摘要:淀粉酶是在工業(yè)生產(chǎn)上應(yīng)用最早并且迄今仍是用途最廣、產(chǎn)量最大的酶制劑產(chǎn)品之一。得益于現(xiàn)代生物高科技的快速發(fā)展,人們對淀粉酶的研究在酶學(xué)性質(zhì),結(jié)構(gòu)組成,基因-功能,作用機(jī)制等方面更是取得了長足的進(jìn)展。文章從淀粉酶的來源,生產(chǎn)及新型淀粉酶開發(fā)等方面進(jìn)行簡單介紹。
關(guān)鍵詞:淀粉酶;酶制劑
中圖分類號:TS201.25 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A文章編號:1674-0432(2012)-10-0242-1
0 前言
淀粉酶是水解淀粉和糖原的酶類總稱。我國幾乎所有的淀粉深加工工業(yè)基礎(chǔ)都是以水解淀粉質(zhì)原材料作為第一步,而改進(jìn)淀粉水解能力的關(guān)鍵則在于提高淀粉酶的生產(chǎn)水平。因此,篩選分離產(chǎn)酶高效菌株,優(yōu)化產(chǎn)酶培養(yǎng)基與發(fā)酵條件成為研究熱點(diǎn)。
1 淀粉酶的廣泛分布
淀粉酶的來源很廣泛,可以來自于植物(大麥,甘薯等)、動(dòng)物(唾液,胰臟等)以及微生物。微生物的酶幾乎都是分泌性的。此酶以Ca2+為必需因子并作為穩(wěn)定因子和激活因子,也有部分淀粉酶為非Ca2+依賴型。下面我們對幾種常見的淀粉酶進(jìn)行說明:Ⅰ.α-淀粉酶是胞外酶,又稱為液化型淀粉酶,它作用于淀粉時(shí),隨機(jī)地從淀粉分子內(nèi)部切開α-1,4-葡萄糖苷鍵,使淀粉水解生成糊精和一些還原糖,所生成的的產(chǎn)物均為α-型,故稱為α-淀粉酶,目前使用較多的是細(xì)菌淀粉酶,因其具有容易培養(yǎng),生長周期短,反應(yīng)條件溫和等優(yōu)良特性。最成功的例子就是淀粉液化芽孢桿菌的工業(yè)化生產(chǎn);Ⅱ.β-淀粉酶又稱為麥芽糖苷酶,是一種催化淀粉水解生成麥芽糖的淀粉水解酶。它作用于淀粉時(shí),從淀粉分子的非還原端開始,作用于α-1,4-葡萄糖苷鍵,順次切下麥芽糖單位,同時(shí)發(fā)生沃爾登轉(zhuǎn)位反應(yīng)生成的麥芽糖由α-型轉(zhuǎn)為β-型,故稱為β-淀粉酶,主要來源于植物,也有報(bào)告在細(xì)菌,牛乳,霉菌中存在,它是在細(xì)胞外起作用的酶。Ⅲ.葡萄糖淀粉酶是外切酶,從淀粉分子的非還原端開始逐個(gè)地水解α-1,4-葡萄糖苷鍵,生成葡萄糖,該酶還具有一定的水解α-1,6-葡萄糖苷鍵和α-1,3-葡萄糖苷鍵的能力。商業(yè)上所用的葡萄糖淀粉酶也是來源于微生物,在所有微生物中,真菌是葡萄糖淀粉酶的主要來源。
2 淀粉酶的生產(chǎn)
雖然產(chǎn)生淀粉酶的微生物種類眾多,但是要獲得能夠進(jìn)行工業(yè)化生產(chǎn)的菌株也并非輕而易舉。不同種屬微生物產(chǎn)生的淀粉酶性質(zhì)也會(huì)不同,有時(shí)候一種菌株還能夠產(chǎn)生多種酶,例如α-淀粉酶和葡萄糖淀粉酶,因此篩選分離高效專一的產(chǎn)酶菌株勢在必行。淀粉酶的工業(yè)化生產(chǎn)可以從產(chǎn)酶培養(yǎng)基和發(fā)酵條件進(jìn)行優(yōu)化,主要步驟通常包括菌株活化,細(xì)胞擴(kuò)大培養(yǎng),發(fā)酵,產(chǎn)酶。在此過程中,特別要注意控制環(huán)境因素,根據(jù)所需目的酶的不同,提供微生物生長的最適條件,這些動(dòng)力條件包括:培養(yǎng)基中碳源,氮源比例、無機(jī)鹽濃度,生長因子,培養(yǎng)基的PH、溶解氧、溫度以及發(fā)酵過程中對污染的控制。總的來說,淀粉酶的發(fā)酵主要有兩種方法,即浸沒發(fā)酵和固態(tài)發(fā)酵。由于固態(tài)發(fā)酵具有經(jīng)濟(jì)上和工程上的優(yōu)點(diǎn),因此人們常常采用這種方法生產(chǎn)淀粉酶。
3 新型淀粉酶的探索與應(yīng)用
由于酶工業(yè)化生產(chǎn)的要求,一些能經(jīng)受得住高溫,高PH的淀粉酶相繼被發(fā)現(xiàn)。如用淀粉液化芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌生產(chǎn)的耐高溫α-淀粉酶已經(jīng)占據(jù)相當(dāng)大的市場。隨后開發(fā)的蠟樣芽孢桿菌也是一種生產(chǎn)耐高溫α-淀粉酶的優(yōu)良菌株,它產(chǎn)生的淀粉酶最佳反應(yīng)溫度為90℃~100℃,最佳pH范圍為6.0~10.0。劉芳等人采用紫外誘變育種方法選育出了使甜酒風(fēng)味更足,甜味更濃的遺傳性能穩(wěn)定的高淀粉酶活力優(yōu)良突變菌株——SCLG-華根霉28?,F(xiàn)代基因工程手段的應(yīng)用也給淀粉酶的規(guī)?;a(chǎn)帶來了福音。劉大明等人用基因克隆的方法獲得了兩個(gè)突變株,大大提高了淀粉酶的活性,劉莉等人實(shí)現(xiàn)了在大腸桿菌中克隆芝田硫化葉B12新型淀粉酶基因。南沖等人報(bào)道了G4-新型淀粉酶對米制品回生具有很好的抑制效果,其作用機(jī)制是G4淀粉酶通過切斷支鏈淀粉的側(cè)鏈,降低其形成雙螺旋的趨向,從而降低支鏈淀粉回生的速率,抑制淀粉的回生。目前,科學(xué)家正通過多種途徑尋找產(chǎn)生淀粉酶的新菌株,并運(yùn)用分子生物學(xué)手段克隆新基因,同時(shí)構(gòu)建高效表達(dá)酶蛋白的基因工程菌,以期達(dá)到廉價(jià)大規(guī)模生產(chǎn)淀粉酶的目的。
4 展望
放眼未來,淀粉酶這一神奇的催化劑將在更多的領(lǐng)域中獲得更廣泛的應(yīng)用。新工藝需要新方法,新材料,新淀粉酶。我國雖然在淀粉酶應(yīng)用上比較早,但是我們也該清楚的看到,我國淀粉酶的商業(yè)規(guī)?;a(chǎn)仍然局限于幾種特定的真菌和細(xì)菌中,我們的酶制劑工藝與發(fā)達(dá)國家相比還存在一定差距,是進(jìn)入國際市場參與國際競爭的一個(gè)瓶頸。我們必須努力研制開發(fā)新菌株,優(yōu)化酶制劑工藝流程,提高我國在該行業(yè)的國際競爭力。
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作者介紹:段爽(1987-),女,吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士,研究方向:食品新型淀粉酶的基礎(chǔ)性質(zhì)研究。