。高糖環(huán)境下，高棕櫚酸酯可激活細(xì)胞凋亡的機(jī)制導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞凋亡，PI3K-Akt信號(hào)缺陷參與了糖尿病血管病變的發(fā)生發(fā)展，從而引起2型糖尿病患者心血管并發(fā)癥。

本研究結(jié)果顯示，糖尿病患者血漿中升高的FFAs通過(guò)影響內(nèi)皮細(xì)胞的功能，損傷內(nèi)皮細(xì)胞的完整性，從而在糖尿病血管病變中扮演一個(gè)非常重要的角色。FFAs引起的脂毒性在糖尿病血管病變中有重要的發(fā)病學(xué)意義，深入研究其發(fā)病機(jī)制及其作用機(jī)制，對(duì)預(yù)防及延緩糖尿病血管病變的發(fā)生發(fā)展具有廣闊的前景和重要的臨床價(jià)值。

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（收稿日期：2012-01-16）